Implantation des greffons vasculaires électrofilées avec Structure optimisée dans un modèle de Rat

Résumé

Nous présentons ici une méthode électrofilage modifiés pour fabriquer des prothèses vasculaires PCL avec fibres épaisses et des pores dilatés et décrire un protocole d’évaluation du rendement en vivo dans un modèle de rat de remplacement de l’aorte abdominale.

Résumé

Nous présentons ici un protocole pour fabriquer la prothèse vasculaire macroporeux PCL et décrire un protocole d’évaluation en utilisant un modèle de rat de remplacement de l’aorte abdominale. Les greffons vasculaires électrofilées possèdent souvent relativement petits pores, limitent l’infiltration cellulaire dans les greffes, qui entravent la régénération et le remodelage des neo-artères. Dans cette étude, greffes vasculaires PCL avec fibres plus épaisses (5-6 µm) et de plus grands pores (~ 30 µm) ont été fabriqués en utilisant une technique de traitement modifié. La performance à long terme du greffon a été évaluée par l’implantation dans un modèle d’aorte abdominale chez le rat. Analyse de l’échographie a montré que les greffons restent brevets sans anévrisme ou sténose survenant même après 12 mois d’implantation. Structure macroporeuse amélioré la croissance cellulaire et donc promu tissu régénéré à 3 mois. Plus important encore, il n’y avait aucun signe de remodelage indésirables, tels que la calcification dans la paroi de la prothèse après 12 mois. Donc, les prothèses vasculaires électrofilées PCL avec macroporeux mis à jour le traitement tenir potentiels comme un substitut de l’artère pour l’implantation à long terme.

Introduction

Des greffons vasculaires constitués de polymères synthétiques sont largement utilisés en clinique pour le traitement des maladies cardiovasculaires (maladies cardiovasculaires). Malheureusement, dans le cas de prothèses vasculaires de petit diamètre (D < 6 mm) il n’existe aucun produit avec succès en raison de la faible perméabilité déclenchée par la vitesse d’écoulement sanguin réduit, qui conduit souvent à la thrombose, l’hyperplasie intimale et d’autres les complications¹.

Génie tissulaire fournit une autre stratégie afin de réaliser la perméabilité à long terme et l’homéostasie basé sur un échafaud guidé....

Protocole

L’utilisation des animaux d’expérimentation a été approuvée par l’Animal expériences éthique Comité de Nankai University et effectuée selon le Guide d’entretien et d’utilisation des animaux de laboratoire.

1. fabrication des greffes électrofilées PCL

NOTE : Ici, une technique d’électrofilage a été utilisée pour fabriquer les prothèses vasculaires.

1. Préparer des solutions PCL de 25 % en poids et 10 % en poids, en dissolvant PCL dans un mélange de méthanol et le chloroforme, respectivement, (rapport de volume 1:5), à température ambiante (RT) pendant 12 h.
2. Chargez la solution PCL dans une seringu....

Résultats

Les greffons PCL ont été cultivés à 3 et 12 mois après l’opération et analysés par des techniques histologiques standard pour l’hématoxyline et éosine (H & E), trichrome de Masson, Verhoeff-van Gieson (LCA), Von Kossa et immunofluorescence souillant pour α-SMA, MYH, vWF et l’élastine. Les images histologiques ont été prises à l’aide d’un microscope vertical, et les images d’immunofluorescence ont été prises à l’aide d’un microscope fluorescence.

Discussion

Infiltration de cellules est essentiel pour la régénération et remodelage de la prothèse vasculaire en vivo¹⁶. L’infiltration des cellules est souvent liée à des pores relativement faibles du greffon qui empêchent la migration de cellules dans la paroi de la prothèse. Pour remédier à cette difficulté, nous avons développé une méthode modifiée pour préparer les greffons vasculaires d’électrofilées PCL avec structure de gros pores. Dans le détail, la taille des pores a augmenté avec l’augme.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Pastilles de poly(&epsilon ;-caprolactone) (PCL) (Mn=80 000)	Sigma	704067
Méthanol	Tianjin Chemical Reagent Company	1060
Alcool	Tianjin Chemical Reagent Company	1083
Chloroform	Tianjin Chemical Reagent Company	A1007
Saccharose	Tianjin Fengchuan Entreprise	2296
Triton X-100	Alfa Aesar	A16046
Rats Sprague, Dawley	Centre animalier de laboratoire de l’Académie des sciences
, Saline normale	Hebei, Tiancheng, société
Hydrate de chloral	Tianjin Ruijinte, société chimique	2223
Héparine sodique Injection	Tianjin Biochem Société
Injection de sulfate de gentamycine	Jiangsu Lianshui Société
Anticorps primaire anti-&alpha ;-SMA de souris	Abcam	ab7817
Anticorps primaire MYH anti-lisse de souris	Abcam	ab683
Anticorps polyclonal anti-élastine de rat de lapin	Abcam	ab23748
Anticorps primaire anti-facteur de von Willebrand chez le lapin	Abcam	ab6994
IgG anti-souris de chèvre (Alexa Fluor 488)	Invitrogen	ab150117
IgG anti-lapin de chèvre (Alexa Fluor 488)	Invitrogen	ab150077
5 % sérum de chèvre normal	Zhongshan Golden bridge	ZLI9022
Hématoxyline et éosine (H& E)	Beijing leagene biotech	DH0006
Masson’s trichrome	Beijing leagene biotech	DC0032
Verhoeff-van Gieson (VVG)	Beijing leagene biotech	DC0059
Von Kossa	Beijing leagene biotech	DS0003
Aiguilles de sutures chirurgicales avec fil,3-0 soie	Shanghai Jinhuan medical supplies company	G3002b
Aiguilles de sutures chirurgicales avec fil, 9-0 soie	Shanghai Jinhuan fournitures médicales entreprise	H901

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