L’incitation et l’évaluation d’un modèle murin de la myopie expérimentale

Résumé

Dans ce protocole, nous décrivons le processus complet de lunettes de vue myopie expérimentale chez la souris à l’aide de l’incitation nouvellement conçue et la technique nécessaire pour la réalisation des résultats stables et reproductibles dans la mesure des paramètres oculaire.

Résumé

Modèle murin de la myopie peut être un outil puissant pour la recherche de la myopie à cause de la manipulation génétique relativement facile. Une façon d’inciter la myopie chez les animaux est de mettre clairement moins les verres devant les yeux pendant des semaines (induite par la lentille myope, LIM). Cependant, les protocoles existants d’incitation et d’évaluation varient d’un laboratoire à. Ici, nous avons décrit une méthode très pratique et reproductible pour induire des lunettes LIM chez la souris à l’aide nouvellement conçu. Les correctifs de méthode permet à la lentille stablement en face de l’oeil de la souris tout en la lentille à être enlevé pour le nettoyage ou topique drug administration. Le phénotype est robuste et efficace, et la variance est faible. La méthode décrite ici peut être appliquée à des souris juste après le sevrage qui prolonge la durée possible des expériences. Nous avons également donné technique conseille d’obtenir des résultats reproductibles en réfraction et mesure la longueur axiale. Nous espérons que le protocole étape par étape décrit ici et l’article détaillé peut aider les chercheurs à réaliser des expériences de myopie avec une myopie plus fluide et rendre les données comparables dans l’ensemble de laboratoires.

Introduction

La prévalence de la myopie a considérablement augmenté récemment, alors que le mécanisme de son apparition et la progression sont encore largement inconnu¹. Le phénotype le plus caractéristique de la myopie est l’allongement de la longueur axiale (AL), ce qui augmente le risque de complications rétiniennes ou même cécité². Pour mieux comprendre la pathogénie de la myopie et de développer des traitements efficaces, des modèles animaux robustes et myopes et évaluation de phénotype stable sont nécessaires.

En bref, deux méthodes existent pour induire des États myopes chez les animaux : forme-priv....

Protocole

Toutes les procédures ont été approuvées par le Comité d’éthique sur la recherche d’Animal de la Keio University School of Medicine ont adhéré à la déclaration de l’ARVO pour l’utilisation des animaux en ophtalmique et Vision Research, les lignes directrices sur l’expérimentation animale à Keio L’université et la recherche de l’Animal : Reporting de In Vivo des expériences (arrivée) lignes directrices pour l’utilisation des animaux en recherche.

1. assembler les lunettes pour les souris

1. Préparer les pièces nécessaires pour assembler les lunettes (Figure 1 a). Pour chaque souris, préparer tous les élém....

Résultats

At a tout d’abord, vérifiez si toutes les pièces nécessaires sont préparés (Figure 1 a). Un exemple d’un morceau de lunettes assemblés est illustré dans la Figure 1 b. À l’exception de la partie principale des cadres et l’écrou, toutes les autres pièces sont jetables pour chaque souris. Un ensemble de lunettes dûment remplis est montré dans la Figure 1C. Changer l’angle entre les deux images pour s’a.......

Discussion

Pour s’assurer que les lunettes à fixer solidement sur la tête de la souris, plusieurs étapes dans le présent protocole doivent être accordé une grande attention. Le périoste doit être retiré complètement avant d’utiliser le système adhésif dentaire. Le sang sur le crâne doivent également être nettoyé avec soin. Un peu fine tuning est acceptable tout de suite après l’application de l’adhésif, ne déplacez pas le bâton fréquemment avant le système adhésif sèche vers le haut. Suivez les instructions du système adhésif avec .......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
vis	NBK	SNZS-M1.4-10
rondelle	MonotaRO	42166397
écrou	MonotaRO	42214243
bâton	DMM Make	none	conçu par authers et sorti par l’imprimante 3D louée chez DMM Make.
cadre	DMM Make	aucun	conçu par authers et produit par l’imprimante 3D louée chez DMM Make.
lentilles	LENTILLE DE CONTACT ARC-EN-CIEL	aucune	personnalisée pour les souris utilisation par la société
colle cyanoacrylate	OK MODEL	MP 20g
adhésif dentaire résine ciment	SUN MEDICAL	super bond	contient le liquide de gravure utilisé pour enlever le périoste du crâne de souris
photoréfracteur infrarouge	Steinbeis Centre de transfert	aucun	conçu et offert par le Dr Frank Schaeffel de l’université de Tü ; bingen
Domaine spectral OCT	Leica	R4310
Tropicamide, solution de chlorhydrate de pényléphrine	Santen	Mydrin-P
midazolam	Sandoz K.K.	Composants SANDOZ	pour l’anesthésique
médétomidine  ;	Orion Corporation	Domitor	composants pour l’anesthésique
tartrate de butorphanol  ;	Meiji Seika Pharma	Vetorphale	composants pour l’anesthésique
hyaluronate de sodium purifié à 0,1 %	Santen	Hyalein
atipamezole chlorhydrate	Zenoaq	antisedan