Fabrication de nanostructures Gradient thermique dispositifs Technique et dépistage de la réponse des cellules formatrices endothéliales humaines

Dae Hwan Kim; Long-Hui Cui; Ha-Rim Seo; Hyung Joon Joo; Seung-Cheol Choi; Do-Sun Lim; Kyu Back Lee

doi:10.3791/57661

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Article de méthode

Fabrication de nanostructures Gradient thermique dispositifs Technique et dépistage de la réponse des cellules formatrices endothéliales humaines

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DOI :

10.3791/57661

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1 juillet 2018

Dae Hwan Kim^*¹ , Long-Hui Cui^*² , Ha-Rim Seo² , Hyung Joon Joo² , Seung-Cheol Choi² , Do-Sun Lim² , Kyu Back Lee¹

¹School of Biomedical Engineering, Korea University, ²Department of Cardiology, Korea University Anam Hospital

^* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Nous présentons ici un protocole pour la fabrication de plaques de nanostructures dégradé par l’intermédiaire de dispositifs thermiques et la méthode de dépistage des réponses des cellules progénitrices endothéliales humaines pour les nanostructures. En utilisant la technique décrite, il est possible de produire un échafaudage qui peut manipuler le comportement de la cellule par des stimuli physiques.

Résumé

Nanotopography se trouvent dans diverses matrices extracellulaires (ECMs) autour du corps et est connu pour avoir des mesures de réglementation importants sur les réactions cellulaires. Toutefois, il est difficile de déterminer la relation entre la taille d’une nanostructure et les réponses des cellules en raison du manque d’outils de dépistage approprié. Ici, nous montrons l’évolution des plaques de nanostructures gradient reproductible et rentable pour la manipulation des réponses cellulaires. À l’aide d’oxyde d’aluminium anodique (AAO) comme un maître moule, plaques de nanostructures dégradé avec nanopillars de diamètre croissant s’étend [120-200 nm (GP 120/200), 200-280 nm (GP 200/280) et 280-360 nm (GP 280/360)] ont été fabriquées par un thermique, technique d’impression. Ces plaques de nanostructures gradient ont été conçus pour imiter les différentes tailles de nanotopography dans l’ECM et ont été utilisés pour dépister les réponses des cellules endothéliales humaines formatrices (hECFCs). Dans ce protocole, nous décrivons la procédure étape par étape de fabrication de nanostructures gradient plaques pour cellule ingénierie, techniques de culture hECFCs de sang périphérique humain et culture hECFCs sur des plaques de nanostructures.

Introduction

Récemment, la réponse des cellules par la stimulation physique de topographie de surface a été mis en lumière dans le domaine de l’ingénierie cellulaire¹^,²^,³^,⁴. Par conséquent, plus d’attention s’est concentrée sur des nanostructures en trois dimensions à la surface d’accessoires cellule⁵. Il a été signalé que l’intégrine, qui est le dispositif de reconnaissance de surface de la cellule, transmet le stimulus physique entraîné par les structures micro-nano d’ECM par mécanotransduction⁶. Cette st....