Method Article

Évaluation de la procédure pour effectuer une cystéromie éveillée dans un modèle de souris

DOI:

10.3791/55588

⸱

May 20th, 2017

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Surgery, University of Vermont, 2Department of Urology and Biomedical Laboratory, University of Southern Denmark, 3Wake Forest Institute for Regenerative Medicine, Wake Forest University, 4Institute for Clinical Medicine, Aarhus University

* These authors contributed equally

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Cette étude décrit les procédures chirurgicales et les techniques expérimentales pour effectuer une cystométrie éveillée dans une souris qui se déplace librement. En outre, il fournit des preuves expérimentales pour soutenir son optimisation et sa standardisation.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

La cystométrie de remplissage éveillée a été utilisée pendant longtemps pour évaluer la fonction de la vessie chez les souris qui se déplacent librement, mais les méthodes spécifiques utilisées varient selon les laboratoires. L'objectif de cette étude était de décrire la procédure microchirurgicale utilisée pour implanter un tube intravésical et la technique expérimentale pour l'enregistrement de la pression de la vessie dans une souris éveillée et en mouvement libre. En outre, des données expérimentales sont présentées pour montrer comment la chirurgie, ainsi que le type et la taille du tube, affectent la fonction inférieure du système urinaire et la sensibilité de l'enregistrement. L'effet du diamètre du tube sur l'enregistrement sous pression a été évalué dans des tubes en polyéthylène et en polyuréthane avec des diamètres internes différents. Par la suite, le tube le plus performant des deux matériaux a été implanté chirurgicalement dans le dôme de la vessie de souris mâles C57BL / 6. Une fréquence de miction de douze heures et une nuit a été enregistrée chez des animaux et des animaux sains, intacts 2, 3, 5 et 7 jours après la chirurgie. À la récolte, les vessies wOn a évalué les signes de gonflement en utilisant une observation brute et ont ensuite été traités pour une analyse pathologique. La plus grande étendue du gonflement de la vessie a été observée au jour 2 et 3, ce qui était en corrélation avec les données de mictions comportementales montrant une déficience significative de la fonction de la vessie. Au jour 5, l'histologie de la vessie et la fréquence d'annulation ont été normalisées. Sur la base de la littérature et des preuves fournies par nos études, nous proposons les étapes suivantes pour l' enregistrement in vivo de la pression intravésicale et du volume annulé dans une souris éveillée: 1) Effectuer la chirurgie à l'aide d'un microscope opérationnel et d'outils microchirurgicaux, 2) Utiliser du polyéthylène-10 Tubes pour minimiser les artefacts de mouvement, et 3) Effectuer la cystométrie le jour 5 après l'opération, lorsque le gonflement de la vessie se résout.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

La cystométrie de remplissage (FC) est une méthode de diagnostic consistant à placer un cathéter dans la vessie pour enregistrer la pression pendant le remplissage lent de la vessie. Introduit en 1927 en tant que méthode de diagnostic clinique pour évaluer la fonction des voies urinaires inférieures, il est resté largement utilisé. 1 Dans les applications de recherche, le FC peut être utilisé pour tester la fonction de la vessie dans des modèles animaux sains et malades et pour étudier les effets des agents pharmacologiques. Les modèles animaux de rongeurs sont couramment utilisés pour étudier la fonction des voies urinaires inférieures.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Les animaux ont été hébergés dans l'établissement de soins des animaux de l'Université de Vermont selon les lignes directrices institutionnelles. Toutes les expériences sur les animaux ont été effectuées conformément au guide des instituts nationaux de la santé pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire.

