Non invasive, High-throughput détermination de la durée du sommeil chez les rongeurs

Résumé

Nous décrivons une méthode de haut-débit de mesure sommeil au moyen fondé sur l’activité de surveillance maison-cage. Cette méthode présente des avantages par rapport aux méthodes traditionnelles axées sur l’EEG. Il est bien validé pour la détermination de la durée totale du sommeil et peut être un outil puissant pour surveiller le sommeil dans les modèles de maladies humaines.

Résumé

Traditionnellement, le sommeil est surveillé par un électroencéphalogramme (EEG). EEG études chez les rongeurs nécessitent l’implantation chirurgicale des électrodes suivie d’une période de récupération long. Pour effectuer un enregistrement de l’EEG, l’animal est connecté à un récepteur, créant une attache contre nature pour la tête-Mont. Surveillance EEG prend beaucoup de temps, porte mise en danger de l’animal et n’est pas un environnement complètement naturel pour la mesure de sommeil. Méthodes alternatives pour détecter le sommeil, en particulier dans un mode haut débit, ferait progresser considérablement le domaine de la recherche du sommeil. Nous décrivons ici une méthode validée pour la détection de sommeil via axée sur l’activité de surveillance maison-cage. Des études antérieures ont montré que sommeil évalué par le biais de cette méthode a un haut degré d’accord avec définie par les mesures traditionnelles axées sur l’EEG de sommeil. Considérant que cette méthode est validée pour la durée totale du sommeil, il est important de noter que le sommeil combat durée devrait être évaluée par un EEG qui a la meilleure résolution temporelle. L’EEG permet de distinguer aussi paradoxal (REM) et non le sommeil paradoxal, ce qui donne plus de détails sur la nature exacte du sommeil. Néanmoins, détermination fondés sur l’activité de sommeil peut être utilisée pour analyser plusieurs jours de sommeil paisible et évaluer le sommeil comme une réponse à un événement aigu (comme le stress). Ici, nous montrons la puissance de ce système pour détecter la réponse de souris aux injections intrapéritonéales quotidiennes.

Introduction

Sommeil a des fonctions importantes pour la restauration du corps et du cerveau après la charge quotidienne d’éveil¹. Il a été démontré que le sommeil joue un rôle dans la conservation de la mémoire et de la plasticité cérébrale générales¹. L’EEG est l’étalon-or pour détecter le sommeil². Chez les rongeurs, surveillance EEG nécessite l’implantation chirurgicale d’électrodes apposées sur un tête-Mont, après quoi l’animal a besoin d’une période de temps pour récupérer². Après la récupération, l’animal est attaché à l’appareil d’enregistrement et est donné à une autre période ....

Protocole

Toutes les procédures ont été approuvées par le Comité de l’emploi et de National Institute of Mental Health Animal Care et effectués selon le National Institutes of Health Guidelines sur le soin et l’utilisation des animaux.

1. mise en place des unités de détection dormir

1. Acheter le nombre désiré d’unités et de logiciels.
2. Suivez les instructions pour mettre en place les systèmes de surveillance.
   1. Aligner un détecteur en face d’un émetteur. Assurez-vous que les rayons infrarouges sont vers l’intérieur et sont alignés à la même hauteur.
   2. Utilisez les vis fournies pour positionner les détecteurs et les éme....

Résultats

Pour déterminer l’effet des injections quotidiennes sur le sommeil et la question de savoir si les animaux s’habituer aux injections, nous avons réalisé des injections quotidiennes de IP pendant 14 jours consécutifs à 09:00 (cycle de lumière a commencé à 06:00) et durée du sommeil a enregistré 12 souris Fmr1 KO C57Bl/6J. Nous avons utilisé un dans la conception des sujets, injecter chaque animal avec une solution saline normale pendant 4 jours consécutifs (1-4 jours) et puis 30 %.......

Discussion

Nous présentons ici une méthode non invasive, haut débit pour la détermination de la durée du sommeil basée sur le contrôle de l’activité dans la maison-cage. Cette méthode d’évaluation de la durée totale du sommeil a été validée à l’EEG études³. Fondé sur l’activité de surveillance maison-cage, c’est simple, non invasif et applicables aux études de population dans un grand nombre d’animaux. Elle est limitée car il ne peut pas donner des renseignements détaillés sur le sommeil (tels que les stades.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Système complet de surveillance des animaux de laboratoire (CLAMS)	Columbus Instruments		Équipement et logiciel pour analyser la durée du sommeil
Captisol Captisol de qualité recherche		RC-0C7-100	Captisol pour dissoudre les composés hydrophobes
30 G Aiguille BD 1/2 pouce	BD	305106	Aiguille pour
injections BD Seringues jetables	Fisher	14-823-30	Seringues injectables
B6.129P2-Fmr1tm1Cgr/J	Jackson Labs	3025	Fmr1 KO souris
Super Mouse 750 Mouse Cage	Lab Products, Inc.  ;		Cages pour les souris
SANI-Chips Bedding	PJ Murphys		Bedding pour les souris