Sensille unique Recordings pour Locust Palp sensilles basiconiques

Résumé

Cet article décrit un protocole détaillé et très efficace pour les enregistrements de sensille unique de la basiconica de sensilles sur les palpes des insectes pièces buccales.

Résumé

Les palpes de pièces buccales de Criquet pèlerin sont considérés comme des organes gustatifs classiques qui jouent un rôle important dans le choix des aliments d’un criquet, en particulier pour la détection des signaux chimiques non volatile par l’intermédiaire de sensilles chétiformes (précédemment nommé sensilles terminales (ou sensilles huppés). Il y a maintenant de plus en plus évident que ces palpes ont également une fonction olfactive. Un récepteur odorant (LmigOR2) et une protéine de liaison odorant (LmigOBP1) ont été localisés dans les neurones et les cellules accessoires, respectivement, dans le basiconica de sensilles des palpes. Sensille unique enregistrement (SSR) est utilisé pour enregistrer les réponses des neurones de récepteur odorant, qui est une méthode efficace de dépistage actifs ligands sur les récepteurs spécifiques odorant. SSR est utilisé dans les études fonctionnelles des récepteurs odorants dans des sensilles palpe. La structure de la basiconica de sensilles située sur le dôme des palpes diffère quelque peu de la structure de celles sur les antennes. Donc, lorsque vous effectuez une SSR provoquée par les substances odorantes, quelques conseils spécifiques peut être utile pour l’obtention de résultats optimaux. Dans cet article, un protocole détaillé et très efficace pour un SSR de palp insectes sensilles basiconiques est introduit.

Introduction

Animaux ont développé une gamme d’organes chemosensoriels qui détectent les signaux chimiques exogènes. Chez les insectes, les plus importants organes chemosensoriels sont les antennes et les palpes. Sur ces organes, plusieurs types de poils chemosensoriels, appelés chemosensoriels sensilles, sont innervés par les neurones chemosensoriels (SCSN) dans les poils. Notes de sensilles chemosensoriels reconnaissent les signaux chimiques spécifiques par le biais de transduction d’un signal de stimulus chimiques à des potentiels électriques qui sont ensuite transférées jusqu’au système nerveux central^1,,^2,<....

Protocole

1. préparation des Instruments et des insectes

1. Préparation de tungstène électrodes et des stimuli solutions
   1. Fixer un nouveau fil de tungstène (diamètre de 0,125 mm, longueur 75 mm) dans un micromanipulateur et aiguiser dans une solution de nitrite (NaNO₂) sodium 10 % (p/v) dans une seringue à 10 V fourni par une source d’alimentation pendant environ 1 min avec un stéréomicroscope (grossissement de 40 X).
   2. Tremper le fil de tungstène affûté à plusieurs reprises dans la solution₂ NaNO de 10 %, environ 4 mm 5 V < 1 min (Figure 1 a).
   3. Examiner le diamètre de la po....

Résultats

Deux sous-types de sensilles (pb1 et pb2) sur le palpe maxillaire de Criquet pèlerin sont identifiées basées sur la dynamique de réponse différente à des substances chimiques odorantes (10 % 1-nonanol et 10 % d’acide nonanoïque). Les neurones en pb1 produisent significativement plus de pics pour 1-nonanol qu’à l’acide nonanoïque tandis que les neurones en pb2 sont significativement que moins activés par 1-nonanol par rapport à l’acide nonanoïque (Figure 4). H.......

Discussion

Insectes s’appuient sur les palpes pour détecter les odeurs de nourriture, et leurs palpes sont censées jouer un rôle important dans la spéciation^13,27. Les palpes sont de simples organes olfactifs et suscitent un intérêt croissant comme un modèle attrayant pour l’exploration de le neuromoléculaire réseaux sous-jacents chémosensation²⁸.

Insecte labellar et palpe SSRs ont été réalisées avec succès sur la Dros.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Fil de tungstène	ADVENT	W559504	Utilisé pour fabriquer l’électrode et fixer le palpe
NaNO2	Sigma-aldrich	563218-25G	Utilisé pour affûter le fil de tungstène
Alimentation CA	Syntech	A2-70	Fournir la tension lors de l’affûtage du fil de tungstène
Stéréoscope	Motic	SMZ-163	Utilisé pour observer le affûtage du fil de tungstène
Microscope	Olympus	W-51	Utilisé pour l’observation de la sensille sur le palpe maxillaire du criquet
Contrôleur intelligent d’acquisition de données	Syntech	IDAC-4	Affichage en temps réel à l’écran de tous les signaux avant et pendant l’enregistrement
Contrôleur de stimulus	Syntech	CS-55	Utilisé pour le contrôle de l’application du stimulus
Électronique micromanipulateur	C.M.D.T	CFT-8301D	Utilisé pour le mouvement mineur de l’électrode d’enregistrement
Micromanipulateur	Narishige	MN-151	Utilisé pour le mouvement mineur de l’électrode
de référence Haut-parleur	EDIFIER	R101T06	Connecté à IDAC-4 et fournissant le son pour le signal
Base magnétique	PDOK-101		Utilisé pour maintenir l’électrode et le tube de distribution du stimulus
Table d’isolation des vibrations	TianHe	HAP-100-1208	Utilisée pour isoler les vibrations de l’équipement
Lame de verre	CITOGLAS	ZBP-407	Utilisée pour la fabrication de la base du MPH
Blu-tack	Bostik	Blu-tack-45g	Fixation du fil de tungstène
Tube Pasteur	YARE	WITEG	Pose du papier filtre contenant les solutions de stimulus