La cryoconservation des ovocytes est reconnue par plusieurs sociétés scientifiques internationales comme la norme d’or pour la préservation de la fertilité chez les femmes postpubères. Des stratégies cliniques et de laboratoire appropriées garantissent une efficacité, une efficience et une sécurité maximales des traitements de préservation de la fertilité.
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Article de méthode
Préservation de la fertilité par vitrification des ovocytes : perspectives cliniques et de laboratoire
Dans cet article
Résumé
Résumé
La préservation de la fertilité féminine est cruciale dans un système de santé multifonctionnel qui prend soin de la qualité de vie future des patients. La cryoconservation des ovocytes est reconnue par plusieurs sociétés scientifiques internationales comme la référence en matière de préservation de la fertilité chez les femmes postpubères, tant pour des indications médicales que non médicales. Les principales indications médicales sont les maladies oncologiques, les maladies gynécologiques telles que l’endométriose sévère, les maladies systémiques compromettant la réserve ovarienne et les conditions génétiques impliquant une ménopause prématurée. Cet article décrit l’ensemble du bilan clinique et de laboratoire d’un traitement de préservation de la fertilité en décrivant des recommandations pour des conseils objectifs et fondés sur des preuves. En outre, il se concentre sur l’efficacité de la procédure et décrit les stratégies les plus appropriées pour exploiter pleinement la réserve ovarienne et maximiser le nombre d’ovocytes prélevés dans les plus brefs délais. L’évaluation de la réserve ovarienne, la définition d’un protocole de stimulation idéal, ainsi que les procédures de prélèvement d’ovocytes, de dénudation et de vitrification ont été détaillées ainsi que des approches visant à maximiser leur efficacité, leur efficience et leur innocuité.
Introduction
Le développement et la mise en œuvre d’un programme efficace de cryoconservation des ovocytes humains ont été une percée importante en médecine de la reproduction. Selon des preuves récentes, la vitrification est la stratégie la plus efficace pour cryoconserver les ovocytes de la métaphase II (MII), car elle entraîne des taux de survie statistiquement plus élevés par rapport à la congélation lente, indépendamment de la population de patients (patients infertiles ou programme de don d’ovocytes)1,2,3. Les réalisations remarquables de la vitrification ovocytaire ont conduit les ....
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Protocole
1. Travail et counseling clinique
REMARQUE: Dans le cas de patients nécessitant une préservation de la fertilité pour des raisons oncologiques, assurez-vous qu’il n’y a pas de liste d’attente pour planifier la consultation et que le rendez-vous est fourni dès que possible.
- Examinez les antécédents médicaux et la documentation antérieure et évaluez l’état de santé général du patient.
- Enregistrer toutes les informations (y compris l’approbation de l’oncologue pour subir une stimulation ovarienne en cas de patientes atteintes de cancer) dans une base de données relationnelle.
- Fournir au patient des conseils spécif....
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Résultats
Aperçu du programme de préservation de la fertilité au centre
Sur une période de 12 ans (2008-2020), 285 femmes ont subi au moins un prélèvement d’ovocytes impliquant la vitrification de toute la cohorte d’ovules matures collectés. La plupart de ces femmes (n = 250) ont subi une seule récupération, et 35 ont subi plusieurs récupérations. Les raisons de subir un prélèvement d’ovocytes pour la vitrification des ovules sont résumées en 4 catégories: médical (sauf pour le cancer),.......
