Préparation, procédures et l’évaluation de l’Injection de Plasma riche en plaquettes dans le traitement de l’arthrose du genou

Résumé

L’arthrose du genou est fréquemment observé dans le département orthopédique. Nous présentons en détail le procédé de traitement de l’arthrose du genou tout avec injection de plasma riche en plaquettes, y compris la préparation, des procédures et l’évaluation.

Résumé

L’arthrose du genou (KOA) est une des maladies plus fréquemment rencontrées dans le département orthopédique. Les traitements non chirurgicaux existants ont un effet limité sur la réparation du cartilage et sur la régénération osseuse. Plasma riche en plaquettes (PRP) est une substance bioactive autologue peut réparer les lésions du cartilage et accélérer la régénération osseuse efficacement. Cependant, la déclaration des protocoles de préparation des PRP dans les études cliniques est hautement incompatible, avec la majorité des études, fournir des informations insuffisantes pour autoriser le protocole puisse être reproduit. Les auteurs décrivent une méthode reproductible de préparation PRP visuellement, le traitement de KOA à l’aide d’injection intra articulaire de PRP et les méthodes d’évaluation des résultats. PRP a été préparé à l’aide de manuelle double centrifugation. La couche PRP a été extraite du sang périphérique et utilisée pour l’injection de cavité articulaire du genou. Évaluations ont permis des concentrations de plaquettes sanguines et des résultats cliniques. Préparation de la PRP par centrifugation manuelle nécessite moins d’appareils et est moins coûteuse que le plasma filtration ou centrifugation à l’aide de matériel. Le temps de centrifugation de notre méthode de double centrifugation a été 6 et 5 minutes pour les centrifugations respectifs sur les forces de 800 et 1400 x g, respectivement, afin de permettre l’élaboration cohérente de standardisé PRP. Toutefois, une méthode manuelle est sensible à l’erreur de l’opérateur, et préparation de commandes PRP n’est pas disponible. Les injections intra-articulaires de PRP s’est avéré pour être un traitement efficace pour l’arthrose du genou. La procédure de traitement complet a pris moins de 30 minutes, la concentration de plaquettes sanguines de PRP pourrait être normalisée et traitement s’est avéré pour être efficace lorsqu’il est évalué par le suivi.

Introduction

L’arthrose du genou (KOA) est une des maladies plus fréquemment vus dans le département orthopédique ; 30 % - 50 % des gens âgés de plus de 65 ans d’expérience cette maladie¹. À l’heure actuelle, la gestion conservatrice de KOA comprend principalement l’administration orale de médicaments anti-inflammatoires non stéroïdiens et médicaments en nutriments du cartilage, l’injection intra-articulaire de hyaluronate de sodium et de physiothérapie. Cependant, ces méthodes ne peuvent pas arrêter le processus de genou dégénérescence mixte². Défauts de cartilage articulaire peuvent causer la surface d’usure articulaire, l’instabilité conjointe et des changements métaboliques, qui font partie de la pathogenèse de KOA³. Toutefois, en raison de l’absence de vaisseaux sanguins, les nerfs et les tissus lymphoïdes du cartilage articulaire, récupération après avarie est difficile. Une méthode efficace de réparation du cartilage est particulièrement importante pour le traitement de KOA. Le traitement des osteoclasia est aussi un élément essentiel dans le traitement de KOA.

Plasma riche en plaquettes (PRP) est une substance bioactive autologue, et l’application de la PRP aux problèmes osseux et articulaires est de plus en plus étudiée. La justification biologique pour l’utilisation clinique de la PRP comprend son effet sur l’administration locale de facteurs de croissance et de la modification de la réponse inflammatoire et ses effets positifs sur les cellules de prolifération et la différenciation⁴. Après l’activation après une injection intra-articulaire, PRP libère les granules α travers la dégranulation et sécrète des divers facteurs de croissance, y compris le facteur de croissance dérivé des plaquettes, le facteur de croissance transformant-β, le facteur de croissance analogue à l’insuline, la facteur de croissance épidermique, le facteur de croissance endothélial vasculaire et le facteur de croissance fibroblastique. Ces promouvoir la prolifération des ostéoblastes et des chondrocytes, inhiber la dégénérescence du cartilage, renforcer la stabilité de l’os sous-chondral et de cartilage, réguler l’inhibiteur de tissu d’expression de gène de métalloprotéinase et maintenir l’équilibre de la synthèse et dégradation des protéoglycanes^5,6. Par conséquent, le PRP peut réparer les lésions du cartilage et accélérer la régénération osseuse.

