Décrit ici est l'utilisation de plusieurs outils faits maison pour transférer, refroidir et tuer d'adultes Drosophila, ainsi que pour nettoyer les flacons de culture du verre et de recueillir des œufs. Ces outils sont faciles à fabriquer et sont plutôt efficaces dans la manipulation de La Drosophila.
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Article de méthode
Outils faits maison simples pour manipuler les mouches des fruits—Drosophila melanogaster
Dans cet article
Résumé
Résumé
La mouche des fruits, Drosophila melanogaster, est largement utilisé à la fois dans la recherche biologique et l'éducation en biologie. La manipulation des mouches adultes est courante, mais difficile dans la pratique, car les mouches adultes volent. Démontré ici est de savoir comment faire quelques outils simples et rentables pour répondre à des questions difficiles dans le traitement de Drosophila. Des trous dans les bouchons de mousse sont faits et des bouts de pipette ou des entonnoirs sont insérés dans les trous. Les mouches se déplacent alors seulement dans une direction dans l'assemblage de pointe de pipette/funnel, permettant le contrôle efficace du transfert de Drosophila adulte dans ou hors d'une fiole. Les protocoles existants ont été modifiés pour les mouches d'anesthésie fraîche en se refroidissant dans la glace concassée et en les transférant sur une surface froide et dure. Le banquise est recouvert d'un morceau de gaze médicale qui maintient les mouches immobilisées de l'eau condensée lorsqu'elles sont examinées au microscope stéréomicroscope. Les mouches sont finalement euthanasiées pour le comptage et le tri ou jetées par micro-ondes. Une cage en forme de bouteille a également été développée pour la collecte des œufs, ainsi qu'un dispositif d'économie de main-d'œuvre et un protocole d'accompagnement pour le nettoyage des flacons de culture du verre.
Introduction
La mouche des fruits, Drosophila melanogaster, est un organisme modèle largement utilisé dans la recherche biologique et l'éducation en biologie pour étudier un large éventail de sujets1,2. Les problèmes de base de la manipulation de Drosophila sont le transfert des adultes de flacon à flacon et l'immobilisation des mouches afin qu'ils soient plus faciles à manipuler, comme tous les adultes (sauf pour certains mutants3,4) peuvent voler.
Traditionnellement, un chercheur transfère les mouches d'une fiole à l'....
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Protocole
1. Préparation d'outils et d'accessoires
- Arrêts tip/funnel
- Obtenir deux bouchons d'éponge (le diamètre des bouchons doit être légèrement plus grand que le diamètre interne des flacons utilisés pour transférer les mouches). Faire un trou dans les centres des bouchons d'éponge avec un fer à souder électrique chauffé.
- Obtenir deux pointes de pipette de 1 ml, couper une en deux transversalement avec un couteau pointu, et jeter l'extrémité pointue. Ensuite, couper 1,5 cm de l'extrémité pointue de la deuxième pointe de pipette. Coller les restes des deux pointes de pipette avec un adhésif tout usage pour faire une pointe allon....
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Résultats
Les T- et F-stoppers ont été développés comme un ensemble d'outils simples qui peuvent être adaptés et utilisés dans toutes les activités de transfert de mouche. Transférer les mouches d'une ancienne culture à plusieurs cultures fraîches implique d'enlever les bouchons des flacons frais, de les remplacer par des bouchons F, puis de tapoter les mouches dans l'ancienne fiole, de retirer rapidement sa prise et de la remplacer par un bouchon En T. Si l'ancien aliment est compact, alors il est.......
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Discussion
Certains outils faits maison pour la manipulation des activités de base impliquées dans l'élevage et l'expérimentation d'origine d'origine d'origine d'origine d'origine sont décrits dans cet article. Ces outils sont simples mais plutôt efficaces. Pratiquement, n'importe quel laboratoire peut fabriquer ces outils facilement, et un laboratoire de recherche ou un laboratoire d'enseignement n'a pas besoin de trouver une alternative prête à l'emploi qui n'est peut-être pas disponible localement.
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Déclarations de divulgation
L'auteur n'a rien à divulguer.
Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Une paire de pinces | |||
| Perceuse-visseuse | vitesse max : 500 tr/min | ||
| Fer | |||
| Lime | |||
| Entonnoir | diamètre du disque< | ||
| Glacière | |||
| Épingles | |||
| Thermomètre | HCIYET HT-830 | ||
| Gants | |||
| Crayons mécaniques Gaze | |||
| microcentrifugation | 100 ul | ||
| Four à micro-ondes | |||
| Parafilm | |||
| Peri dish | diamètre intérieur 60 mm | ||
| Pointes | 1 ml | ||
| Film | |||
| Peri dish | &Phi ; 36 mm utilisé pour couvrir le flacon vide | ||
| Pince à épiler | |||
| Gants | |||
| Blocs | 26,5& fois ; 14.5&fois ; 2,5 cm ou plus | ||
| d’air en caoutchouc | |||
| Coupe-pression | |||
| Bouteille de | 500 ml, diamètre intérieur env. 65 mm | ||
| Bouchon éponge | |||
| Éponges en acier inoxydable Brosse | |||
| tubulaire | |||
| Vial | & Phi; 34 mm & temps ; 90 millimètre |
Références
- Jennings, B. H. Drosophila – a versatile model in biology & medicine. Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).
- JoVE Science Education Database. Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. An Introduction to Drosophila melanogaster. , JoVE. Cambridge, MA. (2018).
- Ashburner....
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Réimpressions et autorisations
