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Article de méthode

Construction d’un Hyperdrive tétrode multi amélioré pour un enregistrement neuronaux à grande échelle en comportement des Rats

11K vues

DOI :

10.3791/57388

9 mai 2018

Dans cet article

Résumé

Nous présentons la construction d’un hyperdrive 3D-imprimable avec dix-huit tétrodes réglables indépendamment. L’hyperdrive est conçu pour enregistrer l’activité cérébrale en comportement librement des rats sur une période de plusieurs semaines.

Résumé

Surveiller les patrons d’activité d’une importante population de neurones au cours de plusieurs jours chez l’animal éveillé est une technique dans le domaine des neurosciences des systèmes. Un élément clé de cette technique consiste le positionnement précis des électrodes multiples dans les régions du cerveau désiré et le maintien de leur stabilité. Nous décrivons ici un protocole pour la construction d’un hyperdrive 3D-imprimable, qui comprend dix-huit tétrodes réglables séparément et qui est spécialement conçue pour in vivo enregistrement neuronal extracellulaire en comportement librement des rats. Les tétrodes attachés aux microdrives peuvent soit être individuellement avancés dans plusieurs régions du cerveau le long de la piste, ou peuvent être utilisés pour placer un tableau des électrodes dans une zone plus petite. Les tétrodes multiples permettent l’examen simultané d’action potentials de quelques dizaines de neurones individuels, ainsi que les potentiels de champs locaux de populations de neurones dans le cerveau au cours de comportement actif. En outre, la conception fournit pour la 3D plus simple rédaction des logiciels qui peuvent facilement être modifiés pour différents besoins expérimentaux.

Introduction

Dans le domaine des neurosciences des systèmes, les scientifiques étudient les corrélats neurones sous-tendant les processus cognitifs tels que la navigation spatiale, la mémoire et prise de décision. Pour ces types d’études, il est essentiel de surveiller l’activité de neurones individuels nombreux pendant le comportement animal. Ces dernières décennies, deux progrès importants ont été réalisés pour répondre aux besoins expérimentaux pour enregistrement neuronal extracellulaire en petits animaux1,2,3. Tout d’abord le Θlaboration de la tétrode, un faisceau de quatre microfils....

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Protocole

1. des modèles 3D, la stéréolithographie

  1. Techniques de stéreolithographie permet d’imprimer les hyperdrive pièces et accessoires. Chaque hyperdrive est composée de dix-huit navettes, dix-huit navette boulons et un chacun de toutes les autres pièces en plastique (Figure 1).
    Remarque : Les accessoires ne font pas partie de l’hyperdrive mais sont nécessaires pour la construction de l’hyperdrive.

2. préparation des accessoires (Figure 2).

  1. Préparation du panier microdrive (Figure 2).
    1. Nettoyer et élargir....

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Résultats

Nous avons utilisé un hyperdrive nouvellement construite afin d’obtenir des résultats de l’étude. Le lecteur était équipé de tétrodes construits à partir d’ø 17 µm (0,0007"), fil enduit de polyimide platine iridié (90 % - 10 %). Les conseils des tétrodes ont été cultivées en platine noir solution pour réduire les impédances d’électrode à entre 100 et 200 kΩ à 1 kHz. L’hyperdrive fut implanté à 4,6 mm à gauche de la ligne médiane et 0,5 mm antérieure du sinus transverse sur le crâne d’un 5.......

