Analyse des cheveux cortisol concentration offre une alternative aux mesures traditionnelles du cortisol ; Cependant, afin de prélever des échantillons de cheveux d’afro-américains, les scientifiques doivent être culturellement éclairée et compétente. Ce protocole vise à démontrer une technique culturellement éclairée pour prélever des échantillons de cheveux pour l’analyse de cortisol d’afro-américains.
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Article de méthode
Le prélèvement d’échantillons de cheveux pour cheveux analyse de Cortisol dans les Afro-américains
Dans cet article
Résumé
Résumé
L’hormone cortisol est généralement évaluée dans la salive, le sérum ou les échantillons d’urine. Plus récemment, cortisol a été extrait avec succès des cheveux, y compris les humains. L’avantage de la concentration de cortisol de cheveux est qu’elle reflète une représentation rétrospective de fonction d’axe hypothalamo-hypophyso-surrénalien (HPA) au fil du temps, un peu comme l’hémoglobine A1C représente un équilibre glycémique. Cependant, obtenir des échantillons de cheveux peut être difficile, en raison des croyances culturelles et pratiques de soins des cheveux de participants membres de minorités. Par exemple, les Afro-américains peuvent être réticents à fournir des échantillons. En outre, peu de chercheurs est formés pour prélever des échantillons de cheveux d’afro-américains. Le but de cet article est de présenter un protocole culturellement éclairé pour aider les chercheurs à obtenir des échantillons de cheveux de noirs américains. Pour illustrer les résultats représentatifs de cette mise en œuvre du protocole, les données dépersonnalisées des africains-américains qui ont participé à une étude sur le stress chronique communautaires sont fournies. Préférences de pratique de cheveux sont évalués. Les participants sont faits confortables en montrant des photos d’échantillons de cheveux avant de couper leurs cheveux. L’unique souche de torsion et doucement la méthode pull sert à recueillir environ 30-50 brins de cheveux de la région postérieure de vertex du cuir chevelu. Ce protocole améliorera sensiblement la collecte d’échantillons de cheveux des Afro-américains.
Introduction
Le prélèvement d’échantillons de salive, de sang ou d’urine pour analyse de cortisol a des difficultés procédurales particulières et une plus grande charge participant, comme la procédure l’exige plusieurs échantillons de salive, les échantillons prélevés par ponction veineuse ou prélèvement d’urine de 24 heures. Obtention de cortisol des échantillons de cheveux est une alternative simple et acceptable à l’aide de salive, sérum ou urines échantillons1,2. Cortisol de cheveux fournit une représentation rétrospective de fonction d’axe hypothalamo-hypophyso-surrénalien (HPA) au fil du temps. Environ 3 cm de cheveux prélevé sur le cuir chevelu est égal à la moyenne la libération de cortisol au cours des 3 mois1. Cependant, chercheurs rencontrent des défis uniques lorsqu’on tente de recueillir des échantillons de cheveux entre les diverses populations. Ces défis comprennent les convictions religieuses ou spirituelles dont exposant les cheveux (par exemple, les femmes musulmanes), sacré (groupes d’amérindiennes), ou des normes culturelles qui relient les cheveux aux normes de la beauté et l’image de soi.
Dans la culture afro-américaine, particulièrement chez les femmes, les cheveux sont un aspect important et très personnel de leur image corporelle3,4. En outre, historiques des expériences (p. ex., les expériences de Tuskegee) continuent de promouvoir la méfiance dans le processus de recherche5. Certains folklore afro-américain et les croyances culturelles suggèrent également que l’échantillon de cheveux pourrait être utilisé dans les rituels qui pourraient causer un préjudice de6,7. Les chercheurs doivent être conscients des défis potentiels qu’ils peuvent être confrontés dans les études lorsque les participants afro-américains sont priés de fournir des échantillons de cheveux.
