Après avoir vérifié par sang-oxygène-dépendante du niveau fonctionnel de l’imagerie par résonance magnétique (IRMf BOLD) que la superficie correspondante de cortex champ de baril somatosensoriel (appelée S1BF) est bien activée, le principal objectif de cette étude est de quantifier la teneur en lactates fluctuations dans le cerveau de rat activés par spectroscopie de résonance magnétique de proton localisé (1H-MRS) à 7 T.
Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.
Article de méthode
La spectroscopie par résonance magnétique fonctionnelle à 7 T dans le Cortex de baril de Rat pendant l’Activation de Whisker
Dans cet article
Résumé
Résumé
Spectroscopie de résonance magnétique nucléaire (RMN) offre la possibilité de mesurer le métabolite cérébral contenu in vivo et non invasive. Grâce aux développements technologiques au cours de la dernière décennie et l’augmentation de l’intensité du champ magnétique, il est maintenant possible d’obtenir bonne résolution spectres in vivo dans le cerveau de rat. Neuroenergetics (c'est-à-dire, l’étude du métabolisme cérébral) et, surtout, les interactions métaboliques entre les différents types de cellules ont suscité un intérêt de plus en plus ces dernières années. Parmi ces interactions métaboliques, l’existence d’une navette de lactate entre les neurones et les astrocytes est encore discutée. Il est, donc, d’un grand intérêt à effectuer la spectroscopie de résonance magnétique de proton fonctionnelle (1H-MRS) dans un modèle de rat de lactate de moniteur et d’activation cérébrale. Toutefois, le pic de lactate de méthyle chevauche les pointes de résonance des lipides et est difficile à quantifier. Le protocole décrit ci-dessous permet métabolique et les fluctuations à surveiller dans une zone du cerveau activées du lactate. Activation cérébrale est obtenue par la stimulation de la moustache et 1H-MRS est exécuté dans le cortex de baril activés correspondantes, dont la superficie est détectée à l’aide de l’oxygène-sang-dépendante du niveau fonctionnel résonance magnétique (IRMf BOLD). Toutes les étapes sont décrites en détail : le choix des anesthésiques, bobines et séquences, réaliser une stimulation efficace whisker directement dans l’aimant et le traitement des données.
Introduction
Le cerveau possède des mécanismes intrinsèques qui permettent la régulation de son principal substrat (c.-à-d., glucose), tant pour sa contribution et son utilisation, selon les variations de l’activité cérébrale locale. Bien que le glucose est le substrat de l’énergie principale pour le cerveau, les expériences réalisées ces dernières années ont montré que lactate, qui est produite par les astrocytes, pourrait être un substrat d’efficacité énergétique pour les neurones. Cela soulève l’hypothèse d’une navette de lactate entre les neurones et les astrocytes1. Connu comme ANLS, astrocyte-neurone lactate navette2, ....
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Protocole
Toutes les procédures d’animaux ont été effectuées conformément aux directives expérimentation animale européenne communautés la directive du Conseil du 24 novembre 1986 (86/609/CEE). Le protocole a rencontré les directives éthiques du Ministère Français de l’Agriculture et des forêts et a été approuvé par les comités d’éthique locaux (Comité d « éthique versez L » expérimentation Animale Bordeaux n ° 50112090-A).
NOTE : Lors de la mesure de Monsieur, un niveau adéquat d’anesthésie et en surveillance physiologique (température corporelle, la fréquence respiratoire) sont des exigences indispensables.
1. les animaux<....
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Résultats
Ce protocole permet la quantification des fluctuations de métabolite lors de l’activation cérébrale, qui est obtenue par la stimulation de la moustache droite directement dans l’aimant.
Dans cette étude, l’objectif global de l’IRMf BOLD était de vérifier que la stimulation de la moustache était efficace, pour visualiser la zone de S1BF activée et localiser correctement le voxel pour 1H-rapports de gestion financière. .......