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Discussion

Nous décrivons ici le processus de construction d’un hyperdrive nouvellement développé composé de dix-huit tétrodes indépendamment mobiles. Le lecteur peut être construit de pièces abordables achetées dans de nombreux magasins de matériel disponibles, combinées avec les composants créés par stéreolithographie impression. L’hyperdrive peut être chroniquement implanté sur le crâne d’un rat à l’aide de procédures chirurgicales standards et est capable d’enregistrer l’activité neuronale extracellulaire tandis que l’animal ef.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Nous remercions le laboratoire Moser au Kavli Institute for neurosciences des systèmes et Centre Neural Computation, Norwegian University of Science and Technology, pour la chronique neural recensant des procédures chez le rat. Ce travail a été soutenu par les NIH grant NS098146 R21 et humaine Frontier Science programme à long terme bourse LT000211/2016-L à L. Lu.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Baguette de soudageBlue DemonER308L-035-01TAcier inoxydable, 0,035" de diamètre
VisMcMaster91771A060Acier inoxydable, tête plate, 0-80  ; fil,  ; 5/8"  ; en longueur
VisMcMaster91772A051Acier inoxydable, tête cylindrique, 0-80  ; fil,  ; 5/32"  ; en longueur
VisMcMaster92196A056Acier inoxydable, tête à douille, 0-80  ; fil,  ; 5/16"  ; en longueur
VisMcMaster92196A055Acier inoxydable, tête à douille, 0-80  ; fil,  ; 1/4"  ; en longueur
VisMcMaster95868A131Nylon, tête creuse, 2-56  ; fil,  ; 3/16"  ; en longueur, noir
Écrou à visMcMaster90730A001Acier inoxydable, hexagonal étroit,  ; 0-80  ; filetage
Vis à épaulementMcMaster90298A213Acier inoxydable, filetage 8-32, 3/16 » de diamètre, 1/4 » de longueur
Vis boisseauMcMaster92313A105Acier inoxydable, filetage 4-40, longueur 3/16
Vis à oreillesMcMaster94323A592Nylon, 8-32  ; fil,  ; 3/8"  ; en longueur, noir
MagnetApexM3X1MMDINéodyme, disque de 3 mm X 1 mm
Tubes métalliquesPetites piècesB00137QHNSAcier inoxydable, calibre 23, 0,0253 » OD, 0,013 » ID, 0,006
Tubes métalliquesNew England Petit tubeAcier inoxydable sur mesure, calibre 30, 0,012/0,0125 » OD, 0,007/0,008 » ID, entièrement dur
Gaine thermorétractableMcMaster7856K720,09 po ID avant rétrécissement, bleu
Tube en siliconeA-M Systems8073000,040 po ID, 0,085 po OD
Tube en polyimideA-M Systems8234000,0045 po ID, 0,0005 po
mural Fil de terreA-M Systems7915000,005 po nu, 0,008 po enduit, demi-dur
Fil tétrodeCalifornia Fine WireSur mesure0,0007" de diamètre, platine-iridium (90 %-10 %), revêtement HML et VG
EIBNeuralynxEIB-72-QC-Large
Goupilles doréesNeuralynxgrandes goupilles EIB
TapBalax Balax01302-000M1.2 Taille de
filetage RobinetMcMaster2522A811Taille de filetage 0-80,
Taraudde fond McMaster2522A7710-80 filetage, bouchon
RobinetMcMaster26955A943/8"-24  ; taille du filetage,
robinetMcMaster2522A7132-56  ; taille de
filetage TaraudMcMaster2522A7154-40  ; taille de
filetage TaraudMcMaster2522A7188-32  ; taille du filetage
MatriceMcMaster2576A4573/8"-24  ; taille du filetage, 1
OD ForetMcMaster30585A82Calibre du fil  ; 65,  ; 0,035" de diamètre
MècheMcMaster30585A83Calibre du fil  ; 66,  ; 0,033" de diamètre
MècheMcMaster30585A87Calibre de fil  ; 70,  ; 0,028" de diamètre
MècheMcMaster30585A88Calibre de fil  ; 71,  ; 0,026" de diamètre
MècheMcMaster30585A91Calibre de fil  ; 73,  ; Mèche de 0,024 po de diamètre
McMaster8870A233/16 po. disque
DremelWagner31MDiamanté, 22 mm de diamètre, 0,17 mm d’épaisseur
Fil d’acierPrecision Brand212120,012 » de diamètre, entièrement dur
Fil d’acierPrecision Brand210070,007 » de diamètre, entièrement dur
Fil d’acierA-M Systems7927000,003 » de diamètre, demi-dur
Super colleLoctiteLT-40640# 406
Super colleLoctiteLT-41550# 415
Poudre acrylique dentaire  ;Teets223-3773
Coral Dental acrylic liquidTeets223-4003
 »  » de paroi de fond "

Références

  1. O'Keefe, J., Recce, M. L. Phase relationship between hippocampal place units and the EEG theta rhythm. Hippocampus. 3 (3), 317-330 (1993).
  2. Wilson, M. A., McNaughton, B. L. Dynamics of the hippocampal ensemble code for space. Science. 261 (5124), 1055-1058 (1993).

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Réimpressions et autorisations

Mots-clés

Dispositif imprimable en 3Dajustement ind pendant des t trodesenregistrement neural extracellulaired tection des potentiels d actionpotentiel de champ localassemblage de canules guidesconstruction de micro actionneurs