Article de méthode

Quantification de la dynamique infra-lente de la puissance spectrale et de la fréquence cardiaque chez les souris dormantes

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DOI :

10.3791/55863

2 août 2017

Dans cet article

Résumé

Ici, nous présentons des procédures expérimentales et analytiques pour décrire la dynamique temporelle des variables neuronales et cardiaques du sommeil non-REM chez la souris, qui modulent la réactivité du sommeil aux stimuli acoustiques.

Résumé

Trois états de vigilance dominent la vie des mammifères: l'éveil, le sommeil non-rapide des yeux (non-REM) et le sommeil paradoxal. Comme plus de corrélats neuronaux de comportement sont identifiés chez les animaux en mouvement libre, cette subdivision à trois fois devient trop simpliste. Au cours de l'éveil, des ensembles d'activités corticales globales et locales, ainsi que des paramètres périphériques tels que le diamètre pupillaire et l'équilibre sympathovagal, définissent différents degrés d'éveil. Il ne reste pas clair dans quelle mesure le sommeil forme également un continuum d'états du cerveau - dans lequel le degré de résilience aux stimuli sensoriels et à l'excitation, et peut-être à d'autres fonctions du sommeil, varie progressivement et comment les états physiologiques périphériques co-varient. La recherche de l'avancement des méthodes pour surveiller les paramètres multiples pendant le sommeil, ainsi que l'attribution des constellations de ces attributs fonctionnels, est essentielle pour affiner notre compréhension du sommeil en tant que processus multifonctionnel pendant lequel de nombreux effets bénéfiques doivent être exÉcouté. L'identification de nouveaux paramètres caractérisant les états du sommeil ouvrira des opportunités pour de nouvelles voies diagnostiques dans les troubles du sommeil.

Nous présentons une procédure pour décrire les variations dynamiques des états de sommeil non-REM de la souris via les signaux combinés de surveillance et d'analyse des électroencéphalogrammes (EEG) / électrocorticogramme (ECoG), électromyogramme (EMG) et électrocardiogramme (ECG) en utilisant des techniques d'enregistrement polysomnographique standard. En utilisant cette approche, nous avons constaté que le sommeil non-REM de la souris est organisé en cycles d'oscillations neuronales et cardiaques coordonnées qui génèrent des intervalles de 25 secondes successifs de fragilité élevée et faible aux stimuli externes. Par conséquent, les systèmes nerveux central et autonome sont coordonnés pour former des états de sommeil comportementalement distincts pendant le sommeil non-REM consolidé. Nous présentons des manipulations chirurgicales pour la surveillance polysomographique ( c'est-à-dire EEG / EMG combinée avec ECG) pour suivre ces cycles dans la souris librement dormante, l'analyse à quantiPar leur dynamique et les protocoles de stimulation acoustique pour évaluer leur rôle dans la probabilité de se réveiller. Notre approche a déjà été étendue au sommeil humain et promet de démêler les principes d'organisation communs des états de sommeil non-REM chez les mammifères.

Introduction

Le sommeil des mammifères est un état de repos comportemental et de résilience aux stimuli environnementaux. Malgré cette uniformité apparente, les paramètres polysomnographiques et autonomes indiquent que le sommeil se déplace entre des états neuronaux et somatiques qualitatifs et quantitativement différents sur diverses échelles temporelles et spatiales 1 . Pendant quelques minutes à plusieurs dizaines de minutes, le basculement entre le sommeil non REM et REM se produit. Le sommeil non-REM s'accompagne d'une activité de grande amplitude et de basse fréquence dans l'EEG, avec un pic spectral autour de ~ 0,5 à 4 Hz, alors que le s....

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Protocole

Toutes les procédures expérimentales ont été effectuées conformément au Comité de soins animaux de l'Université de Lausanne et au Service de la Consommation et des Affaires Vétérinaires du Canton de Vaud.

1. Chirurgie pour les enregistrements EEG / EMG-ECG

  1. Logement et sélection d'animaux.
    1. Conserver les animaux (C57Bl / 6J, 7-9 semaines, 25 à 30 g) dans un cycle de 12: 12 h foncé / léger, logé séparément et dans des conditions standard (40% d'humidité, 22 ° C), avec de la nourriture et de l'eau Disponible ad libitum .
    2. N'utiliser que des sujets masculins pour éviter....

