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Article de méthode

Techniques pour étudier l’anatomie du système visuel Ant

13.9K vues

DOI :

10.3791/56339

27 novembre 2017

Dans cet article

Résumé

Cet article décrit un ensemble de méthodes en microscopie photonique et électronique pour étudier l’anatomie de le œil interne et externe des insectes. Il s’agit de plusieurs techniques traditionnelles, optimisés pour le travail sur les yeux fourmi, détaillée et dépannage ainsi que des propositions d’optimisation pour les différents spécimens et les régions d’intérêt.

Résumé

Cet article décrit un ensemble de méthodes en microscopie photonique (LM) et la microscopie électronique (EM) qui peut être utilisée pour étudier l’anatomie de le œil interne et externe des insectes. Il s’agit de techniques histologiques traditionnelles optimisé pour le travail sur les yeux de fourmi et adapté pour travailler de concert avec d’autres techniques telles que la microscopie électronique à transmission (TEM) et microscopie électronique à balayage (SEM). Ces techniques, bien que très utile, peuvent être difficiles pour la microscopie de novice, alors l’accent a été placé dans cet article sur le dépannage et l’optimisation pour les différents échantillons. Nous fournir des informations sur les techniques d’imagerie pour l’échantillon entier (photo-microscopie et SEM) et discuter de leurs avantages et leurs inconvénients. Nous mettre en évidence la technique utilisée dans la détermination des diamètres de lentille pour le œil entier et discuter des nouvelles techniques d’amélioration. Enfin, nous discutons techniques intervenant dans la préparation des échantillons pour LM et TEM, coupes, coloration et imagerie de ces échantillons. Nous discutons les obstacles que l'on peut trouver dans quelle préparation des échantillons et la meilleure façon de naviguer autour d’eux.

Introduction

Vision est une modalité sensorielle importante pour la plupart des animaux. Vision est particulièrement cruciale dans le contexte de la navigation pour repérage buts, établissant et adhérant aux liaisons et l’obtention des informations boussole1,2. Détecter des informations visuelles à l’aide d’une paire d’yeux composés des insectes et, dans certains cas, yeux simples placés sur le dos d’un à trois appelés ocelles3,4,5.

Aux yeux des fourmis sont particulièrement intéressants parce que, tand....

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Protocole

1. préparation de l’échantillon

Remarque : Il faut d’abord comprendre l’emplacement relatif des yeux composés et ocelles les uns aux autres et sur la tête. Ceci peut être réalisé en faisant l’acquisition des images de la vue dorsale de la tête. Pour ce faire, nous vous recommandons d’échantillons de traitement pour la photomicrographie ou en utilisant des techniques de SEM. Ci-dessous les étapes sont impliquées dans ces deux processus.

  1. Prélèvement d’échantillons
    1. Collecter et stocker les échantillons directement dans l’éthanol à 70 %. Recueillir les différentes castes lorsque cela est possible.

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Résultats

Les méthodes décrites ici permettent une étude détaillée des simples et des yeux composés des fourmis. La vue dorsale de la tête à l’aide de techniques de la photomicrographie Z-pile d’imagerie permet d’obtenir un aperçu de la présentation du système visuel (Figure 1). Il s’agit d’une bonne préparation pour les dissections et pour déterminer l’angle de coupe souhaité. Cette technique est également utile pour prendre des mesures telles que la largeur de la têt.......

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Discussion

La suite des méthodes décrites ci-dessus permettent une enquête efficace sur le système optique de fourmis et autres insectes. Ces techniques d’informent notre compréhension de la résolution d’échantillonnage, une sensibilité optique et sensibilité potentielle de polarisation de le œil à l’étude. Cette connaissance fournit une base importante pour physiologique et comportementaux enquête sur leurs capacités visuelles. En outre, alors que les méthodes détaillées ici ont mis l’accent sur les systèmes visuels de fourmi, ces.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs ne déclarent aucun intérêts opposés.

Remerciements

Nous sommes reconnaissants à Jochen Zeil, Paul Cooper et Birgit Greiner pour partager leurs connaissances en anatomie insecte et pour avoir fait preuve de plusieurs des techniques que nous avons décrit ici. Nous sommes reconnaissants envers le personnel talentueux et de soutien au Centre de microscopie de pointe à ANU et microscopie de l’appareil à MQU. Ce travail a été soutenu par une bourse d’études supérieures de FRE et aux dons de l’Australian Research Council (DE120100019, FT140100221, DP150101172).

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
FourmiMyrmecia midas
StéréomicroscopeLeica M205 FA
Revêtement par pulvérisation cathodiquePro Sci Tech
EthanolSigma Aldrich
Boîte de PétriProSciTech
Microscope de dissectionLeica MZ6
Insect PinProSciTech
Vernis à ongles incoloreSans marque : de n’importe quel magasin
LameProSciTech
Lame de rasoirProSciTech
ForecepsProSciTech
Cover slipProSciTech
Microscope composéLeica DM5000 B
GlutaraldéhydeSigma Aldrich
ParaformalydéhydeSigma Aldrich
Chlorure de potassium (KCl)Sigma Aldrich
(Na2HPO4)Sigma Aldrich
Di-Hydrogen Phosphate de potassium (KH2PO4)Sigma Aldrich
Sodium Chlorure (NaCl)Sigma Aldrich
Osmium tétroxydeSigma Aldrich
AcétoneSigma Aldrich
Araldite Résine époxySigma Aldrich
Toluidie BlueSigma Aldrich
HotplateRiechert HK120
de cosmétiques de verre Hydrogène di-sodique Pasteur pipette Sigma Aldrich

Références

  1. Zeil, J. Visual homing: an insect perspective. Curr. Opin. Neurobiol. 22, 285-293 (2012).
  2. Wehner, R. Desert ant navigation: how miniature brains solve complex tasks. J. Comp. Physiol. A. 189, 579-588 (2003).
  3. Fent, K., Wehner, R.

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