Outre les questions entourant l’image corporelle, les techniques spécifiques pour la collecte et la manipulation des échantillons de cheveux d’afro-américains peuvent différer de celle des Américains européens6,7. Par exemple, les Afro-américains peut avoir raides, minces, bouclés, crépus, grossier, ou une combinaison de ces types de cheveux, chacune nécessitant des techniques différentes pour recueillir et fixer les cheveux adéquat des échantillons pour le traitement. Des études récentes sur les échantillons d’adolescents afro-américains8, ainsi que des échantillons multiethnique9, a montré que la collection de cheveux pour mesure de niveau de cortisol était acceptable chez les participants afro-américains. À l’heure actuelle, il n’y a aucune procédure d’entraînement visuel conçu pour fournir aux chercheurs les compétences et les connaissances culturelles pour prélever des échantillons de cheveux dans les Afro-américains. Le but de cet article est de présenter un protocole culturellement éclairé pour aider les chercheurs à obtenir des échantillons de cheveux adéquate de participants africains américains. Cette méthode a été développée avec un examen minutieux des caractéristiques physiques, psychosociaux et culturels pertinents pour recueillir des échantillons de cheveux des adultes afro-américains. A ce jour, il n’y a pas de méthodes visuelles de recueillir ces échantillons, et le présent protocole sera le premier guide ce prélèvement d’échantillons de cheveux bon détails des adultes afro-américains. Pour illustrer les résultats représentatifs de l’application du protocole, les données dépersonnalisées sont présentées des africains-américains qui ont participé à une étude sur le stress chronique communautaires qui étaient âgés de 65 ans et plus. Les deux assistants de recherche hommes et femmes de diverses origines raciales a communiqué avec les participants potentiels dans une liste de clinique générée et flyers. L’enquêteur principal, qui est une femme afro-américaine, a parlé à des centres communautaires et hauts appartements logements subventionnés à plus adultes afro-américains à propos de l’étude, y compris une description des méthodes de collecte de cheveux.
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Protocole
L’étude est approuvée par l’Université hôpitaux Cleveland Medical Centre institutionnel Review Board, et le protocole suit les directives de sécurité des données et protection participants tel qu’indiqué par le Comité d’examen.
1. préparer le Participant pour l’échantillon de cheveux et cheveux Collection des exemples de Questions
- Expliquez aux participants que l’échantillon de cheveux prélevé est moins de cheveux que qui est normalement perdu à brosser chaque jour à l’arrière de la tête (sommet postérieur). Dire le participant que le site pour l’échantillon de cheveux est caché en entourant les cheveux et, ainsi, n’est pas visible après le prélèvement. Informer le participant auquel l’échantillon permet de mesurer une hormone appelée cortisol présent dans les cheveux10,11.
- Prenez la photo de l’échantillon et montrer au participant le montant de cheveux qui seront perçu (30-50 brins).
Remarque : Voir la Figure 1 pour une photo d’un échantillon de cheveux. - Demander au participant les questions cheveux soins pratique12 énumérées au tableau 1.
2. recueillir l’échantillon de cheveux
- Dire le participant que l’échantillon est prélevé dans un espace privé derrière un portable partition, Rideau ou une porte fermée. Assurer les participants que, si elles portent une perruque ou une postiche, leurs cheveux ne sont pas coupé dans une zone où d’autres peuvent voir. Mesurer la longueur des cheveux du cuir chevelu à la fin en tirant les cheveux légèrement et tendue.
- Si le poil est court (moins de 3 cm), suivre le protocole de cheveux courts à l’étape 3 (bien que si les cheveux sont moins de 1 cm de long, l’échantillon ne peut être recueilli, et, idéalement, les cheveux doivent être au moins 3 cm de long). Pour plus de 6 cm de cheveux, se conformer au protocole de cheveux longs à l’étape 4. Sinon, passez à l’étape suivante.
- S’assurer que les matériaux sont prêts en plaçant les blocs de coupe de cheveux (une feuille de papier d’aluminium, enveloppe d’affaires, salon grade ciseaux, petits et grands se séparer peigne, alcool preps, ruban de peintre, marqueur permanent, gants sans latex [facultatifs] et cheveux agrafes)10 sur une surface à côté du participant. Nettoyer les ciseaux et peigne avec le tampon alcoolisé avant de prélever l’échantillon. Découper une feuille 8 x 10 » de papier d’aluminium à utiliser pour l’échantillon.
- Mettez des gants sans latex. Prendre le peigne et séparer le cheveux horizontalement le long du sommet postérieur du cuir chevelu entre les pointes des oreilles.
- Prenez un clip et déplacer les cheveux du dessus de la partie, puis mettre un autre clip au fond pour exposer un rectangle de 5 x 10 cm entre les deux clips de cheveux en vrac (environ la taille d’un jeu de cartes à jouer).
- Demander au participant si elles préfèrent utiliser une dent large ou peigne à dents étroites à travers le rectangle de 2-3" de cheveux. Demander au participant comment il ou elle voudrais avoir les cheveux restant dans le peigne mis au rebut. Donner les cheveux dans le peigne à l’adhérent, ou, si (et seulement si) le participant déclare que c’est OK jeter les cheveux coupés, jeter les cheveux restant du peigne dans une poubelle.