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Résultats

La figure 2 A (panneau supérieur) montre des étirements de 100 minutes de comportement spontané du sommeil-réveil, enregistrés par des électrodes polysomographiques utilisées comme décrit (voir la figure 1 ). Les augmentations et les diminutions de l'amplitude EEG et EMG au début du sommeil non-REM sont clairement visibles. Le sommeil REM intermittent est marqué par une diminution de l'amplitude EEG et u.......

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Discussion

Ici, nous montrons comment établir un profil temporel continu du sommeil non-REM qui intègre les variables EEG, EMG et ECG. Il s'agit d'une première étape vers le développement d'une description intégrative du sommeil de la souris, ce qui peut aider à identifier le calendrier précédemment non reconnu sur lequel la résilience élevée et faible au bruit est organisée pendant le sommeil non-REM 1 . Une structure temporelle similaire a également été décrite dans le sommeil humain non-REM p.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu'ils n'ont pas d'intérêt financier concurrent.

Remerciements

Nous remercions tous les membres du laboratoire pour leur contribution à l'écriture et à la lecture attentive de ce manuscrit. Nous remercions Paul Franken de stimuler les discussions, le Dr Gisèle Ferrand pour des commentaires utiles sur le protocole chirurgical, et le Dr Jean-Yves Chatton pour avoir fourni les fichiers exécutables Labview originaux pour l'exposition au bruit. Le financement a été fourni par la Fondation nationale suisse de la science (Subventions 31003A_146244 et 31003A_166318) et l'Etat de Vaud.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Colle époxy 2 composantsHenkelLoctite EA 3450
Fibre de suture résorbable (Prolene)Ethicon5-0 FS-3
Adson ForcepsFST11006-12
Écouvillon antiseptiqueVWR149-0332
Attane IsofluranePiramalIsoflurane 250mL
Connecteurs 3 x 2 canauxENA AG2.316Raster 2,54 x 2,54 mm ; taille 5 x 8 x 9 mm ; taille de la goupille 5 mm ;
http://www.ena.ch/ CollecteurDragonflyModèle #SL-10
Amplificateur EMBLAAmplificateurA10
Ciseaux finsFST14108-09
Vis en acier plaqué or à tête plateJ.I. MorrisFF00CE125https://jimorrisco.com/
Fil d’orCMSAT.69 5grhttp://www.cmsa.ch/en/
Éponge hémostatiquePfizerGelfoam
désinfectant à base d’iode (Betadine)Mundipharmastandart solution 60mL
Komet drill steel 1/005PM104UNOR AG22310
Matlab Analysis SoftwareMathWorksR2016bhttps://ch.mathworks.com/products/matlab.html
MicrodrillFine Science Tools96758
Gaz de souris Anesthésie Support de têteKopf InstrumentsModèle 923-Bhttp://kopfinstruments.com/product/model-923-b-mouse-gas-anesthesia-head-holder/
Pommade ophtalmiquePharmamedicaVITA-POS
Paladur (liquide)UNOR AG2260215pour ciment dentaire
Palavit (poudre)UNOR AG5410929pour ciment dentaire
Petit animal Cadre stéréotaxiqueKopf InstrumentsModèle 930http://kopfinstruments.com/product/model-930-small-animal-stereotaxic-frame-assembly/
Fil à souderStannol593072
Régulateur de température - Mini sonde rectalePhymep4090502http://www.phymep.com/produit/dc-temperature-controller/
Régulateur de température - coussin chauffantPhymep4090205http://www.phymep.com/produit/dc-temperature-controller/
EMBLA

Références

  1. Lecci, S., et al. Coordinated infra-slow neural and cardiac oscillations mark fragility and offline periods in mammalian sleep. Sci Adv. 3 (2), 1602026(2017).
  2. Rechtschaffen, A., Kales, A. A manual of standardized terminology, techniques and scoring system for sleep of human subjects. U.S. Department of Health, Education, and Welfare. , Washington, DC. (1968).
  3. Blake, H., Gerard, R. W.

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Mots-clés

Analyse EEG et ECoGsurveillance EMG et ECGenregistrement polysomnographiquecycles du sommeil non REMprotocole de stimulation acoustiquedynamique de la puissance sigma

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