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Article de méthode

Rat automatisé Single-Pellet Atteindre avec la reconstruction en 3 dimensions des trajectoires de patte et de chiffres

14.1K vues

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DOI :

10.3791/59979

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10 juillet 2019

Dans cet article

Résumé

L'atteinte habile de rongeur est couramment employée pour étudier des qualifications habiles, mais exige le temps et l'effort significatifs pour mettre en œuvre la tâche et analyser le comportement. Nous décrivons une version automatisée de l'atteinte habile avec le suivi de mouvement et la reconstruction tridimensionnelle des trajectoires de portée.

Résumé

L'atteinte habile de rongeur est couramment employée pour étudier des qualifications habiles, mais exige le temps et l'effort significatifs pour mettre en œuvre la tâche et analyser le comportement. Plusieurs versions automatisées de la portée qualifiée ont été développées récemment. Ici, nous décrivons une version qui présente automatiquement des granulés aux rats tout en enregistrant la vidéo haute définition sous plusieurs angles à des taux d'images élevés (300 fps). La patte et les chiffres individuels sont suivis avec DeepLabCut, un algorithme d'apprentissage automatique pour l'estimation de pose sans marqueur. Ce système peut également être synchronisé avec des enregistrements physiologiques, ou être utilisé pour déclencher des interventions physiologiques (par exemple, stimulation électrique ou optique).

Introduction

Les humains dépendent fortement de l'habileté habile, définie comme des mouvements qui nécessitent des mouvements multi-joints et numériques coordonnés avec précision. Ces compétences sont affectées par une gamme de pathologies courantes du système nerveux central, y compris les lésions structurelles (p. ex., accident vasculaire cérébral, tumeur, lésions démyélinisés), les maladies neurodégénératives (p. ex. la maladie de Parkinson) et les anomalies fonctionnelles du moteur. circuits (p. ex. dystonie). Comprendre comment les compétences habiles sont apprises et mises en œuvre par les circuits moteurs centraux a donc le potentiel d'améliorer la qualité de vie d'une gra....

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Protocole

Toutes les méthodes d'utilisation des animaux décrites ici ont été approuvées par le Comité institutionnel de soins et d'utilisation des animaux (IACUC) de l'Université du Michigan.

1. Mise en place de la chambre d'atteindre

REMARQUE: Voir Ellens et coll.14 pour plus de détails et de diagrammes de l'appareil. Les numéros de pièce se réfèrent à la figure 1.

  1. Attachez des panneaux de polycarbonate transparents avec du ciment acrylique pour construire la chambre d'atteinte (15 cm de large sur 40 cm de long sur 40 cm de hauteur) (partie #....

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Résultats

Les rats acquièrent rapidement la tâche d'atteinte habile une fois acclimaté à l'appareil, avec un plafonnement des performances en termes de nombre s'étend et de précision sur une semaine et demie (figure5). La figure 6 montre des images vidéo indiquant des structures identifiées par DeepLabCut, et la figure 7 montre des trajectoires de portée individuelles superposées à partir d'une seule session. Enfin, dans .......

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Discussion

L'atteinte de la main de rongeur habile est devenue un outil standard pour étudier la physiologie et la pathophysiologie de système moteur. Nous avons décrit comment mettre en œuvre une tâche automatisée rat habile atteindre qui permet: la formation et les tests avec une supervision minimale, 3-D patte et la reconstruction de trajectoire numérique (pendant l'atteinte, la saisie et la rétraction des pattes), l'identification en temps réel de la patte pendant l'atteinte, et la synchronisation avec l'électronique externe. I.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n'ont rien à révéler.

Remerciements

Les auteurs aimeraient remercier Karunesh Ganguly et son laboratoire pour leurs conseils sur la tâche d'atteinte, ainsi qu'Alexander et Mackenzie Mathis pour leur aide dans l'adaptation de DeepLabCut. Ce travail a été soutenu par le National Institute of Neurological Disease and Stroke (numéro de subvention K08-NS072183) et l'Université du Michigan.

