Ce manuscrit décrit une méthode d’enregistrement EEG vidéo continu utilisant plusieurs électrodes de profondeur chez des souris néonatales subissant une hypoxie-ischémie.
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Article de méthode
Électroencéphalogramme vidéo continu pendant l’hypoxie-ischémie chez les souris néonatales
Dans cet article
Résumé
Résumé
L’hypoxie ischémique est la cause la plus fréquente de crises néonatales. Les modèles animaux sont essentiels pour comprendre les mécanismes et la physiologie sous-jacents aux crises néonatales et à l’ischémie de l’hypoxie. Ce manuscrit décrit une méthode de surveillance continue de l’électroencéphalogramme vidéo (EEG) chez des souris néonatales pour détecter les crises et analyser le fond de l’EEG pendant l’ischémie d’hypoxie. L’utilisation de la vidéo et de l’EEG en conjonction permet de décrire la sémiologie des crises et de confirmer les crises. Cette méthode permet également d’analyser les spectrogrammes de puissance et les tendances des modèles de fond EEG au cours de la période expérimentale. Dans ce modèle d’ischémie d’hypoxie, la méthode permet l’enregistrement EEG avant la blessure pour obtenir une base de référence normative et pendant la blessure et la récupération. Le temps total de surveillance est limité par l’incapacité de séparer les petits de la mère pendant plus de quatre heures. Bien que nous ayons utilisé un modèle de crises hypoxiques-ischémiques dans ce manuscrit, cette méthode de surveillance EEG vidéo néonatale pourrait être appliquée à divers modèles de maladies et de crises chez les rongeurs.
Introduction
L’encéphalopathie hypoxique ischémique (EIS) est une affection qui touche 1,5 nouveau-né sur 1000 chaque année et est la cause la plus fréquente de crises néonatales1,2. Les nourrissons qui survivent sont à risque de diverses déficiences neurologiques telles que la paralysie cérébrale, la déficience intellectuelle et l’épilepsie3,4,5.
Les modèles animaux jouent un rôle essentiel dans la compréhension et l’étude de la physiopathologie de l’ischémie de l’hypoxie et des crises
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Protocole
Toutes les études sur les animaux ont été approuvées par l’Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) de l’Université de Virginie.
1. Construction d’électrodes/construction de câbles
- Utilisez un fil en acier inoxydable isolé unipolaire (0,005 » de diamètre nu, revêtu de 0,008 ») pour fabriquer une électrode connectée à un connecteur de prise femelle (connecteur de prise femelle 0,079).
- Utilisez un câble spécial sur mesure pour connecter les animaux à l’amplificateur.
- Connectez un connecteur mâle à 4 broches (connecteur mâle 0,079 ») à un amplificateur opérationnel correspondant à l’impédance de gain d’un....
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Résultats
Sémiologie des crises
L’exposition à l’hypoxie-ischémie néonatale entraîne des crises généralisées et focales chez la souris (figure 1A-C). Les enregistrements EEG vidéo permettent de corréler les résultats électrographiques au comportement sur vidéo. Ces comportements ont été notés à l’aide d’un score de crise comportementale néonatale de rongeurs (BSS)16 publié précédemment. En plus de BSS, nous avons catégorisé .......
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Discussion
Nous avons présenté un modèle de surveillance vidéo-EEG continue chez des souris néonatales lors de crises hypoxiques-ischémiques. L’analyse vidéo en conjonction avec l’EEG permet de caractériser la sémiologie des crises. L’analyse de l’EEG permet l’extraction de spectrogrammes de puissance et l’analyse d’amplitude de fond.
Le placement correct et soigneux des électrodes est crucial dans ce protocole, car une blessure lors du placement de l’électrode ou un placement inexact peut affecter consi.......
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Remerciements
Nous reconnaissons les sources de financement suivantes : NIH NINDS – K08NS101122 (JB), R01NS040337 (JK), R01NS044370 (JK), University of Virginia School of Medicine (JB).
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| SURGERY | |||
| Applicateur à bille | Metrex Research | 8300-F | Applicateur i-bond |
| Cranioplast (Poudre/Résine) | Coltene | H00383 | Perm Reline/Power |
| I-Bond | Kulzer GmbH, Allemagne | ||
| LOOK Suture en soie | Spécialités chirurgicales Corporation | SP115 | LOOK SP115 Soie tressée noire Suture chirurgicale non résorbable |
| RS-5168 Botvin Forceps | Roboz Instrument chirurgical | RS5168 | Pince pour chirurgie/ligature |
| RS-5138 Graefe Forceps | Roboz Instrument chirurgical | RS5138 | Pince pour chirurgie/ligature |
| Lumière UV pour I-Bond | Blast Lite By First Media | BL778 | Lumière UV pour I-bond |
| Vannas Ciseaux | de microdissectionRoboz Instrument Chirurgical | RS5618 | Ciseaux pour ligature |
| Vet Bond | 3M Vetbond | 1469SB | Vet Glue |
| HYPOXIA | |||
| Hypoxidial | Starr Life Science | ||
| Capteur d’oxygène | Produits | MiniOxI- analyseur/capteur d’oxygène pour plate-forme d’hypoxie | |
| EEG RECORDING | |||
| Connecteur femelle 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 832-10-024-10-001000 | Commandé auprès de Digikey |
| Grass Amplifier | Natus Neurology Incorporated | Grass Produit | |
| LabChart Pro | ADI Instruments | Logiciel pour faire fonctionner le système | |
| Connecteur femelle mâle 0.079" | Mill-Max Manufacturing Corp | 833-43-024-20-001000 | Commandé auprès de Digikey |
| Operational Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2274CD TLC2274 | Quad Low-Noise Rail-to Rail Operational |
| Amplifier | Texas Instruments, Dallas, TX, USA | TLC2272ACDR TLC2274 | Quad Low-Noise Rail-to Rail Amplificateur opérationnel |
| Fil d’acier inoxydable | A-M Systems | 791400 | 0.005 » Bare/0.008 » Coated 100 ft |
| Ultra-Flexible Wire | McMaster-Carr | 9564T1 | 36 Fil de gaze de différentes couleurs |
Références
- Vasudevan, C., Levene, M. Epidemiology and aetiology of neonatal seizures. Seminars in Fetal & Neonatal Medicine. , (2013).
- Volpe, J., et al. Neonatal Seizures. Volpe's Neurology of the Newborn. , Elsevier. 275-321 (2018).
- Shankaran, S., et al.
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Réimpressions et autorisations