- Saisir environ 30-50 brins de cheveux vers la droite du rectangle 2-3" et tirez doucement et tordre le cheveux du cuir chevelu dans un mouvement de roulis entre les doigts.
- S’assurer que l’échantillon est prélevé en plus près du cuir chevelu que possible, mais ne coupez ne pas le cuir chevelu. Utiliser des ciseaux de qualité salon et faire une coupe propre droite.
- Saisir les échantillons de cheveux et faire en sorte que l’extrémité de la racine est alignée avec soin le long de la coupe.
- Attacher les cheveux à la feuille de papier d’aluminium par du ruban adhésif avec du ruban adhésif de peintre. Ne couvrez pas la fin du cuir chevelu et ne pas utiliser de ruban adhésif de peintre sur les cheveux qui sont égal ou inférieur à 3 cm. Place le lâche coupe les cheveux dans le centre de la feuille et plier dans un carré, veiller à ce que les cheveux ne tombent pas sur la feuille.
- Prenez le marqueur et marquer la fin du cuir chevelu sur la feuille d’aluminium. Premade étiquettes code à barres permet d’attacher à l’aluminium et l’enveloppe.
- Pliez le papier d’aluminium sans plier les cheveux à l’extrémité du cuir chevelu pour empêcher la tête de lit (froissé et plié les cheveux), placez-le dans l’enveloppe de taille d’entreprise et sceller.
- L’étiquette de l’extérieur de l’enveloppe avec le nom de l’enquêteur principal, date et numéro d’identification du participant unique étude, ou utilisez une étiquette code à barres si elles sont disponibles.
- Conserver l’échantillon dans un endroit sec à température ambiante.
3. prélèvement pour les cheveux courts (1 à 3 cm)
- Suivez les étapes 2.3 et 2.4.
- Après séparation, demander au participant de tenir les cheveux parted près du cuir chevelu. Coupe de cheveux le long de la partie, tout en maintenant les cheveux étroitement avec l’index et le pouce de10.
- Placer les poils dans du papier et le plier en toute sécurité. Bande pas les cheveux sur la feuille.
- Suivez les étapes 2.11 par 2.14.
4. PRELEVEMENT pour cheveux longs (plus de 6 cm)
- Séparer le cheveux de gauche à droite au sommet postérieur.
- Utilisez les pinces à cheveux pour retenir les cheveux extra.
- Créez une torsion des cheveux et maintenez fermement avec l’index et le pouce de manière à ne pas laisser tomber l' échantillon10.
- Faire une coupe droite propre au plus près du cuir chevelu que possible. Collecter 30-50 mèches de cheveux.
- Si le participant a des cheveux fins, puis couper 2-3 petites zones (1 cm de distance) à travers le sommet postérieur à dissimuler le site de la coupe.
- Suivez les étapes 2.10 par 2.14.
5. traitement de l’échantillon
- Stocker les sachets d’aluminium contenant l’échantillon de cheveux à température ambiante indéfiniment jusqu'à l’analyse.
Remarque : Cheveux cortisol est extrêmement stable dans les cheveux et peut être stocké pendant des années. En fait, le cortisol a été mesuré dans des échantillons de cheveux de restes momifiés11. - Analyser cortisol cheveux comme précédemment publié12. Les échantillons peuvent être expédiés pendant la nuit à température ambiante.
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Résultats
Dans notre étude, vingt et un des Afro-américains (âge moyen = 75 ; SD = 6,9 ; 85 % de femmes) aient consenti à participer. Quatre participants (19 %) ont refusé de fournir un échantillon de cheveux et deux (9,5 %) ne pouvait pas fournir un échantillon parce que leurs cheveux étaient trop court. Un total de 15 échantillons de cheveux ont été obtenues et traitées (tableau 2). La longueur des échantillons de cheveux qui ont été traitées variait de 1 cm à 4,8 cm. les échanti...
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Discussion
Des étapes essentielles dans le protocole de collecte de cheveux incluent fournissant un exemple de combien cheveux est prise, montrant l’exemple de site (vortex postérieur), utiliser de la torsion seule souche et tirer doucement la méthode et la sécurisation de l’échantillon avec du ruban adhésif de peintre de la fin du cuir chevelu. En doucement, tournant et tirant sur l’échantillon, les cheveux bouclés sont allongée et l’alignement de fin du cuir chevelu est maintenu. Cela réduit le temps de laboratoire nécessaires po...
