Ici nous décrivons une nouvelle méthode de détecter l’établissement réussi de la circulation sanguine partagée de deux parabionts par une injection caudale de veine de glucose, qui cause des dommages minimaux et n’est pas mortelle aux parabionts.
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Article de méthode
Détection de l’établissement de l’approvisionnement en sang partagé dans les souris parabiotiques par injection de glucose de veine caudale
Dans cet article
Résumé
Résumé
La parabiose est une méthode expérimentale pour combiner chirurgicalement deux animaux parallèles le long de l’axe longitudinal du corps. Nous présentons un protocole pour détecter l’établissement réussi du chimerism de sang dans les parabionts par une injection caudale de veine de glucose. Des souris parabiotiques ont été construites. Le glucose a été injecté dans la souris de distributeur par la veine de queue, et la fluctuation du niveau de glucose sanguin a été mesurée dans les deux souris utilisant un glucomètre de sang à différents points de temps. Nos résultats ont prouvé qu’après injection de glucose, le niveau de glucose sanguin dans les souris de distributeur a augmenté brusquement après 1 min et a diminué lentement par la suite. Pendant ce temps, le taux de glucose sanguin des souris receveuses a atteint un sommet de 15 min après l’injection. Des résultats similaires ont été obtenus avec Evans bleu, utilisé comme un contrôle positif pour le glucose. La fluctuation synchrone des niveaux de glucose sanguin indique que le flux sanguin entre les deux souris a été établi avec succès.
Introduction
La parabiose est une méthode de modélisation dans laquelle deux organismes vivants sont réunis chirurgicalement et se développent comme un système physiologique unique avec un système circulatoire partagé1. Ces modèles ont été largement utilisés pour étudier la physiologie en raison de l’avantage que les substances produites par un seul individu peuvent agir sur les deux animaux en même temps via le système circulatoire partagé. Depuis le milieu des années 1800, lorsque les expériences parabiotiques ont été lancées par Paul Bert2, les méthodes de construction de modèles parabiotiques sont devenues standardisées. Cependan....
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Protocole
Toutes les procédures impliquant les animaux et leurs soins ont été approuvées par le Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux de l’Université médicale Harbin.
REMARQUE : Les outils et l’équipement requis pour la méthode sont énumérés dans le Tableau des matériaux.
1. Préparation des matériaux et des animaux
- Commandez des souris mâles C57BL/6 dont le poids se siédesde entre 20 g et 25 g auprès d’un fournisseur d’animaux de laboratoire standard.
- Loger les souris dans un cycle de 12 h de lumière : 12 h d’obscurité à 24 à 26 oC avec un accès ad libitum à l’eau ....
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Résultats
Chez six souris donneuses, le taux de glucose sanguin a fortement augmenté pour atteindre 26,5 'mol/L (augmentation de 173 %) à une moyenne de 1 min après l’injection de 100 l de glucose (1,2 g/kg) dans la veine de la queue, puis a diminué graduellement à 13,3 'mol/L à 60 min. Chez les souris receveuses, la glycémie augmentait lentement après l’injection et atteignait le premier niveau de pointe à 15 min (augmentation de 47 %, 12,2 'mol/L). Sur la base des résultats ci-dessus, la norme po.......
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Discussion
Parabiose se réfère à la technique chirurgicale de connecter deux animaux vivants pour établir un système vasculaire commun par des moyens expérimentaux6,7,8. L’avantage de ce modèle est que les substances produites par un seul individu peuvent agir sur les deux animaux en même temps. Ainsi, le modèle de parabiose peut être utilisé pour explorer le rôle d’une substance ou d’un facteur dans une maladie connexe, produisant de nomb.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs n’ont rien à révéler.
Remerciements
Ce travail a été soutenu par la National Nature Science Foundation of China (81570399 et 81773735), le National Key Research and Development Program of China - Traditional Chinese Medicine Modernization Research project (2017YFC1702003), et Hei Long Jiang Fonds scientifique pour la jeunesse exceptionnel (JC2017020).
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| pince incurvée | JZ instruments chirurgicaux, Chine | J31340 | |
| ciseaux fins | JZ instruments chirurgicaux, Chine | WA1030 | |
| pince à aiguille | JZ instruments chirurgicaux, Chine | 60017961 | |
| seringues de 2,5 mL | Agilent, États-Unis | 5182-9642 | |
| Tribromoethano | Sigma-Aldrich, États-Unis | T48402-5G | |
| pénicilline | Solarbio, Chine | IP0150 | |
| tramadol | Yijishiye, Chine | YJT712520 | |
| glucomètre | Roche Diabetes Care, Indiana | Accu-Chek Active bandelettes | |
| Evan’s blue Counterstain | Solarbio, Chine | G1810 | |
| crème dépilatoire | Nair, USA | LL9161 | |
| Couverture chauffante ( Coussin chauffant) | Kent Scientific Corp, États-Unis | TP-22G | |
| Rasoir électrique | Codos, Chine | CP-5000 | |
| 3-0,5-0 suture chirurgicale | Shanghai Medical Suture Needle Factory, Chine | SYZ 3-0 #, SYZ 5-0 # |
Références
- Baruch, K., et al. Aging-induced type I interferon response at the choroid plexus negatively affects brain function. Science. 346 (6205), 89-93 (2014).
- Zhang, Y., et al. Positional cloning of the mouse obese gene and its human homologue. Na....
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Réimpressions et autorisations
