Article de méthode
Nous décrivons un protocole pour induire enrichissante et nonrewarding expériences dans les mouches des fruits (Drosophila melanogaster) en utilisant la consommation volontaire d'éthanol en tant que mesure des changements dans les états de récompense.
Nous décrivons un protocole de mesure de l' éthanol auto-administration dans les mouches des fruits (Drosophila melanogaster) comme un proxy pour les changements d'états de récompense. Nous démontrons une façon simple de puiser dans le système de récompense à la mouche, de modifier les expériences liées à la récompense naturelle, et utiliser la consommation volontaire d'éthanol en tant que mesure des changements dans les états de récompense. L'approche est un outil utile pour étudier les neurones et les gènes qui jouent un rôle dans les changements d'état interne expérience médiée. Le protocole est composé de deux parties distinctes: l'exposition des mouches à des expériences enrichissantes et nonrewarding, et le dosage de la consommation volontaire d'éthanol en tant que mesure de la motivation pour obtenir une récompense de drogue. Les deux parties peuvent être utilisées indépendamment pour induire la modulation de l'expérience comme une étape initiale pour d'autres essais en aval ou comme un essai d'alimentation à deux choix indépendant, respectivement. Le protocole ne nécessite pas d'installation compliquée et peut donc être appliquée dans tous les laboratory avec les outils de base de la culture à la mouche.
Modification du comportement en réponse à l' expérience permet aux animaux d'adapter leur comportement aux changements dans leur environnement 1. Au cours de ce processus, les animaux intègrent leur état physiologique interne avec les conditions changeantes de l'environnement extérieur et ensuite choisir une seule action sur une autre pour augmenter leurs chances de survie et de reproduction. Les systèmes de récompense ont évolué pour motiver les comportements qui sont nécessaires pour la survie des individus et des espèces en renforçant les comportements qui améliorent la survie immédiate, comme manger ou boire, ou celles qui assurent la survi....
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Note: aperçu général de la conception expérimentale: Le dispositif expérimental comprend un protocole adapté pour la parade nuptiale suppression 7-9 dans laquelle les mouches mâles sont exposés à des expériences enrichissantes et nonrewarding en 3 sessions de formation consécutives au cours de 4 d. A la fin de la phase de l'expérience, les mouches sont testés dans un dosage volontaire de la consommation d'éthanol à deux choix pour les 3 - 4 d. Le protocole ici comprend plusieurs étapes préparatoires, dont certaines peuvent être faites à l' avance pour être utilisé dans plus d'une expérience, tandis que d' autres devraient avoir lieu en temps opportun avant ....
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FPreviously, Devineni et al. ont montré que lorsque les mouches des fruits ont le choix de consommer des aliments contenant de l' éthanol, ils affichent une forte préférence pour les aliments contenant de l' éthanol sur nonethanol contenant de la nourriture 6. Montré voici quelques résultats représentatifs que nous avons obtenus lors du dosage de la préférence de l'éthanol inné de naïfs mouches mâles qui n'a pas subi le protocole de formation.
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Ici, nous illustrons les détails d’une approche intégrée pour mesurer les altérations du comportement de recherche de récompense, basée sur des travaux antérieurs décrits par Devineni et al.6 et Shohat-Ophir et al5. La première section du protocole utilise différents types d’interactions sexuelles comme entrée d’expérience, et la deuxième section utilise un test d’alimentation à deux choix pour évaluer l’effet de l’expérience sur la préférence pour la consommation d’éthanol.
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Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Nous remercions U. Heberlein et A. Devineni pour des discussions de longue durée et des conseils techniques. Nous remercions également les membres du laboratoire Shohat-Ophir, A. Benzur, L. Kazaz et O. Shalom, pour l'aide à la démonstration de la méthode. appréciation spéciale va à Eliezer Costi pour établir les systèmes de mouche dans le laboratoire. Ce travail a été soutenu par la Fondation Israël Science (384/14) et les Curie de carrière d'intégration Subventions Marie (CIG 631127).
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| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Polystyrène 25 x 95 mm Flacons | FlyStuff | 32-109 | |
| flacons étroits en plastique | FlyStuff | 42-102 | |
| Aiguille stérile jetable 18 G et 27 G ; | peut être acquis par n’importe quelle entreprise | 1,20 X 38 mm (18 G x 1 1/2 ») , 0,40 X 13 mm (27 G x 1/2 ») | |
| 10 x 75 mm Tubes de culture jetables en verre borosilicaté | kimble chase | 73500-1075 | |
| Pipettes calibrées 5 μ ; L | VWR | 53432-706 | codé en couleur blanc pour contenir 5 μ ; L |
| Huile minérale ; | Sigma-Aldrich ; | M5904 | |
| Saccharose, biologie moléculaire Qualité | CALBIOCHEM | 573113 | |
| Extrait de levure La poudre pour la microbiologie | peut être achetée par n’importe quelle entreprise | ||
| Éthanol | Sigma-Aldrich ; | 32221 | |
| Pointes de pipette standard (micro-pipettes) | ThermScientific | T114R-Q | volume : 0,1 - 20 μ ; L (ultramicro) |
| IDENTI-PLUGS (Bouchons pour tubes en mousse) | Jaece | L800-A | pour les ouvertures de 6 à 13 mm |
| IDENTI-PLUGS (Bouchons pour tubes en mousse) | Jaece | L800-D | pour les ouvertures de 35 à 45 mm |
| Porte-mouches virginator ; | Bloomington Drosophila Stock Center | #24638 | |
| Flacons étroits, Tray Pack (PS) | Genesee Scientific Corporation | ;# 32-109BR | |
| Drosophila Media Recettes et méthodes | Bloomington Drosophila Stock Center | http://flystocks.bio.indiana.edu/Fly_Work/media-recipes/molassesfood.htm | |
| propionic acid | Sigma-Aldrich ; | P5561 | |
| acide phosphorique | Sigma-Aldrich ; | ||
| 4-hydroxybenzoate de méthamphle | sigma-aldrich ; | H3647 | |
| Agar Agar | peut être acquis par n’importe quelle entreprise | ||
| semoule de maïs | peut être acquise par n’importe quelle entreprise | ||
| Mälasses de grand-mère | B& G Foods, Inc | non indiqué | |
| levure sèche instantanée | peut être acquise par n’importe quelle entreprise |
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