Formulation et caractérisation d’un système de transport de dopamine à base d’exosomes

Burçak Yavuz; Hakan Darici; Aslı Pınar Zorba Yildiz; Emrah Şefik Abamor; Murat Topuzoğullari; Melahat Bağirova; Adil Allahverdiyev; Erdal Karaoz

doi:10.3791/63624

Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.

Article de méthode

Formulation et caractérisation d’un système de transport de dopamine à base d’exosomes

3.7K vues

⸱

DOI :

10.3791/63624

⸱

4 avril 2022

Burçak Yavuz¹^,² , Hakan Darici³^,⁴^,⁵^,⁶ , Aslı Pınar Zorba Yildiz²^,⁷ , Emrah Şefik Abamor² , Murat Topuzoğullari² , Melahat Bağirova⁸ , Adil Allahverdiyev⁸ , Erdal Karaoz³^,⁴^,⁵^,⁶^,⁹

¹Vocational School of Health Services/İstanbul, Altinbas University, ²Chemical Metallurgy Faculty, Department of Bioengineering, Yildiz Technical University, ³Faculty of Medicine, Department of Histology & Embryology, Istinye University, ⁴3D Bioprinting Design & Prototyping R&D Center, Istinye University, ⁵Stem Cell and Tissue Engineering R&D Center, Istinye University, ⁶Medicine Faculty, Istinye University, ⁷Vocational School of Health Services, Istinye University, ⁸The V. Akhundov National Scientific Research Medical Prophylactic Institute, ⁹Center for Stem Cells and Regenerative Medicine (LivMedCell), Liv Hospital

Dans cet article

Résumé

Ici, nous avons cherché à obtenir une formulation par chargement dopaminergique des exosomes isolés de cellules souches issues des cellules souches mésenchymateuses gelées de Wharton. L’isolement et la caractérisation des exosomes, la charge du médicament dans les exosomes résultants et l’activité cytotoxique de la formulation développée sont décrits dans ce protocole.

Résumé

Les exosomes d’une taille comprise entre 40 et 200 nm constituent le plus petit sous-groupe de vésicules extracellulaires. Ces vésicules bioactives sécrétées par les cellules jouent un rôle actif dans la cargaison et la communication intercellulaires. Les exosomes se trouvent principalement dans les fluides corporels tels que le plasma, le liquide céphalo-rachidien, l’urine, la salive, le liquide amniotique, le colostrum, le lait maternel, le liquide articulaire, le sperme et l’acide pleural. Compte tenu de la taille des exosomes, on pense qu’ils peuvent jouer un rôle important dans les maladies du système nerveux central car ils peuvent traverser la barrière hémato-encéphalique (BHE). Par conséquent, cette étude visait à développer un système de nanotransporteurs à base d’exosomes en encapsulant la dopamine dans des exosomes isolés des cellules souches mésenchymateuses gelées de Wharton (WJ-MSCs). Les exosomes qui ont passé le processus de caractérisation ont été incubés avec de la dopamine. Les exosomes chargés en dopamine ont été recaractérisés en fin d’incubation. Les exosomes chargés de dopamine ont été étudiés dans des tests de libération de médicaments et de cytotoxicité. Les résultats ont montré que la dopamine pouvait être encapsulée avec succès dans les exosomes et que les exosomes chargés de dopamine n’affectaient pas la viabilité des fibroblastes.

Introduction

Les exosomes, des vésicules bioactives aux caractéristiques significatives, ont une taille comprise entre 40 nm et 200 nm. Les exosomes proviennent de la membrane cellulaire et se forment en raison de la libération des endosomes¹. Ces structures servent de communicateurs de cellule à cellule et interagissent avec les cellules voisines pour faciliter le transfert de molécules actives. Les exosomes peuvent être isolés à partir de nombreuses sources différentes. Il s’agit notamment des fluides corporels tels que le plasma, l’urine, le liquide céphalo-rachidien, la salive, ainsi que des lignées cellulaires cultivées dans des conditions in vitro....