Moyen-throughput Screening tests pour l’évaluation des effets sur Ca2 +-signalisation et Acrosome Reaction en sperme humain

Anders Rehfeld; Dorte Louise Egeberg Palme; Kristian Almstrup; Anders Juul; Niels Erik Skakkebaek

doi:10.3791/59212

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Article de méthode

Moyen-throughput Screening tests pour l’évaluation des effets sur Ca^{2 +}-signalisation et Acrosome Reaction en sperme humain

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DOI :

10.3791/59212

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1 mars 2019

Anders Rehfeld¹^,² , Dorte Louise Egeberg Palme¹^,² , Kristian Almstrup¹^,² , Anders Juul¹^,² , Niels Erik Skakkebaek¹^,²

¹Department of Growth and Reproduction, Copenhagen University Hospital, ²International Center for Research and Research Training in Endocrine Disruption of Male Reproduction and Child Health (EDMaRC), University of Copenhagen

Dans cet article

Résumé

Ici, deux essais de débit moyen pour l’évaluation des effets sur Ca^{2 +}-réaction de signalisation et de l’acrosome dans le sperme humain sont décrites. Ces tests peuvent servir à l’écran rapidement et facilement de grandes quantités de composés aux effets sur la Ca^{2 +}-réaction de signalisation et de l’acrosome dans le sperme humain.

Résumé

Ca^{2 +}-signalisation est essentielle à la fonction normale des cellules de sperme et la fertilité masculine. De même, la réaction de l’acrosome est vitale pour la capacité d’une cellule de sperme humaine à pénétrer dans la zone pellucide et féconder l’ovule. Il est donc très intéressant pour tester des composés (par exemple, les produits chimiques environnementaux ou candidats-médicaments) pour leur effet sur Ca^{2 +}-réaction de signalisation et de l’acrosome dans le sperme humain soit à examiner les effets négatifs potentiels sur la fonction des cellules de sperme humain ou d’enquêter sur un possible rôle comme contraceptif. Ici, deux essais de débit moyen sont décrits : 1) un essai pour l’évaluation des effets sur Ca^{2 +}fluorescence-signalisation dans le sperme humain et 2) un dosage de cytométrie en image pour évaluation de la réaction de l’acrosome dans le sperme humain. Ces tests peuvent être utilisés pour dépister un grand nombre de composés aux effets sur la Ca^{2 +}-réaction de signalisation et de l’acrosome dans le sperme humain. En outre, les dosages peuvent être utilisés pour générer des courbes dose-réponse très spécifique des composés individuels, déterminer l’additivité/synergie potentielle pour plusieurs composés et d’étudier le mode pharmacologique d’action par l’intermédiaire de l’inhibition compétitive expériences avec des inhibiteurs de la revendication.

Introduction

Les deux essais décrits ici vise à étudier les effets sur Ca^{2 +}-réaction de signalisation et de l’acrosome dans le sperme humain, comme l’a montré pour plusieurs composés dans plusieurs publications qui emploient ces dosages¹^,²^, ³^,⁴^,⁵^,⁶^,⁷. Ca^{2 +}-signalisation et la réaction de l’acrosome sont fonction des cellules de sperme humain vital à la normale et la fertilité masculine.

L’objectif g....