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Article de méthode

Un modèle à base de capsules pour l’infestation immature des stades de tiques dures sur des souris de laboratoire

6.4K vues

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DOI :

10.3791/61430

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9 juillet 2020

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Dans cet article

Résumé

Dans cette étude, un système d’alimentation pour les stades nymphaux et larvaires de la tique dure a été développé à l’aide d’une capsule attachée à la souris de laboratoire. La capsule d’alimentation est faite à partir de matériaux flexibles et reste fermement attachée à la souris pendant au moins une semaine et permet une surveillance confortable de l’alimentation des tiques.

Résumé

Les tiques sont des parasites d’alimentation sanguine obligatoires à tous les stades de développement (à l’exception des œufs) et sont reconnues comme vecteurs de divers agents pathogènes. L’utilisation de modèles de souris dans la recherche sur les tiques est essentielle pour comprendre leurs interactions biologie et tiques-hôtes-pathogènes. Ici, nous démontrons une technique non laborieuse pour l’alimentation des stades immatures de tiques dures sur les souris de laboratoire. L’avantage de la méthode est sa simplicité, sa courte durée et sa capacité à surveiller ou à collecter des tiques à différents moments d’une expérience. En outre, la technique permet l’attachement de deux capsules individuelles sur la même souris, ce qui est bénéfique pour une variété d’expériences où deux groupes différents de tiques sont nécessaires pour se nourrir sur le même animal. La capsule non irritante et flexible est faite à partir de matériaux facilement accessibles et minimise l’inconfort des animaux expérimentaux. En outre, l’euthanasie n’est pas nécessaire, les souris récupèrent complètement après l’expérience et sont disponibles pour une réutilisation.

Introduction

Les tiques sont des vecteurs importants de plusieurs agents pathogènes et représentent un risque sérieux pour la santé animale et humaine1. La mise en place d’un système d’alimentation efficace est cruciale pour étudier leur biologie, les interactions tiques-hôte-pathogènes ou l’établissement de mesures de contrôle efficaces. Actuellement, plusieurs systèmes d’alimentation artificielle, qui évitent l’utilisation d’animaux vivants sont disponibles pour les tiques2,,3,4 et ceux-ci devraient être utilisés chaque fois que les conditions expérimentales le p....

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Protocole

Veuillez noter que ce protocole ne peut être appliqué que lorsque toutes les mesures de bien-être et de sécurité sont respectées en laboratoire. Ce protocole a reçu l’autorisation d’utiliser des souris pour l’alimentation des tiques par le Comité d’éthique des expériences animalesCometh Anses/ENVA/UPEC, Numéros de permis E 94 046 08. Pour le point d’évaluation, les animaux ont été exposés au CO2 pendant 9 min en deux phases de 4 et 5 min chacun.

1. Préparation de la capsule

  1. Coller 2 mm d’épaisseur EVA-mousse et l’adhésif double mousse collante ensemble (Figure 1A).
  2. À l’aide d’un p....

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Résultats

Nous proposons la méthode détaillée étape par étape pour nourrir les stades immatures de tiques dures dans des capsules de mousse EVA appliquées sur le dos d’une souris (figure 2). Ce protocole non laborieux convient à différents types d’expériences lorsque la surveillance et la collecte précises des tiques sont nécessaires. Les principaux avantages de cette méthode sont sa simplicité, ses matériaux facilement accessibles et rentables et sa courte durée. En outre, nous avons réussi à attache.......

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Discussion

L’étape la plus critique dans le protocole est le collage ferme de la capsule à la peau de la souris. Par conséquent, la colle en latex doit être appliquée homogénéirement à toute la surface eva-mousse de la capsule et une pression constante pendant 3 minutes doit être appliquée, en particulier sur le côté gauche et droit de la capsule. Nous recommandons également le placement de la capsule aussi loin vers l’avant sur le dos que possible pour éviter son enlèvement par la souris en utilisant ses pattes arrière. Dans nos e.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à révéler.

Remerciements

Nous reconnaissons l’assistance technique d’Alain Bernier Français’Institut national de la recherche agronomique (INRAE) et d’Océane Le Bidel (ANSES). L’étude a été soutenue par le DIM One Health - Région Île-de-France (Acronyme du projet: NeuroPaTick). Les souris ont été achetées par l’ANSES. Le Dr Jeffrey L. Blair est reconnu pour avoir examiné la version antérieure du manuscrit.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Mousse EVA de 2 mm d’épaisseur, (basse densité)Boutique de cosplayEVA-45kg (950/450/2 mm)Il peut également être commandé via Amazon (réf. n° B07BLMJDXD)
Manchon d’enroulement de fil électrique 31mm/1,22 poucesAmazonB0848S3S6TDifférents diamètres de gaines thermorétractables sont disponibles via Amazon.
Souris BALB/cByJCharles RiverCode de souche 627
Souris C57BL/6Charles RiverCode de souche 664
Non toxique Latex ColleDéchirure RéparateurTissu & Adhésif pour cuirÉgalement disponible également via Amazon (réf. n° B001RQCTUU)
Outil de poinçonnage Outil d’art à la mainAmazonB07QPWNGBFVendu par amazon en tant qu’outils de travail du cuir 1-25mm Rond en acier Coupe-artisanat en cuir Travail pour sangle de ceinture
Couvertures de reliure en PVC TransparentAmazonB078BNLSNPToute feuille de PVC transparente de ticknes entre 0,150 mm et 0,180 mm convient
Tampon auto-adhésif Éponge Ruban de mousse double faceAmazonB07RHDZ35JVendu par amazon en tant que 2 rouleaux de ruban adhésif en mousse double face, ruban de montage blanc super résistant Autocollants
de sceau transparent (cercles de 20 mm de diamètre)AmazonB01DAA6X66

Références

  1. Sonenshine, D. E., Roe, M. Biology of Ticks. , Oxford University Press. (2014).
  2. Kröber, T., Guerin, P. M. In vitro feeding assays for hard ticks. Trends in Parasitology. 23 (9), 445-449 (2007).
  3. Bonnet, S., et al.

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Réimpressions et autorisations

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