Article de méthode

Appareil pour la récolte de tissus Microcolumns

DOI :

10.3791/58289

⸱

25 octobre 2018

 ,  ,  , 
1Wellman Center for Photomedicine, Massachusetts General Hospital, 2Department of Dermatology, Harvard Medical School

Dans cet article

Résumé

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Nous décrivons ici un protocole pour la production de la récolte du site aiguilles qui peuvent servir à recueillir des tissus de la peau pleine épaisseur sans causer de donateurs cicatrices. Les aiguilles peuvent être combinés avec un système de collecte simple pour atteindre de gros volumes de récolte.

Résumé

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Ce manuscrit décrit le processus de production pour un appareil de laboratoire, fabriqué à partir de composants sur étagère, qui peuvent être utilisés pour recueillir des microcolumns du tissu cutané de pleine épaisseur. La petite taille de le microcolumns permet aux donateurs sites guérir rapidement sans provoquer de donneuse, cicatrices, alors que la récolte pleine épaisseur tissulaire permet l’incorporation de tous les composants cellulaires et extracellulaires du tissu cutané, y compris ceux liée avec les régions cutanées plus profondes et les structures cutanées annexielle, qui doivent encore être reproduit avec succès en utilisant des tissus classiques, techniques d’ingénierie. Le microcolumns peut être appliqué directement sur les plaies de la peau pour augmenter la guérison, ou ils utilisable comme source de cellules/tissus autologues pour autres approches d’ingénierie tissulaire. Les aiguilles de récolte sont faites en modifiant les aiguilles hypodermiques standards et ils peuvent être utilisés seuls pour la récolte de petites quantités de tissu ou couplés à un système de collection axée sur l’aspiration simple (également fait partir de fournitures de laboratoire couramment disponibles) pour grand volume de récolte pour faciliter les études sur des modèles animaux grands.

Introduction

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Une greffe de peau autologue est le pilier de cicatrisation, mais il est limité par la rareté du site donneur et de la morbidité, conduisant à des efforts concertés au cours des dernières décennies pour développer de nouvelles options thérapeutiques pour remplacer une greffe de peau classique1,2 . Nous avons récemment mis au point une autre méthode de récolte de la peau afin de valoriser les avantages d’une greffe de peau pleine épaisseur tout en réduisant la morbidité du site donneur. En recueillant la pleine épaisseur peau sous la forme de petites (~0.5 mm de diamètre) « microcolumns », les sites donneurs so....

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Protocole

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Tous les travaux impliquant des animaux vivants et des échantillons de tissus d’origine animale ont été approuvés par le Massachusetts général hôpital institutionnels et animalier utilisation Comité (IACUC).

1. production de la récolte des aiguilles

  1. Programme d’installation de la phase de production
    1. Fixez un connecteur luer lock femelle sur un poste et monter le post sur une platine de rotation jusqu'à ce que le raccord luer lock au centre de la scène (Figure 1A).
    2. Positionner cette première étape de rotation verticale et montez-la perpendiculairement sur une étape d....

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Résultats

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Les aiguilles récolte devraient être en mesure de recueillir des microcolumns des tissus de la peau pleine épaisseur avec environ un taux de réussite de 80 à 90 %, et chaque microcolonne devrait contenir, épiderme, derme et quelques graisse sous-cutanée (Figure 4). Si le taux de réussite de la récolte est faible, ou s’il devient difficile d’insérer une aiguille dans le tissu, puis une nouvelle aiguille est probablement nécessaire. Si le taux de réussite pour .......

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Discussion

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Les méthodes décrites ici sont destinées à permettre le regroupement des tissus microcolumns en quantité suffisante pour en vivo grandes études animales, utilisant des outils faits de fournitures de laboratoire disponibles dans le commerce. Cet appareil a été utilisé précédemment dans la récolte de tissus excisés de peau humaine4,9 , mais aussi de peau de porcs sur pied3. Les paramètres spécifiques décrits sont ceux qui se sont ré.......

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Déclarations de divulgation

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Les auteurs sont des coïnventeurs sur les brevets concernant la technologie décrite dans cet article, de qui ils ont reçu un octroi de licences et les redevances auprès de leur institution, Massachusetts General Hospital. J. Tam consulte également de Medline Industries, Inc., qui détient la licence commerciale pour cette technologie.

Remerciements

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Ce travail a été soutenu en partie par l’armée, marine, NIH, armée de l’Air, VA et Health Affairs pour soutenir l’effort de l’AFIRM II, sous le no Award. W81XWH-13-2-0054. L’activité médicale Acquisition de recherche de l’armée d’États-Unis, 820 Chandler Street, Fort Detrick, MD 21702-5014 est le Bureau d’acquisition attribution et l’administration. Opinions, les interprétations, les conclusions et les recommandations sont celles de l’auteur et ne sont pas nécessairement approuvées par le ministère de la défense.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Roue diamantéeDremel545
Aiguille hypodermique (19G)Fisher Scientific14-840-98D’autres tailles d’aiguilles peuvent être utilisées, en fonction des besoins expérimentaux
Roue à pierreDremel540
Seringue (20mL avec luer lock)Fisher Scientific22-124-967
Adaptateur d’aspirationTulip MedicalPA20BDEn option, pour la récolte à grand volume
Cartouche d’aspirationFisher Scientific19-898-212En option, pour la récolte à grand volume. Stériliser avant utilisation.
Tubulured’aspiration MedlineDYND50216HEn option, pour la récolte de gros volumes

Références

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  1. Sun, B. K., Siprashvili, Z., Khavari, P. A. Advances in skin grafting and treatment of cutaneous wounds. Science. 346 (6212), 941-945 (2014).
  2. Singh, M., et al. Challenging the Conventional Therapy: Emerging Skin Graft Techniques for Wound Heali....

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Réimpressions et autorisations

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Mots-clés

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