....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
panneaux en polycarbonate transparentTAP Plastiquescoupés sur commande (voir design de l’encadré)
source/détecteur infrarougeMed AssociatesENV-253SDCaméra de la gamme 30 »
BasleracA2000-340kc2046 x 1086 CMV2000 340 fps Objectif de la caméra Color Camera Link
Megapixel (computar)M0814-MP22/3 » 8mm f1.4 avec verrouillage Iris &
Câbles de caméraBasler#2000031083Cable PoCL Camera Link SDR/MDR Full, 5 m - Data Cables
mirrorsAmazon
actuator ConcentricsLACT6PLinear Actuator 6 » Stroke (nominale), 110 Lb Force, 12 VDC, avec potentiomètre
réservoir à granulés/entonnoirAmico (Amazon)a12073000ux08906 » funnel
de guidageePlasticsACREXT.500X.2501/2 » OD x 1/4 » ID Transparent. Tube acrylique en plexiglas extrudé x tige
de livraison de granulésePlasticsACRCAR.2500.250 " DIA. Tige en acrylique coulé (longueur 2')
connecteur en T en plastiqueÉtats-Unis Plastic Corp#620653/8 « x 3/8 » x 3/8 « Tuyau ID Noir HDPE Tee
LED lumièresÉclairage EVER4100066-DW-FBande lumineuse LED étanche flexible 12V, ruban LED, blanc lumière du jour, super lumineux 300 unités 5050 LEDS, 16,4 pieds 5 m bobine
support ePlasticsACTLNAT0.125X12X360,125 « x 12 » x 36 « Feuille d’acétal naturel
Feuilles de lumière diffuseur filmsinventables23114-01.007x8,5x11 », armoire mate deux côtés
et matériaux de cadrepersonnalisés divers (Home Depot, etc.)Panneau de fibres de 3/4 po (voir le protocole pour les dimensions de chaque structure)
mousse acoustiqueAcoustic FirstFireFlex Wedge Mousse acoustique (2 po d’épaisseur)
ventilateursCooler Master (Amazon)B002R9RBO0Rifle Bearing 80mm Ventilateur de refroidissement silencieux pour boîtiers d’ordinateur et refroidisseurs de processeur
Charnières de porte d’armoireEverbilt (Home Depot#14609charnière en acier continue (1.4« x 48 »)
roues d’armoireEverbilt (Home Depot#49509Roulette pivotante en caoutchouc souple avec capacité de charge de 90 lb et frein latéral
de porte d’armoireEverbilt (Home Depot#15094Poignée de porte à usage léger blanc (4.5 »)
ordinateurHewlett PackardZ620HP Z620 Station de travail de bureau
Lien de caméra Frame GrabberNational Instruments#781585-01PCIe-1473 Virtex-5 LX50 Camera Link -
Carte RIO multifonctionNational Instruments#781100-01PCIe-17841R
Câble de carte RIO analogiqueNational InstrumentsSCH68M-68F-RMIOCâble multifonction
numérique RIO CâbleInstruments#191667-01SHC68-68-RDIO Câble numérique pour
bloc de connexion analogiqueNational Instruments#782536-01SCB-68A Bloc de connecteur d’E/S blindé contre le bruit,
bloc de connexion numériqueNational Instruments#782536-01SCB-68A Bloc de connecteur d’E/S blindé contre le bruit,
rack de relais à 24 positionsMeasurement Computing Corp.SSR-RACK24Fond de panier de relais statique (relais de type Gordos/OPTO-22), commutateur DC 24 voies
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Alimentation CCBK Precision1671Aà triple sortie 30 V, 5 A Alimentation CC à affichage numérique Granulés de
sucreBio ServF0023Granulés de précision sans poussière, 45 mg, saccharose (non aromatisé)
LabVIEWNational InstrumentsLabVIEW 2014 SP1, versions64 et 32 bitsLabVIEW 64 bits est nécessaire pour accéder à suffisamment de mémoire pour diffuser des vidéos, mais le codage FPGA doit être effectué en LabVIEW 32 bits
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Références

  1. Chen, J., et al. An automated behavioral apparatus to combine parameterized reaching and grasping movements in 3D space. Journal of Neuroscience Methods. , (2018).
  2. Sacrey, L. A. R. A., Alaverdashvili, M., Whishaw, I. Q.

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Réimpressions et autorisations

Étiquettes

Atteinte automatisée chez le ratsuivi 3D de la patteestimation de la pose par DeepLabCutenregistrement vidéo à haute vitessetâche d'atteinte qualifiéesystème de distribution de granulesétalonnage du seuil de la ROIanalyse cinématique du membre antérieursynchronisation des enregistrements physiologiquessuivi du mouvement sans marqueur