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Un nouveau modèle Ex Vivo pour l’évaluation des performances matérielles Injection sous-muqueuse endoscopique

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DOI :

10.3791/58029

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19 octobre 2018

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1Department of Molecular Gastroenterology and Hepatology, Graduate School of Medical Science, Kyoto Prefectural University of Medicine, 2Department of Infectious Diseases, Graduate School of Medical Science, Kyoto Prefectural University of Medicine

Dans cet article

Résumé

Nous avons développé un nouveau ex vivo modèle auquel s’applique une tension constante le spécimen gastrique porcin. Cette évolution a permis d’évaluer le rendement (la hauteur et la durée de l’élévation sous-muqueux) de divers SIMs avec précision.  La méthodologie détaillée d’installation de ce nouveau modèle est expliquée.

Résumé

Accroître les performances du matériel d’injection sous-muqueuse (SIMs) est important pour le traitement endoscopique des cancers gastro-intestinaux au début. Il est essentiel d’établir un modèle ex vivo qui peut être évaluée performance SIM avec précision, pour développer des SIMs de haute performance. Dans notre étude précédente, nous avons développé un nouveau ex vivo modèle qui peut être utilisé pour évaluer la performance des différents SIMs en détail en appliquant une tension constante aux extrémités de l’échantillon. On a également confirmé que le nouveau modèle ex vivo proposé permet de mesure de la hauteur (SEH) élévation sous-muqueux précis dans des conditions uniformes et des comparaisons détaillées des performances des différents types de SIMs. Nous décrivons ici la nouvelle ex vivo modéliser et expliquer la méthode d’installation détaillée de ce modèle. Étant donné que toutes les parties du nouveau modèle étaient faciles à obtenir, l’installation du nouveau modèle pourrait être achevée rapidement. SEH de SIMs différents pouvait être mesuré avec plus de précision à l’aide du nouveau modèle. Le facteur crucial qui détermine les performances de la carte SIM peut être identifié à l’aide du nouveau modèle. SIM développement vitesse augmente considérablement après que le facteur a été identifié.

Introduction

Tant dissection sous-muqueuse endoscopique (ESD) et résection muqueuse endoscopique (EMR) sont des traitements courants actuellement pour le stade précoce de cancer gastro-intestinal1,2. Injection d’un matériau d’injection sous-muqueuse (SIM) dans la sous-muqueuse est l’une des étapes plus importantes pour les EMR et ESD procédures2,3. Haute altitude sous-muqueux et maintien d’altitude sous-muqueux sont des critères essentiels pour la conduite en toute sécurité les EMR/ESD.

Bien que le sérum physiologique (NS) a été utilisé comme une carte SIM depuis l’invention du traitement endoscopique4,5, hyaluronate de sodium (HA) a été présenté comme un traitement au cours des dernières années6,7. HA est devenu largement utilisé dans les traitements endoscopiques comme un SIM supérieure en raison de sa haute performance8,9,10,11. Actuellement, une comparaison des performances entre les SIMs existants a été réalisée, et SIMs performants ont été développés pour identifier un autre supérieur SIM5,12,13,14, 15,16,17,18.

Le modèle ex vivo à l’aide d’un spécimen d’estomac de porc a été utilisé pour évaluer la performance de la carte SIM, car l’estimation de la performance de la carte SIM dans le tube digestif humain est très difficile de19,20,21 , 22. Toutefois, ce modèle classique ex vivo est extrêmement simple et a les possibilités d’amélioration. Reproduire un environnement plus proche de la muqueuse gastro-intestinale humaine permettra une évaluation précise de la performance de la carte SIM.

Dans notre étude précédente, nous avons développé un nouveau ex vivo modèle qui peut être utilisé pour évaluer la performance des différents SIMs en détail en appliquant une tension constante aux extrémités de l’échantillon. On a également confirmé que le nouveau modèle proposé de ex vivo , permet des mesures de SHE exactes dans des conditions uniformes et une comparaison détaillée des performances de différents types de SIMs23.

Dans cette étude, nous présentons un aspect complet de ce nouveau modèle ex vivo et la méthodologie détaillée d’installation du nouveau modèle ex vivo est expliquée en détail à l’aide de vidéos et chiffres. Le nouveau modèle ex vivo est composé de parties qui sont facilement disponibles et peut être rapidement mis en place. Description de la méthodologie détaillée d’installation contribuera à la diffusion du nouveau modèle.

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Protocole

Le protocole suivant suit les directives de protection des animaux de la Kyoto Prefectural University of Medicine.

1. préparation des échantillons à l’aide d’un estomac de porc

Remarque : La première étape consiste à préparer des échantillons pour être utilisé dans le modèle ex vivo (Figure 1). L’épaisseur de la paroi gastrique porcine varie dans les différentes zones de l’estomac. Utilisez le tiers supérieur de l’estomac de porc, qui est relativement similaire à l’estomac humain. Exclure les spécimens inappropriés où élévation sous-muqueux est introuvable en raison de la fibrose.

  1. Couper les spécimens gastriques en carrés avec des dimensions approximatives de 6 × 6 cm.
  2. Stocker les échantillons gastriques immédiatement à une température de-30 ° C.
  3. Décongeler les échantillons congelés gastriques juste avant la procédure de mesure afin d’assurer des conditions de mesure uniforme.

