Un modèle de souris de transplantation de rate Hétérootopique vascularisée pour étudier la biologie cellulaire de la rate et l’immunité aux greffes

Jiao-Jing Wang; Longhui Qiu; Ramiro Fernandez; Xin Yi Yeap; Charlie  Xiaoying Lin; Zheng  Jenny Zhang

doi:10.3791/59616

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Article de méthode

Un modèle de souris de transplantation de rate Hétérootopique vascularisée pour étudier la biologie cellulaire de la rate et l’immunité aux greffes

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DOI :

10.3791/59616

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11 juin 2019

Jiao-Jing Wang^*¹ , Longhui Qiu^*¹ , Ramiro Fernandez² , Xin Yi Yeap¹ , Charlie Xiaoying Lin³ , Zheng Jenny Zhang¹^,²

¹Comprehensive Transplant Center, Northwestern University, ²Department of surgery, Feinberg School of Medicine, Northwestern University, ³Weinberg art and science college, Northwestern University

^* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Ce protocole détaille les étapes chirurgicales d’un modèle de souris de transplantation hétérotopique vascularisée de la rate, un modèle techniquement stimulant qui peut servir d’outil puissant dans l’étude du sort et de la longévité des cellules de la rate, les mécanismes de la rate distincte populations cellulaires dans la progression de la maladie et l’immunité aux greffes.

Résumé

La rate est un organe lymphoïde unique qui joue un rôle crucial dans l’homéostasie des systèmes immunitaires et hématopoïétiques. Les patients qui ont subi une splénectomie, quelles que soient les causes précipitantes, sont enclins à développer une infection post-splénectomie écrasante et éprouvent des risques accrus de thrombose veineuse profonde et de tumeurs malignes. Récemment, des études épidémiologiques ont indiqué que la splénectomie pourrait être associée à l’apparition de maladies cardiovasculaires, suggérant que les fonctions physiologiques de la rate n’ont pas encore été pleinement reconnues. Ici, nous introduisons un modèle de souris de transplantation de rate hétérootopique vascularisée, qui non seulement peut être utilisé pour étudier la fonction et l’activité comportementale des sous-ensembles de cellules immunitaires spléniques dans différents processus biologiques, mais peut également être un outil puissant pour tester le potentiel thérapeutique de la transplantation de la rate dans certaines maladies. Les principales étapes chirurgicales de ce modèle comprennent la récolte de la rate des donneurs, l’élimination de la rate indigène du receveur et la revascularisation de la greffe de la rate. En utilisant des souches de souris congéniques (p. ex., des souris ayant des antécédents de CD 45,1/CD 45,2), nous avons observé qu’après une transplantation syngénique, les lymphocytes spléniques dérivés des donneurs et les cellules myéloïdes ont migré hors de la greffe dès le jour post-opératoire 1, en concomitance avec l’afflux de plusieurs types de cellules réceptrice, générant ainsi une chimère unique. Malgré des techniques relativement difficiles, cette procédure peut être réalisée avec > taux de réussite de 90%. Ce modèle permet de suivre le destin, la longévité et la fonction des splénocytes pendant l’état d’équilibre et dans un contexte de maladie après une transplantation de la rate, offrant ainsi une excellente occasion de découvrir le rôle distinct des cellules immunitaires dérivées de la rate dans différents processus de la maladie.

Introduction

La rate est le plus grand organe lymphoïde secondaire dans le corps et est critique dans les systèmes immunitaires et hématopoïétiques. Ses fonctions sont principalement réalisées par deux compartiments morphologiquement distincts, la pulpe rouge et la pulpe blanche¹. La pulpe rouge est un trabéculum tridimensionnel de sinus veineux et de cordons spléniques constitués de fibres réticulaires, de cellules réticulaires et de macrophages associés. Cette structure unique permet à la pulpe rouge d’agir comme un filtre sanguin efficace qui élimine les matières étrangères et les érythrocytes anciens ou endommagés. La pulpe blanche comprend les follicul....