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Discussion
Considérations cliniques
Bien que des stratégies émergentes, telles que la cryoconservation du tissu ovarien et la maturation in vitro, aient été explorées, la vitrification des ovocytes après COS est la technique de référence pour la préservation de la fertilité. Dans ce scénario, le nombre d’ovocytes prélevés et cryoconservés devrait être maximisé dans les plus brefs délais, car la plupart des patientes atteintes de cancer pourraient bénéficier uniquement d’un cycle ovarien.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Collection | |||
| Équipement | |||
| Plaque chauffante | IVF TECH | ||
| Marqueurs de laboratoire | Sigma Aldrich | ||
| Cagoule à flux laminaire | IVF TECH | Grade A | |
| Stéréomicroscope | Leica | Leica M80 | |
| Thermomètre | |||
| Tube à essai Réchauffeur | |||
| Incubateur tri-gaz | Panasonic | MCO-5M-PE | 02/CO2 |
| Pompe à vide | Cook | K-MAR-5200 | |
| Consommables | |||
| CSCM (Continuos single culture complete) | medium Fujifilm Irvine Scientific | 90165 | Milieu de culture FIV complété par de l’huile minérale HSA |
| pour la culture d’embryons | Fujifilm Irvine Scientific | 9305 | |
| Aiguille d’aspiration d’ovule (lumière unique) | Cook | K-OSN-1730-B-60 | |
| Plat Primaria Corning | 353803 | Corning Primaria Plat 100x20 mm style standard de culture cellulaire | |
| Tubes à fond rond Falcon | 352001 | Falcon 14ml Fond Rond Polystyrène Tube à essai avec bouchon à pression | |
| Tubes à fond rond | Falcon | 352003 | Tubes de prélèvement d’ovocytes/ Falcon 5ml 12x75 Fond Rond Tube à essai Tube à essai avec bouchon à pression |
| Poire en caoutchouc | Sigma Aldrich Aldrich | Z111589-12EA | |
| Pipettes Pasteur en verre stérile | Hunter Scientific | PPB150-100PL | Pipette Pasteur Cotonate, 150mm, MEA e CE |
| Denudation | |||
| Equipment | |||
| CO2 incubateur | Eppendorf | Galaxy 14S | |
| Flexipet adjustable handle set | Cook | G18674 | Stripper ; holder |
| Gilson Pipetman | Gilson | 66003 | p20 |
| k-System Incubateur | Coopersurgical | G210Invicell | |
| Marqueurs de laboratoire | Sigma Aldrich | ||
| Hotte à flux laminaire | IVF TECH | Grade A Débit d’air | |
| Stéréomicroscope | Leica | Leica M80 | |
| Consommables | |||
| Biopur epTIPS Rack | Eppendorf | 30075331 | Micropipettes epTIPS Biopur 2-200 & micro ; l |
| Sérum humain Albumine | thermoFisher Scietific | 9988 | |
| Hyaluronidase | Fujifilm Irvine Scientific | 90101 | 80 UI/mL d’enzyme hyaluronidase dans une boîte de culture de FIV HTF tamponnée HEPES |
| (60 x 15 mm) | Corning | 353802 | Corning Primaria Falcon Dish 60X15mm TC Plat de culture cellulaire standard Primaria |
| Plat de FIV Plaque à 4 puits avec couvercle coulissant | ThermoFisher Scietific | 176740 | Multiparaboles 4 puits (Nunc) |
| FIV Plat à un puits | Falcon | 353653 | Falcon 60 x 15 mm TC traité à puits central |
| FIV Huile minérale pour culture embryonnaire | Fujifilm Irvine Scientific | 9305 | |
| Modified HTF Medium | Fujifilm Irvine Scientific | 90126 | HEPES-Buffered medium |
| Rubber Bulb | Sigma Aldrich | Z111589-12EA | 1 mL for Pipettes pasteur |
| Pipettes en verre stérile Pipettes Pasteur | Hunter Scientific | PPB150-100PL | Pipette Pasteur Cotonate, 150 mm, MEA et CE |
| pointes de pipette stripping (140 ; m) | Cook | K-FPIP-1140-10BS-6 | PIPETTE FLEXIPETS PER DENUDING |