Le résultat de l’injection de PRP est influencé par divers facteurs, y compris l’échantillonnage site⁷, le type de méthode de préparation de centrifugeuse⁸et l’utilisation des anticoagulants activateurs et^{9 10}. Il y a environ 3 types centrifuges méthodes pour préparer des PRP. Centrifugation manuelle, centrifugation fondées sur l’équipement ou des techniques de filtration plasma sont disponibles, bien que les méthodes manuelles et fondées sur l’équipement sont les plus couramment utilisés. La méthode manuelle exige l’équipement le moins, est pratique, est à faible coût et est simple à réaliser (Figure 1). PRP est préparé par la performance de la centrifugation manuelle deux fois. Anticoagulant et mixtes circulants sont centrifugés pour séparer les hémocytes de plasma et de plaquettes sanguines. Après avoir jeté les globules rouges sur la couche inférieure, le liquide surnageant est centrifugé pour re-séparation, divisant en surnageant plasma pauvre en plaquettes, milieu PRP et subnatant des globules rouges résiduelles. La couche intermédiaire est utilisée pour l’injection de cavité articulaire du genou (si la quantité est insuffisante, partie du liquide surnageant peut être dessiné). Les évaluations de la méthode comportent des quotes-parts de concentration de plaquettes sanguines et des résultats cliniques.

Le signalement des protocoles de préparation des PRP dans les études cliniques est hautement incompatible, et la majorité des études ne fournit pas suffisamment d’informations pour autoriser le protocole à être reproduite¹¹. Nous décrivons ici une méthode reproductible permettant de préparer le PRP et le traitement de KOA avec injection intra articulaire de PRP, avec évaluation des résultats. Critères d’inclusion étaient les patients souffrant d’arthrose du genou qui ont le soulagement de la douleur pauvres pour des médicaments analgésiques simples (tels que l’acétaminophène) et traitement conservateur. Critères d’exclusion incluaient des patients atteints de troubles du drainage lymphatique ou retour veineux ; patients atteints d’infections ostéo-articulaires du genou ; patients présentant une dermatose ou une infection dans la zone d’injection ; patients atteints de la peste ; patients avec une anomalie de la fonction coagulante ; patients atteints de graves maladies cardiovasculaires. La procédure de traitement entier prend moins de 30 minutes, et la concentration de plaquettes sanguines de la PRP est prouvée pour atteindre une mesure normalisée. Son efficacité est démontrée par l’évaluation des résultats au cours du suivi étroit.

Protocole

Les méthodes décrites ont été approuvées par le Comité éthique de l’hôpital général de Guangdong.

1. obtenir des PRP par Centrifugation manuelle

1. Préparer le patient en position couchée en chambre stérile à flux laminaire d’exploitation avec une confortable salle de température et d’humidité : température ambiante est de 22 ° C et l’humidité ambiante est de 60 %.
2. Utiliser une seringue de 1 mL à dessiner 0,2 mL d’héparine sodique (2 mL = 12 500 U) et puis humidifier une seringue de 50 mL.
   Remarque : 3 mL de citrate de sodium est également typique dans cette étape en remplacement de l’héparine sodique.
3. Gréer un tourniquet, stériliser le coude 2 - 3 fois et utiliser la seringue de 50 mL humide dessiner 30 mL de sang périphérique de la veine du coude.
4. Effectuer la première centrifugation.
   1. Répartissez le sang périphérique également sur les deux tubes de centrifugeuse stérile de 50 mL.
   2. Mettre deux tubes en hérissons horizontaux, puis dans la centrifugeuse, dans des conditions aseptiques.
   3. Centrifuger pendant 6 minutes à 800 g.
   4. Prendre les hérissons horizontaux sur, porter des gants stériles et sortir des tubes à centrifuger.
   5. Observer les stratifications de s’assurer que le sang périphérique est stratifié en deux couches.
   6. Utiliser une seringue de 10 mL propre à recueillir le liquide surnageant de ces tubes à deux centrifuger dans un tube à centrifuger propre.
5. Effectuer la seconde centrifugation.
   1. Une seringue de 10 mL propre permet d’ajouter une quantité équivalente d’eau stérile ou de sérum physiologique dans un autre tube à centrifuger propre équilibre. Mettre les tubes dans les hérissons horizontaux. Marquez l’une avec le liquide surnageant couche de sparadrap.
   2. Centrifuger pendant 5 minutes à 1400 g.
   3. Prenez les hérissons horizontaux sur, et en observant les stratifications vérifier que le liquide du tube marqué est divisé en trois couches.
   4. Utiliser une seringue de 10 mL pour dessiner 4 mL de liquide de la couche de cellules granuleuses moyen (leucocyte-riche, PRP couche) et la couche inférieure du surnageant. Si la quantité de la couche intermédiaire est suffisante, il suffit de dessiner 4 mL de celui.
   5. Mettre 0,4 mL du liquide dans un tube stérile anticoagulant (EDTA₂K, 3,6 mg) pour l’évaluation, laissant 3,6 mL de liquide restant dans la seringue.
      Remarque : Le protocole peut être suspendu ici.

