Présenté ici est un protocole pour la fragmentation chronique du sommeil (CSF) modèle atteint par un rotor orbital électriquement contrôlé, qui pourrait induire un déficit cognitif confirmé et le comportement anxieux chez les jeunes souris de type sauvage. Ce modèle peut être appliqué pour explorer la pathogénie des troubles chroniques du sommeil et des troubles connexes.
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Article de méthode
Un modèle chronique de fragmentation du sommeil utilisant rotor orbital vibrant pour induire le déficit cognitif et le comportement anxieux chez les jeunes souris de type sauvage
Dans cet article
Résumé
Résumé
Les troubles du sommeil sont généralement fréquents dans les populations comme une maladie chronique ou un événement plaint. La perturbation chronique du sommeil est proposée pour être étroitement liée à la pathogénie des maladies, en particulier les maladies neurodégénératives. Nous avons récemment constaté que 2 mois de fragmentation du sommeil ont initié la maladie d’Alzheimer (MA) comme des changements comportementaux et pathologiques chez de jeunes souris de type sauvage. Ici, nous présentons un protocole normalisé pour atteindre la fragmentation chronique du sommeil (CSF). En bref, CSF a été induit par un rotor orbital vibrant à 110 rpm et fonctionnant avec un cycle répétitif de 10 s-on, 110 s-off, pendant la phase light-ON (8:00 AM-8:00 PM) en continu pendant jusqu’à 2 mois. Des affaiblissements de l’apprentissage et de la mémoire spatiaux, comportement anxieux mais pas dépression-comme chez les souris comme conséquences de la modélisation de CSF, ont été évalués avec le labyrinthe d’eau de Morris (MWM), la reconnaissance d’objet nouveau (NOR), l’essai en plein champ (OFT) et l’essai forcé de natation (FST). En comparaison avec d’autres manipulations de sommeil, ce protocole minimise les travaux de manipulation et maximise l’efficacité de modélisation. Il produit des phénotypes stables chez de jeunes souris de type sauvage et peut être potentiellement généré à diverses fins de recherche.
Introduction
Les troubles du sommeil sont de plus en plus fréquents chez les patients souffrant de troubles du sommeil et chez les personnes en bonne santé ayant des troubles du sommeil. Il a été observé que les patients atteints de maladies neurodégénératives, douleur chronique, stress émotionnel, maladies du système respiratoire, maladies du système urinaire, etc, se plaignent généralement des expériences desommeil désagréables 1,2,3,4,5. L’apnée obstructive du sommeil (AOS), les mouvements périodiques des membres dan....
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Protocole
Ce protocole a été approuvé par le Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux de l’hôpital tongji, le Tongji Medical College, l’Université des sciences et de la technologie huazhong.
1. Dépistage et préparation des souris pour l’expérience
- Choisissez des souris mâles adultes de type sauvage (8 à 10 semaines) dont le poids est de 20 à 28 g pour l’ensemble de l’expérience.
REMARQUE : Des souris C57BL/6 de type sauvage sont obtenues auprès du Hubei Research Center for Laboratory Animals, Hubei, Chine. - Assignez au hasard toutes les souris au CSF et au groupe témoin. Maison 3-5 souris dans chaque cage pour....
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Résultats
Tous les résultats et chiffres représentatifs ont été reproduits à partir de notre récente publication21. La réutilisation des chiffres a été autorisée par la revue originale.
L’ensemble de la conception expérimentale est illustré dans l’ordre du temps, ce qui indique le moment de la modélisation CSF, les tests comportementaux de MWM, NOR, OFT, et FST (Figure 1A). Nous avons obtenu des poids de souris chaque semaine auprès du CSF et des gro.......
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Discussion
Les étapes critiques du protocole actuel comprennent la mise en place de machines de fragmentation du sommeil avec les paramètres optimisés en fonction de l’objectif de l’étude et le maintien des souris dans un environnement de vie confortable et calme tout au long des séances de modélisation. Il est également crucial de décider du bon moment pour interrompre ou arrêter la fragmentation du sommeil et organiser des tests comportementaux pour ces souris. Comme d’autres modèles de manipulation du sommeil, il est important d.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents.
Remerciements
Ces travaux ont été soutenus par la National Natural Science Foundation of China (61327902-6 à W. Wang et 81801318 à F.F. Ding). Nous reconnaissons le Dr Sigrid Veasy pour avoir mis en place le système expérimental SF et fourni gentiment des détails techniques. Nous reconnaissons le Dr Maiken Nedergaard pour ses commentaires instructifs pour les expériences connexes.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Système de suivi du comportement de n’importe quel labyrinthe | Stoelting, Inc, États-Unis | - | Un système de suivi vidéo qui a été utilisé pour enregistrer le suivi du comportement des souris. |
| C57BL/6J souris | Centre de recherche sur les animaux de laboratoire du Hubei, Hubei, Chine. | - | des souris mâles C57BL/6J en bonne santé âgées de 10 à 12 semaines ont été achetées au Centre de recherche du Hubei pour les animaux de laboratoire |
| Graphpad Prism 6.0 Software | Graphpad Software,Inc.USA-Le | logiciel Graphpad Prism 6.0 a été utilisé pour dessiner des graphiques statistiques. | |
| Système de labyrinthe d’eau Morris | Shanghai XinRuan Information Technology Co., Ltd, Chine | XR-XM101 | Le système a été utilisé pour effectuer le test de labyrinthe d’eau Morris |
| Rotor Orbial | Shanghai ShiPing Laboratory Equipment Co., Ltd, Chine | SPH-331 | Le rotor orbital a été utilisé pour établir le modèle de fragmentation du sommeil chronique |
| Minuterie à semi-conducteurs | OMRON Corporation, Kyoto, Japon | H3CR-F8-300 | Le temps à l’état solide a été utilisé pour contrôler la fréquence et le temps de fonctionnement du rotor |
| Réservoir sans lustre en bois | - | longueur 30 cm, largeur 28 cm, hauteur 35 cm Le réservoir a été utilisé pour effectuer un test en plein champ et un test de reconnaissance de nouveaux objets |
Références
- Peter-Derex, L., Yammine, P., Bastuji, H., Croisile, B. Sleep and Alzheimer's disease. Sleep Medicine Reviews. 19, 29-38 (2015).
- Mathias, J. L., Cant, M. L., Burke, A. L. J. Sleep disturbances and sleep disorders in adults living with chronic pain: a meta-analysis. Sleep Me....
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