Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.

Article de méthode

Un modèle d’apoptose neuronale induit par la compression de la moelle épinière chez le rat

1.5K vues

DOI :

10.3791/62604

29 juin 2021

* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Ici, nous présentons un protocole pour générer un modèle de compression de la moelle épinière chez le rat, évaluer son score comportemental et observer la région de la moelle épinière comprimée. Les évaluations comportementales ont montré une diminution de l’incapacité motrice du moniteur. La coloration à l’hématoxyline et à l’éosine et l’immunocoloration ont révélé une apoptose neuronale considérable dans la région comprimée de la moelle épinière.

Résumé

En tant que maladie dégénérative progressive sévère, la myélopathie spondylotique cervicale (MCS) a un mauvais pronostic et est associée à des douleurs physiques, à une raideur, à un dysfonctionnement moteur ou sensoriel et à un risque élevé de lésion de la moelle épinière et d’acroparalysie. Ainsi, il est urgent de mettre en place des stratégies thérapeutiques favorisant une régénération efficace de la moelle épinière dans cette maladie chronique et évolutive. Des modèles efficaces et reproductibles de compression de la moelle épinière animale sont nécessaires pour comprendre le mécanisme biologique complexe sous-jacent à la MCS. La plupart des modèles de lésions de la moelle épinière reflètent des conditions destructrices aiguës et structurelles, tandis que les modèles animaux de CSM présentent une compression chronique de la moelle épinière. Cet article présente un protocole pour générer un modèle de compression de la moelle épinière chez le rat, qui a été évalué en évaluant le score comportemental et en observant la région de la moelle épinière comprimée. Les évaluations comportementales ont montré une diminution de l’incapacité motrice du moniteur, y compris les mouvements articulaires, la capacité de marche, la coordination, la stabilité du tronc et la force musculaire des membres. La coloration à l’hématoxyline et à l’éosine (H&E) et l’immunocoloration ont révélé une apoptose neuronale considérable dans la région comprimée de la moelle épinière.

Introduction

En tant que maladie dégénérative progressive courante, la MCS représente 5 à 10 % de toutes les spondylose cervicales1. Si les patients souffrant de MCS ignorent leurs symptômes et ne les traitent pas rapidement et efficacement, cela pourrait entraîner de graves complications, telles que des lésions de la moelle épinière et une paralysie des membres, qui se détérioreraient avec l’âge, ce qui constituerait un fardeau économique et mental substantiel pour les patients et leursfamilles2,3. La pathogenèse de la CSM est complexe, impliquant des facteurs stat....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Protocole

La procédure suivante a été réalisée avec l’approbation du Comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux (IACUC) de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Shanghai. Toutes les chirurgies de survie ont été effectuées dans des conditions stériles telles que décrites par les directives du NIH. La douleur et le risque d’infections ont été gérés à l’aide d’analgésiques et d’antibiotiques appropriés pour assurer un résultat positif. Cette intervention chirurgicale est optimisée pour les rats mâles consanguins Sprague-Dawley (SD) à l’âge de 12 semaines et pesant 400 g.

1. Préparation de l’h....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Résultats

Une lésion compressive de la moelle épinière peut entraîner une invalidité neuromusculaire dans les membres
Au fur et à mesure que la pièce d’hydrogel se dilate progressivement, elle comprime de manière persistante la région de la moelle épinière pendant une période prolongée, ce qui simule les handicaps des membres antérieurs induits par les maladies de la moelle épinière cervicale 8,10. Dans le modèle actuel, une contracture ipsilatérale con.......

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Discussion

Le but de cette intervention chirurgicale était de générer une apoptose neurale reproductible et prolongée dans la moelle épinière du rat. L’un des principaux avantages de ce modèle est que les implants d’hydrogel expansibles assurent une compression prolongée sur la moelle épinière, conduisant ainsi à une réponse apoptotique neurale progressive (Figure 2C), ce qui est cohérent avec le processus pathologique de la MCS. Dans l’étude actuelle, la mortalité par.......

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à divulguer et déclarent qu’il n’y a aucune restriction à l’accès complet à tous les documents utilisés dans cette étude.

Remerciements

Cette étude a été soutenue par le Programme national de R&D clé de la Chine (2018YFC1704300), la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (81930116, 81804115, 81873317 et 81704096), le Programme de voile de Shanghai (18YF1423800), la Fondation des sciences naturelles de Shanghai (20ZR1473400). Ce projet a également été soutenu par l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Shanghai (2019LK057).

....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
PommadePrévenir l’infection de la plaie
Buprénorphine-SRSoulagement de la douleur
IsofluraneVeteasyAnesthésie Matériel
d’anesthésie par inhalationAnesthésie
Micro pince ophtalmiqueÉquipement médical MingrenLongueur : 11 cm, Diamètre de la tête : 0,3 mmCouper le muscle
Pince ophtalmiqueShanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Usine d’instruments chirurgicauxJD1050Clip de la peau
Ciseaux ophtalmiques (10 cm)Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Usine d’instruments chirurgicauxY00030Incision cutanée
SD rats mâlesShanghai SLAC Laboratory Animal Co., LtdSCXK2018-0004Modèle animal
Lames chirurgicales stériles (22#)Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.35T0707Incision musculaire
TondeuseÉpilation
Veet crème dépilatoireRECKITT BENCKISER (India) LtdÉpilation
Cisaille VénusMingren équipement médicalLongueur : 12,5 cmIncision musculaire
antibiotique pour petits animaux

Références

  1. Lebl, D. R., Bono, C. M. Update on the diagnosis and management of cervical spondylotic myelopathy. The Journal of the American Academy of Orthopaedic Surgeons. 23 (11), 648-660 (2015).
  2. Haddas, R., et al.

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Réimpressions et autorisations

Mots-clés

Mod le ratMy lopathie cervicarthrosiqueL sion de la moelle pini revaluation comportementaleColoration l h matoxyline et l osineImmunomarquageDysfonctionnement moteurR g n ration de la moelle pini re
Vidéo bientôt disponible