Un modèle d’endotoxine reproductible orienté unité de soins intensifs chez le rat

Résumé

Nous présentons ici un modèle d’endotoxine reproductible orienté unité de soins intensifs chez le rat.

Résumé

La septicémie et le choc septique demeurent la principale cause de décès dans les unités de soins intensifs. Malgré des améliorations significatives dans la prise en charge de la septicémie, la mortalité varie toujours entre 20 et 30%. De nouvelles approches thérapeutiques sont nécessaires de toute urgence afin de réduire l’insuffisance multiviscérale et la mort liées à la septicémie. Des modèles animaux robustes permettent une ou plusieurs approches de traitement ainsi que de tester leur effet sur les paramètres physiologiques et moléculaires. Dans cet article, un modèle animal simple est présenté.

Tout d’abord, l’anesthésie générale est induite chez les animaux soit avec l’utilisation de volatile, soit par anesthésie intrapéritonéale. Après la mise en place d’un cathéter intraveineux (veine caudale), la trachéotomie et l’insertion d’un cathéter intraartérien (artère caudale), la ventilation mécanique est commencée. Les valeurs de base de la pression artérielle moyenne, de la saturation artérielle en oxygène et de la fréquence cardiaque sont enregistrées.

L’injection de lipopolysaccharides (1 milligramme/ kilogramme de poids corporel) dissous dans une solution saline tamponnée au phosphate induit une réponse inflammatoire forte et reproductible via le récepteur de type toll 4. Les corrections hydriques ainsi que l’application de noradrénaline sont effectuées sur la base de protocoles bien établis.

Le modèle animal présenté dans cet article est facile à apprendre et fortement orienté vers le traitement clinique de la septicémie dans une unité de soins intensifs avec sédation, ventilation mécanique, surveillance continue de la pression artérielle et prélèvement sanguin répétitif. De plus, le modèle est fiable, permettant des données reproductibles avec un nombre limité d’animaux conformément aux principes 3R (réduire, remplacer, affiner) de la recherche animale. Alors que les expériences sur les animaux dans la recherche sur la septicémie ne peuvent pas être facilement remplacées, les mesures répétitives permettent une réduction des animaux et le maintien d’animaux septiques anesthésiés diminue la souffrance.

Introduction

La septicémie et sa forme la plus grave, le choc septique, sont des syndromes sur le terrain d’une infection, entraînant une réaction inflammatoire excessive avec la libération de cytokines, entraînant des changements physiologiques et biochimiques avec une défense immunitaire supprimée et des résultats fatals ^1,2. Cette réaction inflammatoire déséquilibrée entraîne un dysfonctionnement des organes et une défaillance des organes dans divers organes vitaux tels que les poumons, les reins et le foie. Avec 37 %³, la septicémie est l’une des raisons les plus courantes pour lesquelles un pat....

Protocole

Toutes les expériences présentées dans ce protocole ont été approuvées par les autorités vétérinaires du canton de Zurich, en Suisse (numéros d’approbation 134/2014 et ZH088/19). En outre, toutes les étapes de cette expérience étaient conformes aux lignes directrices sur les expériences avec des animaux de l’Académie suisse des sciences médiatiques (ASSM) et aux lignes directrices de la Fédération des associations européennes de sciences des animaux de laboratoire (FELASA).

1. Induction de l’anesthésie et surveillance des animaux

1. Gardez les rats Wistar mâles d’un poids de 250 à 300 grammes (g) dans des cages ventilées dans des con....

Résultats

Le système présenté permet l’endotoxémie chez les animaux hémodynamiquement stables comme indiqué précédemment⁹. Alors que la pression artérielle moyenne reste stable chez les animaux avec et sans stimulation LPS, les animaux traités par LPS développent des caractéristiques de septicémie telles qu’un excès de base négatif et une forte réaction inflammatoire mesurée par des cytokines plasmatiques (6 heures après l’application) telles que CINC-1 (867 ng / mL), MCP-1 (5027 ng / mL) et IL-6 (867 ng / .......

Discussion

Le protocole décrit ici permet un modèle de septicémie hautement reproductible, mais simple à apprendre, qui peut être adapté en fonction de la question de recherche. Des données in vivo essentielles concernant le fonctionnement des organes, telles que la fréquence cardiaque, la pression artérielle et la saturation artérielle périphérique en oxygène, peuvent être collectées en continu et des prélèvements sanguins peuvent être effectués de manière répétitive tout au long de l’expérience. En outre, des modifications concer.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
2-0 sutures en soie	Ethicon, Sommerville, NJ	K833	Standard chirurgical 26
cathéter intraveineux	Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ	391349	Équipement d’anesthésie standard
6-0 LOOK en soie tressée noire	Surgical Specalities Corporation, Wyomissing, PA	SP114	Standard chirurgical
Alaris Seringue Pompe	Bencton Dickinson
Betadine	Mundipharma, Bâle, Suisse	7.68034E+12	Numéro GTIN
Micropinces à pointes fines incurvées	precision instruments (WPI), Sarasota, FL	504513	Facilite la préparation vasculaire
Micropinces à pointes fines	World precision instruments (WPI), Sarasota, FL	501976	Les pointes doivent être polies régulièrement
Infinity Delta XL Surveillance de l’anesthésie	Draeger, Lü ; beck, Allemagne
Isoflurane, flacons de 250 mL	Attane, Piramal, Mumbai, Inde	LDNI 22098	Équipement vétérinaire standard
Kétamine (Ketalar)	Pfitzer, New York, NY
Lipopolysaccharide (LPS) de Escherichia coli, sérotype 055 :B5	Sigma, Buchs, Suisse
Q-tips small	Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Allemagne	EH11.1	Standard surgical
Ringerfundin	Bbraun, Melsungen, Germany
Vaporisateur Tec-3 Isofluorane	Ohmeda, GE-Healthcare, Chicago, IL	n’est plus disponible Équipement	vétérinaire standard
Xylazine (Xylazin Streuli)	Streuli AG, Uznach, Suisse

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