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Article de méthode

Exploration heuristique des génotypes hiérarchiques et des loci du génome accessoire dans les populations bactériennes

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DOI :

10.3791/63115

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7 décembre 2021

 ,  , 

* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Cette plate-forme informatique analytique fournit des conseils pratiques aux microbiologistes, aux écologistes et aux épidémiologistes intéressés par la génomique des populations bactériennes. Plus précisément, les travaux présentés ici ont démontré comment effectuer: i) une cartographie guidée par la phylogénie des génotypes hiérarchiques; ii) l’analyse des génotypes fondée sur la fréquence; iii) analyses de la parenté et de la clonalité; iv) l’identification des loci accessoires différenciant la lignée.

Résumé

L’utilisation systématique et systématique du séquençage bactérien du génome entier (SGC) améliore l’exactitude et la résolution des enquêtes épidémiologiques menées par les laboratoires de santé publique et les organismes de réglementation. De grands volumes de données WGS accessibles au public peuvent être utilisés pour étudier les populations pathogènes à grande échelle. Récemment, une plate-forme de calcul disponible gratuitement appelée ProkEvo a été publiée pour permettre des analyses génomiques de population reproductibles, automatisées et évolutives basées sur des hiérarchies à l’aide de données WGS bactériennes. Cette mise en œuvre de ProkEvo a démontré l’importance de combiner la cartographie génotypique standard des populations avec l’extraction du contenu génomique accessoire pour l’inférence écologique. En particulier, les travaux mis en évidence ici ont utilisé des résultats dérivés de ProkEvo pour des analyses hiérarchiques à l’échelle de la population utilisant le langage de programmation R. L’objectif principal était de fournir un guide pratique aux microbiologistes, aux écologistes et aux épidémiologistes en montrant comment: i) utiliser une cartographie guidée par la phylogénie des génotypes hiérarchiques; ii) évaluer les distributions de fréquence des génotypes comme approximation de l’aptitude écologique; iii) déterminer les relations de parenté et la diversité génétique à l’aide de classifications génotypiques spécifiques; et iv) la lignée cartographique différenciant les loci accessoires. Pour améliorer la reproductibilité et la portabilité, des fichiers de démarque R ont été utilisés pour démontrer l’ensemble de l’approche analytique. L’exemple d’ensemble de données contenait des données génomiques provenant de 2 365 isolats de l’agent pathogène zoonotique d’origine alimentaire Salmonella Newport. La cartographie ancrée dans la phylogénie des génotypes hiérarchiques (Serovar -> BAPS1 -> ST -> cgMLST) a révélé la structure génétique de la population, mettant en évidence les types de séquences (ST) comme génotype différenciant clé de voûte. Dans les trois lignées les plus dominantes, ST5 et ST118 ont partagé un ancêtre commun plus récemment qu’avec le phylotype ST45 hautement clonal. Les différences fondées sur les ST ont également été mises en évidence par la distribution des loci de résistance aux antimicrobiens accessoires (RAM). Enfin, une visualisation ancrée dans la phylogénie a été utilisée pour combiner les génotypes hiérarchiques et le contenu de la RAM afin de révéler la structure de parenté et les signatures génomiques spécifiques à la lignée. Combinée, cette approche analytique fournit des lignes directrices pour la réalisation d’analyses heuristiques génomiques de populations bactériennes à l’aide d’informations pangénomiques.

Introduction

L’utilisation croissante du séquençage bactérien du génome entier (SGC) comme base de la surveillance de routine et des enquêtes épidémiologiques par les laboratoires de santé publique et les organismes de réglementation a considérablement amélioré les enquêtes sur les éclosions d’agents pathogènes 1,2,3,4. En conséquence, de grands volumes de données WGS anonymisées sont maintenant accessibles au public et peuvent être utilisés pour étudier des aspects de la biologie des populations d’espèces pathogènes à une échelle sans précédent, y compr....

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Protocole

1. Préparer les fichiers d’entrée

REMARQUE: Le protocole est disponible ici - https://github.com/jcgneto/jove_bacterial_population_genomics/tree/main/code. Le protocole suppose que le chercheur a spécifiquement utilisé ProkEvo (ou un pipeline comparable) pour obtenir les sorties nécessaires disponibles dans ce référentiel Figshare (https://figshare.com/account/projects/116625/articles/15097503 - les informations de connexion sont requises - L’utilisateur doit créer un compte gratuit pour avoir accès au fichier!). Il est à noter que ProkEvo télécharge automatiquement les séquences génomiques du référentiel NCBI-SRA et ne néces....

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Résultats

En utilisant la plate-forme de calcul ProkEvo pour les analyses de génomique des populations, la première étape de l’exploration de données WGS bactériennes consiste à examiner la structure hiérarchique de la population dans le contexte d’une phylogénie noyau-génome (Figure 1). Dans le cas de S. lignée enterica I, illustrée par le S. Ensemble de données Newport, la population est structurée hiérarchiquement comme suit : sérovar (niveau de résolution le plus bas), .......

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Discussion

L’utilisation d’une analyse heuristique et hiérarchique de la structure des populations basée sur des systèmes fournit un cadre pour identifier de nouvelles signatures génomiques dans des ensembles de données bactériennes qui ont le potentiel d’expliquer des modèles écologiques et épidémiologiques uniques20. De plus, la cartographie des données génomiques accessoires sur la structure de la population peut être utilisée pour déduire des caractères acquis par l’ancestral et/ou récemment dérivés qui .......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs ont déclaré qu’il n’existait pas d’intérêts concurrents.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par un financement fourni par la Division de la recherche agricole de l’UNL-IANR et de l’Institut national de recherche et d’éducation sur la résistance aux antimicrobiens, ainsi que par le Nebraska Food for Health Center du Département des sciences et technologies alimentaires (UNL). Cette recherche n’a pu être complétée qu’en utilisant le Holland Computing Center (HCC) de l’UNL, qui reçoit le soutien de la Nebraska Research Initiative. Nous sommes également reconnaissants d’avoir accès, par l’intermédiaire du HCC, aux ressources fournies par l’Open Science Grid (OSG), qui est soutenu par la National Science Foundation et l’Office of Science ....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
https://figshare.com/account/projects/116625/articles/14829225?file=28758762 amr_data_raw
https://figshare.com/account/projects/116625/articles/14829225?file=28547994 baps_outputhttps://figshare.com/account/projects/116625/articles/14829225?file=28548003
Phylogénie du génome centralhttps://figshare.com/account/projects/116625/articles/14829225?file=28548006
genome_srahttps://figshare.com/account/projects/116625/articles/14829225?file=28639209
Linux, Mac ou PCtoute plate-forme haute performance
mlst_outputhttps://figshare.com/account/projects/116625/articles/14829225?file=28547997
https://figshare.com/account/projects/116625/articles/14829225?file=28548000
identifiants FigShare sont nécessaires pour se connecter et avoir accès aux fichiers
amr_data_filtered sistr_output

Références

  1. Grad, Y. H., et al. Genomic epidemiology of the Escherichia coli O104:H4 outbreaks in Europe, 2011. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109 (8), 3065-3070 (2012).
  2. Worby, C. J., Chang, H. -H., Hanage, W. P., Lipsitch, M.

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Réimpressions et autorisations

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