| pointes de pipette (130 µ ; m ) | Cook | K-FPIP-1130-10BS-7 | PIPETTE FLEXIPETS PER DENUDING |
| pointes de pipette (170 µ ; m) | Cook | K-FPIP-1170-10BS-5 | PIPETTE FLEXIPETS PER DENUDING |
| strong>Vitrification | |||
| Equipment | |||
| Electronic Timer | |||
| Flexipet adjustable handle set | Cook | G18674 | Décapant ; support |
| Gilson Pipetman | Gilson | F123601 | p200 |
| Marqueurs de laboratoire | Sigma Aldrich | ||
| Hotte à flux laminaire | IVF TECH | à flux d’air de catégorie A | |
| pour grille de refroidissement | Kitazato Récipient d’azote | liquide pour vitrification | |
| Stéréomicroscope | Leica | Leica M80 | |
| Consommables | |||
| Biopur epTIPS Rack | Eppendorf | 30075331 | Micropipettes epTIPS Biopur 2-200 µ ; L |
| Sérum Humain Albumine | Fujifilm Irvine Scientific | 9988 | |
| Boîte de culture FIV (60 x 15 mm) | Corning | 353802 | Corning Primaria Falcon Dish 60 x 15 mm TC Primaria Antenne de culture cellulaire standard Boîte |
| de FIV 6 puits | Oosafe | OOPW-SW02 | OOSAFE ; PLAT 6 PUITS AVEC PORTE-PAILLE |
| Medium HTF modifié | Fujifilm Irvine Scientific | 90126 | HEPES-Buffered medium |
| stripping pipette tips (170 µ ; m) | Cook | K-FPIP-1170-10BS-5 | PIPETTE FLEXIPETS PER DENUDING |
| Kit de congélation de vitrification | Fujifilm Irvine Scientific | 90133-so | 2 flacons de ES (solution d’équilibration, 2 x 1 mL) et 2 flacons de VS (solution de vitrification, 2 x 1 mL) |
| Vitrifit | Coopersurgical Origio | 42782001A | VitriFit ; Box |
| Warming | |||
| Equipment | |||
| Electronic Timer | |||
| Flexipet adjustable handle set | Cook | G18674 | Stripper ; holder |
| Gilson Pipetman | Gilson | F123601 | p200 |
| k-System Incubateur | Coopersurgical | G210Invicell | |
| Marqueurs de laboratoire | Sigma Aldrich | ||
| Hotte à flux laminaire | IVF TECH | Flux d’air de catégorie A | |
| Récipient en acier inoxydable pour grille de refroidissement | Kitazato Récipient d’azote | liquide pour vitrification | |
| Stéréomicroscope | Leica | Leica M80 | |
| Consommables | |||
| Biopur epTIPS Rack | Eppendorf | 30075331 | Micropipettes epTIPS Biopur 2-200 µ ; L |
| CSCM (Continuos single culture complete) medium | Fujifilm Irvine Scientific | 90165 | Milieu de culture FIV complété par HSA |
| Boîte de culture IVF (60 x 15 mm) | Corning | 353802 | Corning Primaria Falcon Dish 60X15mm TC Primaria standard |
| Plat de culture cellulaire Plat de FIV 4 puits avec couvercle coulissant | ThermoFisher Scietific | 176740 | Multiplats 4 puits (Nunc) |
| Plat de FIV 6 puits | Oosafe | OOPW-SW02 | OOSAFE® ; ; PLAT 6 PUITS AVEC PORTE-PAILLE |
| Huile minérale pour la culture d’embryons | Fujifilm Irvine Scientific | 9305 | |
| SApointes de pipette de déclenchement (300µ ; m) | Cook | K-FPIP-1300-10BS-5 | PIPETTE FLEXIPETS PER DENUDING |
| Kit de vitrification et de décongélation | Fujifilm Irvine Scientific | 90137-so | 4 flacons de TS (solution de décongélation, 4 x 2 mL) + 1 flacon de DS (solution de dilution, 1 x 2 mL) + 1 flacon de WS (solution de lavage, 1 x 2 mL) |
Références
- Cobo, A., Diaz, C. Clinical application of oocyte vitrification: a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Fertility and Sterility. 96 (2), 277-285 (2011).
- Rienzi, L., et al.
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Réimpressions et autorisations