1. Intravesical Tube Implantation

  1. Préparation de tubes et d'instruments pour la procédure chirurgicale
    1. Couper un morceau de PE10 de 7 cm pour former le cathéter pour l'implantation.
    2. Créez une étincelle à une extrémité du tube PE10 en avançant lentement l'....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Il n'y avait pas de différence significative entre les matériaux et les diamètres des tubes dans la consistance de l'augmentation de la pression et tombent dans le système pendant l'occlusion du tube. L'implantation du tube intravésical après gonflement de la paroi de la vessie était significative pour les matériaux en polyéthylène (PE) et en polyuréthane (PU). Le jour 2, un gonflement sous-muqueux sévère s'est développé. Il occupait la moitié de la section transversale de la vessie, ent.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Matériau optimal et taille du tube intravésiculaire

Pour déterminer l'effet du diamètre du tube sur les enregistrements de pression, nous avons testé différents tubes microfluidiques; PE50 (0,58 mm ID), polyuréthane PU027 (0,4 mm ID), PE25 (0,46 mm ID) et PE10 (0,28 mm ID). Pour chaque tube, la pression a été enregistrée avec la pompe à perfusion à 1 mL / h, tout en déplaçant rapidement le tube verticalement de 0 à 30 cm. Les expériences initiales in vivo ont tenté d'utiliser le tube PE.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Cette étude a été financée par le Département de chirurgie de l’Université du Vermont, le Conseil danois pour la recherche indépendante et par l’Hôpital universitaire d’Odense.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Tube en polyéthylène (PE) 10InstechBTPE-10Convient aux connecteurs/prises 30G
Tube en polyéthylène (PE) 50 InstechBTPE-50Convient aux connecteurs/prises 22G
Pivot monocanal en acier inoxydable 22GInstech375/22
Ressort d’extension utilitaire en acier à haute teneur en carbone (9/64" OD)Grainger1NAH1Protège les tubes PE50 - Coupé à longueur
Connecteur 22 GInstechSP22/12
Yutaoz Professional Hot Melt Adhesive Glue GunYutaozUtilisez le réglage à basse température (100 ° ; C) - Tout pistolet à colle thermofusible avec une plage de température réglable fonctionnera
Surebonder DT-2010 bâton de colle tout usageSurebonderToute colle chaude tout usage fonctionnera
Dumont #5 micropince incurvéeWorld Precision Instruments500232
Dumont #7 micropince incurvéeWorld Precision Instruments14188
Mini ciseaux de dissection - droitWorld Precision Instruments503240
Micro pince à moustiques (12,5 cm)World Precision Instruments500451
Ciseaux de dissection - droitsWorld Precision Instruments14393
Porte-aiguilles CastroviejoPrecision Instruments503258
Isoflurane, USPPhoenix2 %, débit de 1 L/min
Buprénorphine0,05 mg/kg
0,9 % Chlorure de sodium Irrigation, USPBaxter
6-0 Ethilon monofilament noir, suture non résorbableEthiconAttache de vessie
6-0 Vicryl violet tressé, suture résorbableEthiconSuture musculaire, course à pied
6-0 Prolene blue monofilament, suture non résorbableEthiconSuture cutanée, matelas vertical, enterré interrompu
KD Legato 210 pompe de perfusion/retraitKD Scientific1,5 mL/h
Transducteur de pression jetableDigitimerNL108T2
Amplificateur de pressionDigitimerNL108A
Power1401-3 interface d’acquisition de donnéesDigitimer
Spike2  ;Cambridge Electronic Design LimitedLogiciel d’enregistrement de pression sur PC
Microscope opératoire chirurgical Leica MZ6 (3.2 - 20X)Leica MicrosystemsGrossissement
World

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Perez, L. M., Webster, G. D. The History of Urodynamics. Neurourol Urodyn. 11 (1), 1-21 (1992).
  2. Fry, C. H., et al. Animal models and their use in understanding lower urinary tract dysfunction. Neurourol Urodyn. 29 (4), 603-608 (2010).
  3. Maggi, C. A., Santicioli, P., Meli, A.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Awake CystometryMouse ModelIntravesical TubeMicrosurgical ProcedureBladder Pressure RecordingPolyethylene 10 TubingPost Operative Day 5Urinary BladderLower Urinary TractFilling Cystometry

Related Articles