Induction d’un infarctus du myocarde et d’une lésion d’ischémie-reperfusion myocardique chez la souris

Résumé

Nous décrivons ici une méthode simple et reproductible qui peut induire un infarctus du myocarde ou une lésion d’ischémie-reperfusion myocardique chez la souris par ligature de précision de l’artère coronaire descendante antérieure gauche par micromanipulation.

Résumé

L’infarctus aigu du myocarde est une maladie cardiovasculaire fréquente avec une mortalité élevée. La lésion de reperfusion myocardique peut contrecarrer les effets bénéfiques de la refusion cardiaque et induire une lésion myocardique secondaire. Un modèle simple et reproductible d’infarctus du myocarde et d’ischémie-reperfusion myocardique est un bon outil pour les chercheurs. Ici, une méthode personnalisable pour créer un modèle d’infarctus du myocarde (IM) et MIRI par ligature de précision de l’artère coronaire descendante antérieure gauche (LAD) par micromanipulation est décrite. Le positionnement précis et reproductible de la ligature du LAD permet d’obtenir des résultats cohérents pour les lésions cardiaques. Les modifications apportées au segment ST peuvent aider à identifier la précision du modèle. Le taux sérique de troponine T cardiaque (cTnT) est utilisé pour évaluer la lésion myocardique, l’échographie cardiaque est utilisée pour évaluer la fonction systolique myocardique et la coloration au chlorure d’Evans-Blue/triphényltétrazolium est utilisée pour mesurer la taille de l’infarctus. En général, ce protocole réduit la durée de la procédure, assure une taille d’infarctus contrôlable et améliore la survie des souris.

Introduction

L’infarctus aigu du myocarde (IAM) est une maladie cardiovasculaire courante dans le monde et entraîne une mortalité élevée¹. Les progrès technologiques rendent la revascularisation précoce et efficace disponible pour les patients atteints d’IAM. Après ces traitements, chez certains patients, une lésion d’ischémie-reperfusion myocardique (IRMI) peut survenir². Ainsi, il est d’une grande importance de comprendre les mécanismes d’action et comment améliorer l’IM/MIRI. Les souris sont largement utilisées comme modèles en raison de leur faible coût, de leur temps de reproduction rapide et de leur facilité à effectuer des mod....

Protocole

Des études sur les animaux ont été approuvées par le Comité de protection et d’utilisation des animaux de l’Université des sciences et technologies de Huazhong (Wuhan, Chine).

REMARQUE : Les souris mâles C57BL/6J (8-10 semaines) sont utilisées comme modèles. Les souris ont libre accès à la nourriture et à l’eau et sont élevées dans des conditions spécifiques exemptes d’agents pathogènes. La pièce est maintenue sous température (22 °C ± 2 °C) et humidité (45%-65%). Les souris sont exposées à un environnement clair/sombre de 12 heures à l’installation de soins aux animaux de la faculté de médecine de Tongji (Wuhan, Chine) selon les directives....

Résultats

Le flux de travail expérimental est illustré à la figure 1A. Le chercheur peut programmer les nœuds temporels en fonction de la conception expérimentale au début de l’étude. La durée de la ligature LAD dépend de l’objectif de la recherche. Dans le cas de l’IM, la recherche peut ignorer l’étape de reperfusion. L’échographie cardiaque est disponible à différents stades de l’étude car elle est non invasive, tandis que la coloration Evans-Blue/TTC ne peut être effectuée que lorsque la souris est.......

Discussion

Au cours des dernières années, la création de modèles pour l’IM et l’IRMI dans la recherche clinique et scientifique s’est développée rapidement^20,21. Cependant, il reste encore quelques questions, telles que les mécanismes d’action et la façon d’améliorer l’IM/MIRI, qui doivent être résolues. Ici, un protocole modifié pour l’établissement d’un modèle murin de l’IM et de l’IRMI est décrit. Plusieurs points clés doivent être examinés avec soin.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
0,9 % solution de chlorure de sodium	Kelun Industry Group,	Chine-4
% solution de fixation de paraformaldéhyde	Servicebio, Chine	G1101-4-0
suture en soie	Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products, Chine	C412-8-0
suture	Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products, Chine	H801-Buprénorphine
	IsoReag,Chine	IR-11190-Appareil
photo	Canon,Japon	EOS 80D-Crème
dépilatoire	Veet,Français-Elecsys
Troponine T hs STAT	Roche,Allemagne-Immunoanalyseur
électrochimique à luminescence	Roche,Allemagne	Elecsys 2010-Evans
bleu	Sigma,Amérique	E2129	-
Ciseaux oculaires	Shanghai Medical Instruments, Chine	JC2303-Pince
hémostatique	Shanghai Medical Instruments, Chine	J31020-Systèmes
d’imagerie in vivo à haute fréquence	Visualsonics, Canada	Vevo2100-Ibuprofen
	PerFeMiKer, Chine	CLS-12921-Cathéter
intraveineux	Introcan, Allemagne	4254090B-Kétamine
	Sigma-Aldrich, Amérique	; K2753-Alcool
médical	Huichang,
	Shanghai Medical Instruments, Chine	WA2040-Cisailles
microscopiques	Shanghai Medical Instruments, Chine	WA1040-Pince
microchirurgicale	Shanghai Medical Instruments, Chine	WA3020-Électrocardiographe
	de sourisTechman, Chine	BL-420F-Porte-aiguilles
	Shanghai Medical Instruments, Chine	JC3202-plancher
d’opération	Chico, Chine	ZK-HJPT-PE-10
tube	Huamei,
	Merck, Amérique		1030001-Ventilateur
rongeurs	Shanghai Alcott Biotech, Chine	ALC-V8S-P	-
Stéréomicroscope	Aomei Industry, Chine	SZM0745-STL3-T3-Coussin
chauffant thermostatique chirurgical	Globalebio, Chine	GE0-20W-Triphenyltetrazolium
	chloride Servicebio, Chine	G1017-Xylazine
	Huamaike Biochemicals and Life Science Research Produducts, Chine	323004	-

Chine-Porte-micro-aiguilles Chine-Pentobarbital de