Un protocole pour le pontage gastrique de Roux-en-Y chez le rat à l’aide d’agrafeuses linéaires

Résumé

Le pontage gastrique de Roux-en-Y (RYGB) est effectué pour traiter l’obésité et le diabète. Cependant, les mécanismes sous-jacents à l’efficacité du RYGB ne sont pas entièrement compris, et les études sont limitées par des difficultés techniques conduisant à une mortalité élevée chez les modèles animaux. Cet article fournit des instructions sur la façon d’exécuter RYGB chez les rats avec des taux de réussite élevés.

Résumé

Le pontage gastrique de Roux-en-Y (RYGB) est couramment effectué pour le traitement de l’obésité sévère et du diabète de type 2. Cependant, le mécanisme de perte de poids et les changements métaboliques ne sont pas bien compris. On pense que de multiples facteurs jouent un rôle, y compris la réduction de l’apport calorique, la diminution de l’absorption des nutriments, l’augmentation de la satiété, la libération d’hormones favorisant la satiété, les changements dans le métabolisme des acides biliaires et les altérations du microbiote intestinal.

Le modèle RYGB de rat présente un cadre idéal pour étudier ces mécanismes. Les travaux antérieurs sur les modèles murins ont eu des taux de mortalité élevés, allant de 17 à 52%, limitant leur adoption. Les modèles de rat démontrent plus de réserve physiologique au stimulus chirurgical et sont techniquement plus faciles à adopter car ils permettent l’utilisation d’agrafeuses chirurgicales. Un défi avec les agrafeuses chirurgicales, cependant, est qu’elles laissent souvent une grande poche gastrique qui n’est pas représentative de RYGB chez l’homme.

Dans ce protocole, nous présentons un protocole de RYGB chez les rats qui ont comme conséquence une petite poche gastrique utilisant les agrafeuses chirurgicales. En utilisant deux feux d’agrafeuse qui enlèvent le forestomach du rat, nous obtenons une poche gastrique plus petite similaire à celle suivant un RYGB humain typique. L’agrafage chirurgical a également comme conséquence une meilleure hémostase que la division pointue. De plus, le séestomaque du rat ne contient pas de glandes et son élimination ne devrait pas altérer la physiologie du RYGB.

La perte de poids et les changements métaboliques dans la cohorte de RYGB étaient significatifs comparés à la cohorte de feinte, avec la tolérance sensiblement inférieure de glucose à 14 semaines. En outre, ce protocole a une excellente survie de 88,9% après RYGB. Les qualifications décrites dans ce protocole peuvent être acquises sans expérience microsurgical précédente. Une fois maîtrisée, cette procédure fournira un outil reproductible pour étudier les mécanismes et les effets du RYGB.

Introduction

L’obésité et le diabète de type 2 sont devenus des épidémies mondiales¹. Bien que la perte de poids médicale puisse améliorer le diabète chez les patients, ceux atteints de diabète sévère bénéficient le plus de la chirurgie bariatrique. La chirurgie bariatrique s’est avérée sûre et efficace pour perdre du poids et améliorer ou guérir le diabète de type^{2 2,3,}même chez les personnes atteintes d’une maladie de longue date^4. Les procédures bariatriques métaboliques, telles que la chirurgie de pontage gastrique Roux-en-Y (RYGB) de référence actuelle, induisent des amé....

Protocole

Les protocoles d’utilisation des animaux ont été approuvés par le Health Science Animal Care and Use Committee de l’Université de l’Alberta (AUP00003000). Voir la figure 1 pour un diagramme illustrant l’anatomie du RYGB.

1. Pontage gastrique de Roux-en-Y

1. Préparation des animaux et installation opératoire
   1. Une semaine avant la chirurgie, fournir aux rats une thérapie de réhydratation orale et un régime liquide en plus de leur régime solide et de l’eau pour les acclimater à ce nouveau régime.
   2. Rats rapides avec seulement l’accès à l’eau pendant 12-18 h avant la chirurgie.
      1. Assure....

Résultats

Animaux et logement
36 rats Wistar mâles ont été logés par paires et ont reçu un régime alimentaire riche en graisses à 60 % de rongeurs stériles à partir de l’âge de six semaines(figure 2). À l’âge de 16 semaines, ils ont subi une chirurgie RYGB ou feinte. Après la première semaine postopératoire, des rats ont été repris sur un régime à haute teneur en graisses. La moitié des rats ont été euthanasiés à 2 semaines postopératoires et l’autre moitié ont été euthanasiées à 1.......

Discussion

Le RYGB implique la création d’une petite poche gastrique (moins de 30 mL) et la création d’un membre biliopancréatique et d’un membre Roux (Figure 1). Chez l’homme, le membre biliopancréatique mesure généralement de 30 à 50 cm et transporte les sécrétions du reste gastrique, du foie et du pancréas. Le membre de Roux mesure généralement de 75 à 150 cm de long et constitue le principal canal d’ingéré. Le canal commun est l’intestin grêle restant distal à l’endroit où les deux membres se rejoi.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
2-0 Sutures en soie	Ethicon	K533
3-0 Sutures en vicryle	Ethicon	J219H
4 % Isoflurane	N/A	N/A
5 % Dextrose et 0,9 % Chlorure de sodium Solution - 1000 mL	Baxter	2B1064
50 mL Tubes à centrifuger	coniques Fisher Scientific	14-432-22
6-0 Sutures Prolene	Ethicon	8805H
Appareil d’anesthésie	N/A	N/A
Rasoir à poils d’animaux	N/A	N/A N/A
Betadine Solution	N/	A N/A
Castrojievo Porte-aiguille avec serrure 14 cm (courbe lisse)	World Precision Instruments	503258
ECHELON FLEX Coupe-aiguille linéaire endoscopique articulé	Ethicon	EC45A
Économique Pince à épiler #4	World Precision Instruments	501978
ENDOPATH ETS Coupeuse linéaire articulée 45mm Recharge	Ethicon	6R45B
Contrôleur de coussin chauffant à infrarouge lointain avec coussin chauffant (15,2 cm L x 20,3 cm L), sonde de température de tampon et 10 protecteurs de manchon jetables et non stériles	Kent Scientific	RT-0515
Grand rat Collier	élisabéthainKent Scientific	Sonde d’alimentation diététique liquide EC404VL-10
(150 ml)	Bio-Serv	9007
Support de sonde d’alimentation diététique liquide (court réglable)	Bio-Serv	9015
Micro Pince à moustiques	World Precision Instruments	500452
Micro Scissors	World Precision Instruments	503365
Régime pour souris, riche en matières grasses et en calories (60 %), granulés mous	Bio-Serv	S3282
n° 11 Lame et scalpel Manche	N/	A N/A
OPMI Vario Microscope chirurgical	ZEISS	S88
Grille de plancher surélevé	Tecniplast	GM500150 Grille
pour rongeurs Liquid Diet, Lieber-DeCarli '82, Contrôle, 4 litres/sac	Bio-Serv	F1259
Solution d’irrigation au chlorure de sodium à 0,9 % - 500 mL	Baxter	JF7633
Cotons-tiges stériles	N/A	/A N/A
Drapé stérile	N/A	N/A
Serviette stérile	N/A	N/A
Unité de cautérisation thermique	World Precision Instruments	501293

de plancher surélevé N