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Article de méthode

Démarche analyse des déficiences moteurs fonction de l’âge chez la souris avec la neurodégénérescence

11.8K vues

DOI :

10.3791/57752

18 juin 2018

Dans cet article

Résumé

Dans cette étude, nous montrons l’utilisation de l’analyse cinématique démarche basée sur plan ventral d’imagerie pour surveiller les changements subtils dans la coordination motrice ainsi que la progression de la neurodégénérescence avec l’âge dans des modèles murins (p. ex., endophiline mutant lignées de souris).

Résumé

Des tests de comportement moteur sont couramment utilisés pour déterminer la pertinence fonctionnelle d’un modèle de rongeur et pour tester nouvellement mis au point des traitements chez ces animaux. Plus précisément, analyse de la démarche permet de reconquérir la maladie des phénotypes pertinents qui sont observés chez des patients humains, en particulier dans les maladies neurodégénératives qui affectent des habiletés motrices comme la maladie de Parkinson (MP), la maladie d’Alzheimer (ma), amyotrophique latérale amyotrophique (SLA) et autres. Au début des études dans cette optique, la mesure des paramètres de la démarche a été laborieuse et dépendent de facteurs qui ont été difficiles à contrôler (par exemple, vitesse, fonctionnement continu). Le développement plan ventral systèmes d’imagerie (VPI) rend possible la démarche analyse à grande échelle, faisant de cette méthode un outil utile pour l’évaluation du comportement moteur chez les rongeurs. Nous présentons ici un protocole approfondi de l’utilisation de l’analyse cinématique démarche pour examiner la progression en fonction de l’âge des déficits moteurs dans des modèles murins de la neurodégénérescence ; lignées de souris avec une baisse des taux de l’endophiline, dans lequel les lésions neurodégénératives augmentent progressivement avec l’âge, sont utilisées à titre d’exemple.

Introduction

Imposent un lourd fardeau sur les patients, les familles et la société des maladies neurodégénératives et deviendront encore plus préoccupant que l’espérance de vie augmente et la population mondiale continue de vieillir. Un des symptômes plus courants des maladies neurodégénératives sont des problèmes d’équilibre et de la mobilité. Ainsi, la caractérisation du comportement moteur dans le vieillissement chez les mammifères (p. ex., un rongeur) des modèles ou des modèles montrant les phénotypes neurodégénératives, constitue un outil précieux pour démontrer la pertinence in vivo de la modèle animal spécifique (s), ou thérapeutique traitements qui visen....

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Protocole

Toutes les expériences sur des animaux présentés ici sont menées conformément aux directives européennes pour le bien-être animal (2010/63/UE) avec l’approbation de la Niedersächsisches Landesamt für Verbraucherschutz und Lebensmittelsicherheit Lavesarchitecte (construction), numéro d’immatriculation 14 / 1701.

1. conception de l’étude

  1. Comme travail de comportement animal exige une planification minutieuse, examiner les paramètres suivants lors de la conception de l’expérience.
    1. Nombre d’animaux nécessaires par groupe.
      1. Utiliser un logiciel de statistique (p. ex., PASS, EDA ou GPower) pour calculer la taille....

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Résultats

Pour illustrer l’utilisation de l’analyse cinématique démarche, nous avons effectué démarche analyse sur souris WT C57BL/6J avec l’âge, ainsi que plusieurs lignées mutantes endophiline, utilisant des instruments disponibles dans le commerce et les logiciels (veuillez vous référer à la Table de Matériaux). Dans cette configuration, une caméra haute vitesse sous un tapis roulant transparent enregistre le fonctionnement d’une souris (Figure 1 a).......

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Discussion

L’étude de la coordination motrice est une approche utile dans la caractérisation de modèles de maladies neurodégénératives, en particulier pour les maladies comme PD dans laquelle la coordination motrice est durement touchée. Avec l’aide d’un test fonctionnel de l’analyse cinématique démarche, nous pouvons identifier les changements subtils dans la démarche d’animaux à l’apparition de problèmes locomoteurs, ou dans les modèles avec faible neurodégénérescence et phénotype donc relativement modeste. Compte tenu de la dive.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent sans intérêts financiers concurrents.

Remerciements

Nous remercions les gardiens animaux à l’animalerie de l’ENI pour aide à l’élevage et Dr. Nuno Raimundo pour des commentaires utiles sur le manuscrit. I.M. est pris en charge par les subventions de la Fondation allemande de la recherche (DFG) à travers le centre de recherche en collaboration SFB-889 (projet A8) et SFB-1190 (projet P02) et le Emmy Noether Young Investigator Award (1702/1). C.M.R. est soutenu par la bourse de recherche de l’Ecole doctorale de Göttingen pour les Neurosciences, biophysique et des Biosciences moléculaires (GGNB).

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
DigiGaitMouse Specifics, Inc., Framingham, Massachusetts, États-UnisLe logiciel d’imagerie et d’analyse DigiGait est inclus avec le matériel.
couverture non transparente ou un tissurecouvre la chambre d’essai pour réduire la sensation d’exposition/l’équilibre de stress de l’animal
, par exemple la balance Satoriusavec une précision de 0,1 g et une charge maximale d’au moins 100 g
de rouge peinture au doigtpar exemple Kreul ou Staedtlerpour augmenter le contraste entre les pattes et l’animal. corps petit
pinceaupinceau doux pour appliquer de la peinture au doigt sur les pattes de l’animal
détergentpour le nettoyage
, par exemple Meliseptol ou 70 % d’éthanolpar exemple B.Braunpour la désinfection
Une sombre , dilué désinfectant,

Références

  1. Clarke, K. A., Still, lJ. Gait analysis in the mouse. Physiology and Behavior. 66, 723-729 (1999).
  2. Kale, A., Amende, I., Meyer, G. P., Crabbe, J. C., Hampton, T. G. Ethanol's effects on gait dynamics in mice investigated by ventral plane videography. Alcohol Clin Exp Res. ....

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Réimpressions et autorisations

Mots-clés

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