2. des modalités d’installation de méthodologie d’un nouveau modèle Ex Vivo

NOTE : Etends le spécimen décongelé sur une planche de deux façons différentes. Dans le modèle conventionnel ex vivo , fixer le spécimen avec broches (Figure 1 a)19,20,21,22. En revanche, dans le nouveau modèle ex vivo , difficulté ou étirer les deux extrémités de l’échantillon avec clips pour produire une tension constante (Figure 1 b, C). Toutes les pièces du nouveau modèle sont faciles à obtenir, et le programme d’installation de ce nouveau modèle peut être effectuée rapidement (Figure 2). La procédure du nouveau modèle est comme suit (Figure 3) :

  1. Branchez la pince en acier inoxydable et le fil de la clé et le crochet en forme de S (Figure 3 a).
  2. Connectez le fil et le crochet en forme de S et le poids (Figure 3 a).
  3. Raccorder le crochet à l’autre bout du fil. Un dispositif de traction est réalisé dans le processus décrit ci-dessus (Figure 3 b).
  4. Fixer les poulies (Figure 2 b) aux deux extrémités de la base (Figure 3).
  5. Placer la plaque de caoutchouc (6 x 6 cm) sur le centre de la base (Figure 3).
  6. Placer le spécimen gastrique sur la plaque de caoutchouc et pincer que le spécimen se termine avec le clip de l’appareil de traction.
  7. Accrocher le poids par le biais de la poulie (deux côtés). Ainsi, une tension constante peut être appliquée à l’échantillon (Figure 4).
  8. Démarrer la mesure de la SEH, car après l’installation du nouveau modèle est complètement finie (voir étape 3 ci-dessous).

3. evaluation des performances de la SIM

Remarque : Dans cette étude, nous avons utilisé physiologique (NS) et 0,4 % hyaluronate de sodium (HA) comme SIMs à tester, puis mesurer SEH des deux SIMs. Trois mesures indépendantes sont effectuées. Les données obtenues sont exprimées comme la moyenne et l’écart-type (S.D.). L’analyse statistique a été réalisée en utilisant le logiciel d’analyse statistique (GraphPad Prism 7). Nous avons analysé les variables continues (SEH) avec test-t de l’élève et les amplitudes avec P < 0,05 étaient considérés comme significatifs. La mesure de la SEH est comme suit (Figure 5).

  1. Effectuer le réglage du point zéro de la toise, basée sur la hauteur de muqueuse avant une intervention de la sous-muqueuse élévation. En détail, effectuer le réglage du point zéro en appuyant sur le bouton PRESET après la correction de la pointe à tracer à la hauteur de la surface de la muqueuse.
  2. Injecter 2,0 mL de chaque solution horizontalement dans la sous-muqueuse de la marge du spécimen à l’aide d’une seringue de 2,5 mL et une aiguille de calibre 23, pour effectuer une procédure d’élévation sous-muqueux (Figure 5 a-C).
  3. Mesure SEH promptement l’à l’aide d’une jauge de hauteur numérique à 0, 2.5, 5, 7.5, 10, 12.5, 15, 17.5, 20, 30, 45 et 60 min après l’injection (Figure 5). En détail, inscrit la hauteur affichée sur la jauge de hauteur pour la fixation de la pointe à tracer vers le haut de l’élévation sous-muqueux.
  4. Effectuer trois mesures indépendantes et d’exprimer les résultats obtenus comme la moyenne et l’écart-type.
  5. Analyser les données obtenues à l’aide de logiciels statistiques appropriés et évaluer la performance des SIMs (les performances peuvent être comparées entre chaque SIM.)

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Résultats

SEH a été mesurée au fil du temps dans le nouveau modèle ex vivo ou conventionnelles ex vivo modèle. Les valeurs de SEH (NS), mesurée à l’aide du modèle classique [NS a été injecté dans la sous-muqueuse du spécimen fixé avec des épingles (0,0 N)] ont été 5,7 mm (0 min), 3.6 mm (5 min), 3. 0 mm (10 min) et 2,2 mm (30 min). De cette façon, les valeurs de la SEH diminuent avec l’augmentation des temps d’injection de post. Une analyse similaire a été réalisée à l’aide de 0,4...

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Discussion

L’estomac de porc utilisé pour le nouveau modèle devrait être conservé dans un congélateur immédiatement après la résection et être utilisé dans quelques mois après la congélation, car la fraîcheur de l’estomac de porc est essentielle pour la mesure de la SEH. (Nous mesuré SEH à l’aide de spécimens gastriques surgelés et congelés et a confirmé qu’il n’existe aucune différence dans le résultat de mesure SEH.)

La qualité des spécimens gastriques est grandement influencée par les différences indi...

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par Kyoto innovantes Medical Technology Research & Development Support System et par le programme de recherche translationnelle ; Stratégiques de PRomotion pour l’application pratique des technologies médicales innovantes (TR-SPRINT) de l’Agence japonaise pour la recherche médicale et le développement (AMED).

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
poids (153,1 g)
poulie de type fixeH.H.H. MANUFACTURINGVS25
d’un diamètre de 0,45 mm Fil coupéchaîne Nissainoxydable Y-5
de largeur 147 mmKOKUYOnone
d’une longueur de 12 cmChaîne NissaP-702
crochet en forme de S en acier inoxydableTRUSCO NAKAYAMATCS1.2
crochet verrouillable en acier inoxydableMizumoto Machine MfgB2054
socle rectangulaire en bois (45 x 60 cm)aucunaucun
plaque en caoutchouc (5 x 5 cm)aucun
aucun jauge de hauteur numériqueMitutoyoHDS-20C
Seringuede 2,5 mlAiguille TerumoSS-02SZ
de calibre 23TerumoNN-2332R
MucoUpBoston Scientificnone0,4 % hyaluronate de sodium (HA)
solution saline (20 mL)Otsuka Pharmaceuticalnonesolution saline normale (NS)
GraphPad Prism 7 softwareGraphPad Incnone
Fil d’acier inoxydable en Clip en acier Fil porte-clés en acier inoxydable

Références

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Mots-clés

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