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Déclarations de divulgation
Le laboratoire d’endocrinologie et immunologie comportementale est désigné comme laboratoire d’Excellence par Salimetrics, LLC.
Remerciements
Cette publication a été rendue possible par la clinique et de la Science Translational Collaborative de Cleveland ; KL2TR000440 le National Center for component avançant translationnelle Sciences (NCATS) de la National Institutes of Health ; et NIH Roadmap for Medical Research. Travaux du Dr Jodi Ford dans ce domaine a été financé par le National instituts de santé National Institute on Drug Abuse (1R21DA034960) et l’Ohio State University Institute pour les semences de Population recherche des subventions de la National Institute of Child Health et Développement (2P2CHD058484). Le contenu est la seule responsabilité des auteurs et ne représente pas nécessairement l’opinion officielle de la National Institutes of Health. Travaux du Dr Laudenslager dans ce domaine a été financé par un contrat de l’Institut de recherche de résultats centered (CE-1304-6208), une subvention de l’Administration aux enfants et aux familles (90 an 0058) et une subvention de la psychobiologie du développement Groupe de recherche sur les fonds de dotation du département de psychiatrie, Campus de l’Université du Colorado Denver médical d’Anschutz.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| ; Ciseaux de qualité salon | Cricket | S-3 550 | Cisaille à cheveux professionnelle cardée, 5,5 pouces |
| Peigne à grandes dents | Goody | Pas de catalogue number__Goody Stylista Rake Comb ; ; ; | Lien vers le site web de l’entreprise http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_Stylista_Rake_Comb?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 |
| Peigne à petites dents | Goody | Pas de catalogue number_ Goody Start.Style.Finish. Lien vers le site Web de l’entreprise http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Combs?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 | |
| Préparations à l’alcool | Kendall Webcol Préparations à l’alcool | Pas de numéro de catalogue. Kendall Webcol Alcool Preps | https://www.buyemp.com/product/kendall-webcol-alcohol-preps |
| Ruban de peintre | 3M Scotch | ScotchBlue ORIGINAL Painter' s Tape | https://www.scotchblue.com/3M/en_US/scotchblue/products/painters-tape/ |
| Marqueur permanent | Sharpie | Noir Sharpie Fine Point | http://www.sharpie.com/sharpie/fine/SHFineBlackFine.html |
| Gants sans latex | Proté ; gé ; | 93997 | Protégé® ; Gants d’examen en nitrile non poudrés http://aureliagloves.com/product/protege/ |
| Pinces à cheveux ; | Goody | Goody Start.Style.Finish. Pinces | à boucles http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Curl_Clips |
| enveloppe | Office Depo | 330808 | Office Depot® ; Enveloppes à fermoir de marque, 9 » x 12 », marron, boîte de 100 |
| feuilles d’aluminium ; | Choix ; | 1229105 | Boîte de 500 feuilles Food Service Feuilles d’aluminium pop-up pliées |
| Flacon cryogénique pré-pesé de 2 ml | Wheaton, Millville, NJ, États-Unis | W985902 | |
| 100 % isopropanol | Spectrum | I1275 | 67-63-0 | |
| Azote liquide ; | Entrepôt de bouteilles de gaz | l’Université d’État de l’Ohio | http://osustores.osu.edu/prodservices/liquidnitrogen.aspx |
| Roulement à billes en acier inoxydable ; | McMasterCarr | 9291K42 | https://www.mcmaster.com/#standard-stainless-steel-balls/=1acqby0 |
| Cassettes en aluminium spécialement fraisées | FisherScientific ; | Retsch 20.745.0001 | |
| Méthanol de qualité HPLC | FisherScientific ; | A452N1-19 | https://www.fishersci.com/shop/products/methanol-hplc-fisher-chemical-6/p-216129 |
| Tube de microcentrifugation | Eppendorf Amérique du Nord | 22363352 | https://online-shop.eppendorf.us/US-en/Laboratory-Consumables-44512/Tubes-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html?_ga=2.36544352.1776616592.1511283212-1254533852.1511283212 |
| Cortisol ELISA Kit | Salimetrics LLC, State College, PA, USA | 1-3002 (5PK 1-3002-5) | https://www.salimetrics.com/assay-kit/cortisol-salivary-elisa-eia-kit |
| Centtrifuge pour le tube de microcentrifugeuse | Beckman Coulter | Microfuge série 20 | http://centrifugebybeckman.com/?page_id=727/?pi_ad_id=creative?utm_term=microfuge |
Références
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