Dissection du pancréas de souris pour faire une analyse histologique et profilage métabolique

Résumé

Cet article vidéo fournit une démonstration détaillée des procédures requises pour réussir à éliminer le pancréas de souris par la technique pour faire une analyse histologique et profils métaboliques.

Résumé

Nous avons enquêté sur le facteur de transcription spécifique de pancréas, 1 a cre-recombinase ; sarcome de LOX-stop-lox-Kristen rat, glycine, acide aspartique au codon 12 (Ptf1a^{cre / +}; LSL-Kras^{G12D / +}) souche de souris comme un modèle de cancer pancréatique humain. L’objectif de nos études actuelles est d’identifier de nouveaux biomarqueurs métaboliques de la progression du cancer du pancréas. Nous avons effectué des profils métaboliques d’urine, selles, sang et extraits de tissus du pancréas, ainsi que des analyses histologiques du pancréas à l’étape de la progression du cancer. Le pancréas de souris n’est pas un organe solid bien défini comme chez les humains, mais il s’agit plutôt d’un tissu mou diffusément distribué qui n’est pas facilement identifiable par des individus peu familiers avec l’anatomie interne de la souris ou par des individus qui ont peu ou aucune expérience en spectacle dissections de souris d’orgue. Le but de cet article est de fournir un détail lavage démonstration visuelle pour guider les novices dans l’élimination du pancréas de souris par la technique. Cet article devrait être particulièrement utile aux étudiants et aux chercheurs de nouvelles pour la recherche qui nécessite la récolte du pancréas de souris par la technique de profilage métabolique ou des analyses histologiques.

Introduction

La souris est devenue un important modèle animal du cancer pancréatique humain^1,2. Dans le Ptf1a^{cre / +}; LSL-Kras^{G12D / +} modèle murin, la Kristen oncogène de rat sarcoma (K-Ras) intervient exclusivement dans le pancréas, aboutissant à l’initiation des lésions précancéreuses dans le pancréas, appelés les néoplasies intraépithéliales pancréatiques (paninés), que les progrès pour les adénocarcinomes canalaires pancréatiques, communément appelé PDACs³. Ce système de modèle de souris offre l’un des meilleurs modèles animaux disponibles pour cancer pancréatique humain

Protocole

les procédures effectuées dans la vidéo et décrites ci-dessous ont été approuvés par l’utilisation Comité (IACUC) à l’Université de Miami et d’institutionnels animalier.

1. préparation et Test de stimulation

1. établir deux zones distinctes pour l’intervention chirurgicale, la table d’opération et la table après l’opération. Scène de ces deux domaines avec tous les matériaux et tous les ustensiles nécessaires. Table
   1. stade d’exploitation sous une hotte ventilée. Organiser la table avec l’équipement d’une manière qui permet la performance continue et sans encombre de la procédure.
   2. Établit un tableau postopératoire....

Résultats

La figure 1 montre une vue d’ensemble de la zone d’environnement d’exploitation et la Figure 2 montre la zone de fonctionnement du poste. Bien que ce paramètre fournit la quantité minimale de matériel et mise en scène, les personnes peuvent choisir de modifier ceci pour mieux répondre à des besoins individuels. Le protocole doit être optimisé selon les besoins spécifiques de l’expérience. Cette procédure est menée d’une manière q.......

Discussion

Signification en ce qui concerne les méthodes existantes
Parmi les autres vidéos informels des dissections de souris, cet article vidéo fournit la première qualité professionnelle, des pairs, démonstration visuelle de toutes les étapes détaillées nécessaires pour l’extraction et la récolte du pancréas de souris par dissection¹⁰ . Avec le pancréas est un organe principal de l’activité métabolique et l’insuline production, la dissection et la récolte du pancréas permet la préserv.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Bocal en verre  ;	Corning	3140-150	Le bocal en verre utilisé dans la vidéo n’est plus fabriqué. Il s’agit de son remplaçant.
Couvercle du bocal en verre	Corning	9985-150	Le couvercle du bocal en verre utilisé dans la vidéo a été abandonné.  ; Il s’agit de son remplaçant.
15 mL Falcon Tubes	Fisher Scientific	339650
Ciseaux chirurgicaux	Fisher Scientific	9201
Flacon compressible  ;	Fisher Scientific	03-409-10DD
100 % Éthanol	Fisher Scientific	22-032-103
Formol	Fisher Scientific	245-684
Planches en mousse	Therapak	562908
Forceps	Fisher Scientific	200205SHN
1 mL 21G Seringues	BD Biosciences	309624
50 mL Falcon Tubes	Scientific	339652
2,0 mL Tubes à microcentrifuger  ;	Fisher Scientific	02-681-258
Coussinets chirurgicaux	Fisher Scientific	S67011
Longueur des goupilles en T :  ; 2"  ;	Advance Store Products	X32T-05
Lingettes stérilisantes	Professional Disposables International Inc.	Q85084
Conteneur pour objets tranchants	Fisher Scientific	14-827-122
Balance analytique	Marshall Scientific	ME-AE200
4L Dewar	Taylor-Wharton	4LD
Faible et large bouche Dewar	Fisher Scientific	F3087-V
Rack flottant à microtubes	VWR	60986-100
Fiole cryogénique de 1,2 mL, Isothésie stérile	Fisher Scientific	10-500-25
(isoflurane)  ;	Henry Schein Santé animale	050033
Azote liquide	Wright Brothers	NIT-60-XX
Souris Kras Strain	The Jackson Laboratory	OO8179
Souris Cre Strain	MMRRC	OOO435-UNC

Fisher