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Discussion
Le cortex de baril, également appelé S1BF pour le cortex somatosensoriel ou champ de canon, est une région au sein de la couche corticale IV que l'on peut observer à l’aide de la cytochrome c oxydase coloration9, et son organisation est bien connue car elle a été largement décrit 10,11. Un vibrissa est connecté à un tonneau, dans lequel environ 19 000 neurones sont organisés en une colonne12. La voie de moustaches-a.......
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Déclarations de divulgation
Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Remerciements
Ce travail a été soutenu par l’octroi de LabEx TRAIL, référence ANR-10-LABX-57 et un Français-Swiss ANR-FNS accorde référence ANR-15-CE37-0012. Les auteurs remercient Aurélien Trotier pour son soutien technique.
....Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Seringue de 0,5 ml avec aiguille | Becton, Dickinson and Company, États-Unis | 2020-10 | 0,33 mm (29 G) x 12,7 mm |
| 1H spectroscopie de surface | Bruker, Ettlingen, Allemagne | T116344 | |
| 7T Bruker Biospec system | Bruker, Ettlingen, Allemagne | 70/20 USR | |
| Dispositif à impulsions basé sur Arduino Uno | fabriqué | ||
| sur mesureAtipamézole | Vé ; toquinol, S.A., France | V8335602 | Antisédan, 4,28 mg |
| Masque respiratoire | sur | ||
| Pommade pour les yeux | TVM laboratoire, France | 40365 | Gel Ocry 10 g |
| Chambre d’induction | sur | 30x17x15 cm | |
| Tuyau flexible d’entrée | Gardena, Allemagne | 1348-20 | Diamètre 4,6 mm, 3m de long |
| Pompe Isoflurane, Vaporisateur modèle 100, classique T3 | Surgivet, Harvard Apparatus | WWV90TT | à partir de OH 43017, U.S.A |
| Isoflurane, liquide pour inhalation | Vertflurane, Virbac, France | QN01AB06 | 1000 mg/mL |
| Pousse-seringue KD Scientific | KD sientific, Holliston, USA | Legato 110 | |
| LCModel software LCModel | Inc., Ontario, Canada | 6.2 | |
| Chlorhydrate de médétomidine | Vé ; toquinol, S.A., France | QN05CM91 | Domitor, 1 mg/mL |
| Rouleau de micropores de pansement | 3M micropore, Minnesota, États-Unis | MI912 | |
| Rouleau de micropores de plâtre | adhésif 3M micropore, Minnesota, États-Unis | MI925 | |
| Système de surveillance des paramètres physiologiques | SA Instruments, Inc, Stony Brook, NY, États-Unis | Modèle 1025 | |
| NaCl | Fresenius Kabi, Allemagne | B05XA03 | 0,9 % 250 mL |
| Tuyau flexible de sortie | Gardena, Allemagne | 1348-20 | Diamètre 4,6 mm, 4 m de long |
| Logiciel Paravision | Bruker, Ettlingen, Allemagne | 6.0.1 | |
| Cathéter intraveineux périphérique | Terumo, Shibuya, Tokyo, Japon | SP500930S | 22 G x 1", 0,85 x 25 mm, 35 mL/min |
| Bobine de tête de rat | Bruker, Ettlingen, Allemagne | ||
| Héparine sodique, solution injectable | Choai, Sanofi, Paris, France | B01AB01 | 5000 UI/mL |
| Électrovannes de régulation, piston piston 2/2 voies à action directe | Burkert, Allemagne | 3099939 | Type de modèle 6013 |
| Terumo 2 ml seringue | Terumo, Shibuya, Tokyo, Japon | SY243 | avec aiguille 21 g x 5/8 |
| Terumo Seringue 5 mL | Terumo, Shibuya, Tokyo, Japon | 05SE1 | |
| Wistar RJ-Han rats | Janvier Laboratories, France |
Références
- Pellerin, L., et al. Activity-dependent regulation of energy metabolism by astrocytes: an update. Glia. 55, 1251-1262 (2007).
- Pellerin, L., Magistretti, P. J.
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Réimpressions et autorisations
