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Article de méthode

Un test de concurrence plaque comme une rapide évaluation préliminaire de la Suppression de la maladie

7.6K vues

DOI :

10.3791/58767

28 octobre 2018

Dans cet article

Résumé

Présenté est un protocole pour un test de concurrence de plaque déterminer si un compost spécifique est susceptible de contenir des bactéries et des champignons qui inhibent la croissance de Rhizoctonia solani.

Résumé

L’objectif était de développer et optimiser un bioessai de simple, abordable et efficace pour détecter les capacité suppressive de maladie d’un compost spécifique contre le champignon terricole Rhizoctonia solani. R. solani est un pathogène d’une large gamme de plantes-hôtes dans le monde entier. Le champignon survit dans le sol comme un saprophyte et pousse rapidement sur milieu gélosé eau simple. L’essai de plaque est une méthode rapide pour comparer les composts pour leur capacité à ralentir la croissance de r. solani. L’essai corrèle aussi bien avec la suppression d’autres pathogènes fongiques terricole qui survivent en tant que saprophytes dans les sols comme les premiers fléaux Alternaria, fusariose, pourridié phytophthoréen, Pythium et pourriture des racines.

Introduction

Rhizoctonia représente un vaste complexe de champignons, de laquelle Donk Thanatephorus cucumeris (Frank) (anamorphe Rhizoctonia solani Kühn de =) est l’agent pathogène causant la pourriture des racines et la fonte des semis1. Rhizoctonia solani est un pathogène agressif et un saprophyte qui peut survivre comme sclérotes sous des conditions environnementales défavorables1. En conséquence, il a une répartition mondiale et peut provoquer des maladies sur la large gamme de plantes hôtes, y compris les Solanaceae, Fabaceae, Asteraceae et Brassicaceae entraînant des pertes économiques série....

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Protocole

1. Préparez à l’avance

  1. Master culture fongique (organisme d’essai)
    1. Commander auprès de l’American Type Culture Collection, Collection de microbiologie9, par sa téléomorphe Thanatephorus cucumeris (Frank) (ATCC 10154) ou MYA 4031.
    2. Alternative : Recueillir des souches locales comme fait par les auteurs. Semis de radis rouge (Raphanus sativus) fonctionnent bien comme plante appât ; récupérer la terre d’un endroit connu pour avoir une histoire de pourriture de racine ou de fonte des semis causée par r. solani. Semer les graines dans le sol et isoler des lésions des racines lorsque les semis so....

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Résultats

Compost fini doit être stable et mature, deux termes qui sont souvent utilisés indifféremment, donc peut être emballé et transporté en toute sécurité et pas entraîner des effets négatifs au cours de son utilisation finale4. La stabilité est une résistance à la décomposition et est habituellement déterminée à l’aide d’indices de l’activité microbienne. Mesures générales de respiration microbienne peuvent mesurer de stabilité compost mais pas nécessairement .......

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Discussion

Nous savons par les recherches antérieures, que certains composts sont efficaces pour réprimer r. solani et que les effets suppresseurs sont due à des microbes vivant dans le compost, pas les propriétés abiotiques de compost6,8. L’utilisation de l’autoclave afin de « tuer » microbiote a été critiquée parce qu’elle affecte la chimie du carbone des médias10. Nous avons comparé l’utilisation de l’autoclave pour filtration sous vide p.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

La recherche financée par le Vermont Agricultural Experiment Station concurrentiel Hatch programme VT-HO1609. Lynn Fang a utilisé la méthode dans le cadre de sa thèse de M.S. à l’Université du Vermont,6.

....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
quantité de Gélose conique en verre autoclavable à col étroitFisher Scientific10-040D125 mL
Tubes à essai en verre autoclavableFisher Scientific14-925J25 mL de gélose
granulée déshydratéeFisher ScientificDF0145-17-0500 g
Gants résistants à la chaleurFisher ScientificMEMGG1314WLplusieurs marques disponibles
Parafilm (bandes de 2-3 cm de large)Fisher ScientificPM992 13-374-16ou 10 cm de largeur de travail
boîtes de Pétri jetables en polystyrèneFisher ScientificR80116est livré en manchons de 20/ch ou en caisses de 500
gélose au dextrose de pomme de terre déshydratéeFisher ScientificDF0013-15-8est disponible en quantités de 100, 500 et 2000 grammes
agitateur réciproque de paillasseThomas Scientific1227Y31d’autres modèles fonctionneront
bain-marie ThermoScientificS373635L règle transparente à usage général
, plate, au moins 10 cmTouteutilisation règle métrique
Culture ATCCAmerican Type Culture CollectionATCC 10154téléomorphe Thanatephorus cucumeris (Frank) (ATCC 10154) ou MYA 4031 ;
bande de laboratoireFisher Scientific15935autoclavable et amovible, 1" de large préféré
marqueur résistant à l’eaubureau ou de fournitures scientifiquesSharpie pointe fineécrire le numéro d’échantillon sur la bande
5 culture de

Références

  1. Gonzalez Garcia, G., Onco, M. A. P., Susan, V. R. Review. Biology and systematics of the form genus Rhizoctonia. Spanish Journal of Agricultural Research. 4 (1), 55-79 (2006).
  2. Bonanomi, G., Antignani, V., Pane, C., Scala, E. Suppression of soilborne ....

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Réimpressions et autorisations

Mots-clés

Rhizoctonia solanibioessai sur compostagents pathog nes telluriquesinhibition de la croissance fongiqueg lose l eaug lose pomme de terre dextrosesegments d hypocotyletechnique aseptique