2. intra-articulaire Administration de PRP

1. Laissez le mensonge patient en décubitus dorsal sur la table d’opération et fléchir le genou à 90 degrés.
2. Localiser le site de ponction à la marge inférieure de la rotule et 1 cm à partir du ligament patellaire latéral. Utilisez un stylo marqueur pour marquer le site.
3. Effectuer la stérilisation de la peau sur le site de ponction trois fois avec anerdian III, port de gants stériles et couvrir avec une serviette-trou aseptique.
4. Placer la seringue parallèle au plateau tibial et ensuite effectuer la ponction selon un angle de 45 degrés. Insérez complètement l’aiguille dans la peau.
5. Injecter les 3,6 mL de PRP de la seringue dans la cavité articulaire du genou.
6. Couvrir la position de ponction avec une gaze stérile et fixez-le avec du plâtre adhésif.
7. Appliquez la pression sur la plaie pendant 10 minutes. Observer pour tout effet indésirable grave pendant 30 minutes.
8. Administrer un total de trois injections à intervalles mensuels.
   Remarque : Le protocole peut être suspendu ici.

3. postopératoire évaluation d’Injection de PRP

1. Évaluer la concentration de plaquettes sanguines dans le PRP.
   1. Utilisez les 0,4 mL de PRP du tube anticoagulant (K₂EDTA, 3,6 mg).
   2. Analyser la concentration de plaquettes sanguines de la PRP à l’aide d’un analyseur automatique des cellules sanguines.
2. Évaluer les résultats postopératoires de l’injection de PRP.
   1. Avec une consultation 1 jour avant chacun des trois traitements, poursuivre un suivi du patient 1 jour après chaque traitement, 3 jours après chaque traitement, 1 semaine après chaque traitement, 1 mois après le troisième traitement, 3 mois après le troisième traitement et 6 mois après le troisième traitement.
   2. Utiliser une échelle visuelle analogique (Eva), Western Ontario et Index de l’arthrose des universités McMaster (WOMAC), société de genou Score (KSS) et échelle fonctionnelle du genou de Lysholm pour évaluer les effets postopératoires.

Résultats

En conséquence, les plaquettes comte de la PRP atteint une concentration standard niveau de 1121 x 10³/µL. Nous avons mené les enquêtes suivis 15 décrites dans le protocole sur un patient mâle âgé de 55 ans avec KOA précoce. Il était évident que les résultats cliniques précoces était satisfaisante après l’administration intra articulaire de PRP (Figure 2). Cependant, l’efficacité à moyen terme était légèrement inférieure. Un effet analgésique nette...

Discussion

La concentration de plaquettes dans le sang humain normal est entre 150 000/µL et 350 000/µL, et il est largement admis que la concentration de plaquettes sanguines de PRP devrait atteindre 1 000 000/µL, qui est 3 à 5 fois la concentration normale⁹. Selon le système de hiérarchie de patte, il est estimé que PRP n’a aucun effet évident lorsque la concentration de plaquettes sanguines est inférieur à trois fois la concentration normale, tandis que le PRP a un effet inhibiteur lorsque sa concentratio...

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Centrifugeuse	Eppendorf	5702
Tube de centrifugation	CORNING	430828
Rotor horizontal	Eppendorf	LL080
Anerdian III	Shanghai Likang Désinfectant HiTech Co., LTD 310173		Désinfecter la peau
1ml Seringue	KDL  ; Medical Equipment Co., LTD	0.4 * 13 RWLB
10ml Seringue	KDL  ; Medical Equipment Co., LTD	1.2 * 38 TWSB
50ml Seringue	KDL  ; Medical Equipment Co., LTD	0.7 * 32 TWLB
Garrot	médical Changzhou Jinli Latex Products Co., LTD	0087-2011
Gants chirurgicaux en caoutchouc stériles à usage unique	Shanghai jinxiang Latex Products Co., LTD	17060
Aiguille de sang jetable	KDL  ; Medical Equipment Co., LTD	0,55 * 20 L (II) RWLB
Héparine sodique injectable	SPH No.1 Biochimique & Pharmaceutical Co., LTD	1706101	2ml :12500U
Jifro Antiseptique pour les mains Gel Sans Rinçage Shanghai	Likang Désinfectant HiTech Co., LTD	311793
Coton-tige médical	Foshan Kangzheng Medical Supplies Co., LTD	KZ3-12	Désinfecter la peau
10ml Saline normale  ;	Jiangxi Shuangshi Pharmecutical Co., LTD	140211458
Analyseur automatique de cellules sanguines	Beckman Coulter	LH-750
stérile	hole-towe
(tubes de prélèvement sanguin, K2E 3.6mg)	Becton, Dickinson and Company	CNL17-COO56	Conserver dans un endroit frais et sec entre 4 et 25 degrés Celsius
Pince à épiler	RWD LIFE SCIENCE	F12006-10
Gaze stérile	Guangdong Ze Chang Trade Co., LTD	170915
Adhésif Plaster	3M Transpore	1527C-0
Skin Marker Pen	Guangzhou Mingjia Medical Device Manufacturing Co., LTD	10110