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Article de méthode

Un modèle de Rat de doux Hypoperfusion intra-utérine avec sténose de le Microcoil

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DOI :

10.3791/56723

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7 janvier 2018

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Dans cet article

Résumé

Hypoperfusion intra-utérine douce a été produite par sténose de l’artère avec microressorts métal enroulé autour les artères utérines et des ovaires chez les rats embryonnaires jour 17. Cette procédure produit hypoperfusion prénatale et retard de croissance intra-utérin.

Résumé

Hypoperfusion/ischémie intra-utérine est l’une des principales causes de retard de croissance intra-utérin/foetale, naissance prématurée et faible poids de naissance. La plupart des études de ce phénomène ont été jouées en deux modèles avec une ischémie sévère intra-utérine ou avec degré de hypoperfusion intra-utérine dégradé. Aucune étude n’a été effectuée dans un modèle uniforme hypoperfusion intra-utérine douce (MIUH). Deux modèles ont été utilisés pour l’étude des MIUH : un modèle basé sur la ligature de la suture des deux côtés de l’arcade artérielle formé avec les artères utérines et des ovaires, et un modèle transitoire basé sur coupure les artères ovariennes bilatérales et l’aorte ayant la perméabilité. Ces deux modèles de rongeurs de MIUH ont certaines limites, par exemple, pas tous les fœtus sont soumis à MIUH, selon leur position dans la corne utérine. Dans notre modèle MIUH, tous les fœtus sont soumis à un niveau comparable d’hypoperfusion intra-utérine. MIUH fut réalisée par sténose bénigne de toutes les quatre artères alimentant l’utérus, c'est-à-dire les artères utérines et ovariennes bilatérales.

La sténose artérielle a été induite par microressorts métal enroulé autour de l’alimentation les artères. Produisant la sténose artérielle avec microressorts nous a permis de contrôler, optimiser et reproduire la diminution du flux sanguin avec très peu de variabilité entre les animaux et un taux de mortalité faible, permettant ainsi une évaluation précise. Quand microressorts avec un diamètre intérieur de 0,24 mm ont été utilisés, la circulation du sang dans le placenta et le fœtus a été légèrement diminué (environ 30 % au niveau de la sténose pré dans le placenta). La progéniture de notre modèle MIUH démontre clairement les modifications durables dans les résultats des tests neurologiques, neuroanatomiques et comportemental.

Introduction

Les nourrissons avec restriction de croissance intra-utérine (RCIU) (également connu sous le nom des restriction de croissance fœtale) (poids à la naissance < 10ème percentile pour l’âge gestationnel), prématurité (né à < 37 semaines de gestation), et/ou basse naissance compte poids (< 2500 g) pour près de 10 % sur tous les nouveaux-nés 2,3. Bon nombre de ces enfants présentent des troubles neurologiques comme la paralysie cérébrale et des troubles du développement (p. ex., attention-déficit/hyperactivité (TDAH) et des troubles d’apprentissage) 3,....

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Protocole

Toutes les expériences ont été effectuées conformément aux protocoles approuvés par le Comité de l’utilisation du National Cerebral and Cardiovascular Center, Suita, Japon et d’expérimental animalier.

1. préparer les animaux et les matériaux chirurgicaux MIUH suivants

  1. Préparer chronométré rates Sprague-Dawley au jour de gestation 17, c'est-à-dire, embryonnaire jour 17 (E17). Poids corporel moyen des barrages sont 307.0 ± 40,7 g (moyenne ± écart-type, n = 9).
  2. Préparer le métal microressorts ; diamètre intérieur de 0,24 mm, en acier recouvert d’or.
  3. Préparer tous les documents conformément à la Table des ....

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Résultats

Après avoir appliqué les microressorts à l’ensemble des artères alimentant l’utérus, c'est-à-dire les artères utérines et ovariennes bilatérales, tous les fœtus sont soumis à des niveaux comparables de l’hypoperfusion. L’application de microressorts avec un diamètre intérieur de 0,24 mm provoque sténose bénigne de ces artères, provoquant ainsi une légère diminution dans le flux sanguin vers le placenta et le fœtus (Figure 3; environ 30 % au niveau de la sténo.......

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Discussion

La microcoil de sténose des artères fois ovariens et utérins dans les deux cornes utérines produit hypoperfusion intra-utérin constant et reproductible dans tous les placentas et les foetus. Le niveau d’hypoperfusion peut être modifié en utilisant microressorts avec différents diamètres intérieurs. Ratons nés d’un barrage sur lequel la sténose de l’artère a été réalisée avec microressorts 0,24 mm de diamètre intérieur démontrent RCIU et naissance prématurée (voir référence 1 pour plus de détails). Les chiots présentent d.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par le programme d’échange de recherche l’exercice 2013 entre JSP et CNRS, JSPS KAKENHI Grant nombre 26860858 et la Narishige Neuroscience Research Foundation. Nous remercions les Drs Mariko Harada-Shiba et Kyoko Shioya de discussions utiles. Nous remercions Mari Furuta, Mutsumi Sakamoto, Ritsuko Maki et Dr Emi Tanaka pour l’assistance technique excellente.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Stéréomicroscope
Isoflurane Appareil
Boîte
Coussin
Couche 30x40 cm
Mousse dépilatoire ou rasoir
désinfectanteà l’iode
Gaze 10x20 cm  ;
Champ chirurgical 45x45 cm avec une ouverture ronde de 5 cm de diamètre
Flacon pulvérisateur à l’éthanol pour la
Coton-tige
Pince à gros embouts émoussés
Pince à pointes
Ciseaux
Scalpel chirurgical, lame de 27 mm de long (n° 10, Axel, AS ONE Corporation, Osaka, Japon)
Aiguille
Microbobines métalliques ; diamètre intérieur 0,24 mm, en acier doré (SAMINI Co. Ltd., Shizuoka, Japon)
Suture en soie 4-0
Solution saline stérile (chlorure de sodium à 0,9%)
Seringues
en plastique (50ml) et aiguilles (18G)
d’anesthésied’induction d’anesthésiechauffant Solution désinfectionfines inclinéesde suture chirurgicale

Références

  1. Ohshima, M., et al. Mild intrauterine hypoperfusion reproduces neurodevelopmental disorders observed in prematurity. Sci Rep. 6, 39377(2016).
  2. Specified Report on Vital Statistics in FY2010, Ministry of Health, Labour and Welfare, Japan. , Available from: http://www.mhlw.go.jp/english/database/db-hw/FY2010/live_births.html

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Réimpressions et autorisations

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