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Article de méthode

L'exposition du porc du système nerveux central pour l'analyse anatomopathologique: Un manuel pour Décapitation, Crâne d'ouverture et cerveau suppression

16.1K vues

DOI :

10.3791/55511

13 avril 2017

Dans cet article

Résumé

Le but de cet article et vidéo d'instruction est de décrire comment exposer et enlever le cerveau de porc post-mortem et hypophyse dans un état intact, adapté à l'analyse macroscopique et histologique.

Résumé

Les porcs sont devenus de plus en plus populaire dans la recherche en neurosciences translationnelle grand animal comme sur le plan économique et sur le plan éthique substitut possible aux primates non humains. La grande taille du cerveau du porc permet l'utilisation des imageurs du cerveau clinique classique et l'utilisation directe et le contrôle des procédures et de l'équipement neurochirurgicales de la clinique humaine. Une analyse plus poussée macroscopique et histologique, cependant, exige une exposition post-mortem du système nerveux central de porc (CNS) et l'élimination ultérieure du cerveau. Ce n'est pas une tâche facile, comme le porc du système nerveux central est encapsulé par un crâne épais, osseux et de la colonne vertébrale. Le but de cet article et vidéo d'instruction est de décrire comment exposer et enlever le cerveau de porc post-mortem et l'hypophyse dans un état intact, adapté à l'analyse macroscopique et histologique.

Introduction

Des études en neurosciences translationnelles chez les porcs sont devenus de plus en plus populaires au cours des deux dernières décennies. La grande taille du cerveau de porc permet l'utilisation d'imageurs du cerveau clinique classiques et l'utilisation directe et les tests des procédures neurochirurgicales et de l' équipement de la clinique humaine 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8. Au cou....

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Protocole

anesthésie animale et euthanesia a été réalisée conformément aux « Principes de protection des animaux de laboratoire » (publication NIH n ° 86-23, révisé 1985) et approuvé par le Conseil danois pour l'éthique de la recherche animale.

1. Instruments

  1. Recueillir les instruments présentés dans la vidéo et figurant dans la table des matières.

2. Décapitation

NOTE: L'anesthésie a été induite par une injection intramusculaire de 5 mL de midazolam (5 mg / ml) et 5 ml de kétamine (25 mg / ml). 5-10 min plus tard, quand l'animal a été profondément....

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Résultats

Pour éviter que le matériau de tissu de sécher, il est recommandé de stocker le cerveau enlevé et pituitaire dans un bocal rempli de fixatif ou une solution saline isotonique immédiatement après l'analyse macroscopique a été réalisée. Le matériau de tissu peut être stocké dans le fixatif pendant des années, alors que le stockage dans une solution saline isotonique, même dans un réfrigérateur, conduira à la désintégration du tissu avec le temps.

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Discussion

La plupart des études de neuroscience expérimentales sont réalisées en petites espèces d'animaux, comme les souris et les rats, où l'accès au SNC est facilitée par une fine épaisseur dural et skull-. Cependant, chez les animaux expérimentaux plus grands comme les porcs 1, 4, 8, les moutons 32 et les primates non humains, l'épaisseur considérable de ces structures nécessite l'utilisation d.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n'ont rien à dévoiler.

Remerciements

Les auteurs reconnaissent avec gratitude l'aide habile de Mme Trine W. Mikkelsen, Mme Lise M. Fitting, et le personnel Påskehøjgaard. Le Conseil de recherches médicales du Danemark, la Fondation Lundbeck et la Novo Nordisk Fondation a soutenu financièrement l'étude.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Manche de scalpel lourd #4FST (Fine Science Tools)10008-13Bon pour l’incision cutanée et l’ablation des tissus mous
Lames de scalpel non stériles #23FST  ;10023-00
Manche de scalpel #7FST  ;10007-12Optimal pour l’incision durale et le travail
de précision Lames de scalpel non stériles #11FST  ;10011-00
Pince chirurgicaleFST  ;11024-18L’extrémité de la pince chirurgicale assure une prise ferme  ;
Kerrison Bone PunchAesculap NeurosurgeryFF713RDoit être robuste, taille de l’occlusion 3-5 mm
Rongeur osseuxAesculap NeurosurgeryMD615Doit être robuste, taille de l’occlusion 15 x 5 mm
Bone RongeurAesculap NeurosurgeryFO551RDoit être robuste, taille de l’occlusion 25 x 15 mm  ;
Ciseau à osLawton67-0335La taille de la tête du ciseau ne doit pas dépasser 20 mm
Maillet (marteau)Millarco5624108Poids 300 g, longueur 30 cm, taille de la zone de frappe de la tête 2 x 2 cm
Micro-ScissorFST  ;14002-14  ;   ;
DissectorAesculap NeurochirurgieOL165R
Gö ; ttingen minipigsEllegaard Gö ; ttingen Minipigs A/S, Danemark
Euthanimalpentobarbital
KétaminePfizer
Midazolam  ;Hameln Pharmaceuticals

Références

  1. Lind, M. N., Moustgaard, A., Jelsing, J., Vajta, G., Cumming, P., Hansen, A. K. The use of pigs in neuroscience: Modeling brain disorders. Neurosci Biobehav Rev. 31, 728-751 (2007).
  2. Bjarkam, C. R., et al. Neuromodulation in a minipig model of Parkinson disease. British ....

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Réimpressions et autorisations

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