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Research Article
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Erratum Notice
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Retraction Notice
The article Assisted Selection of Biomarkers by Linear Discriminant Analysis Effect Size (LEfSe) in Microbiome Data (10.3791/61715) has been retracted by the journal upon the authors' request due to a conflict regarding the data and methodology. View Retraction Notice
L’utilisation de porcs dans la recherche a augmenté ces dernières années. Néanmoins, les porcs sont caractérisés par une anatomie difficile des voies respiratoires. En démontrant comment effectuer une intubation endotrachéale guidée par endoscopie, le présent protocole vise à accroître davantage la sécurité des animaux de laboratoire afin d’éviter la souffrance animale et la mort inutile.
L’intubation endotrachéale est souvent une exigence de base pour la recherche translationnelle dans des modèles porcins pour diverses interventions qui nécessitent une voie respiratoire sécurisée ou des pressions de ventilation élevées. L’intubation endotrachéale est une compétence difficile, nécessitant un nombre minimum d’intubations endotrachéales réussies pour atteindre un taux de réussite élevé dans des conditions optimales, ce qui est souvent irréalisable pour les chercheurs non anesthésiologistes. En raison de l’anatomie spécifique des voies respiratoires porcines, on peut généralement supposer une voie respiratoire difficile. L’impossibilité d’établir une voie aérienne sûre peut entraîner des blessures, des événements indésirables ou la mort de l’animal de laboratoire. En utilisant une approche d’évaluation prospective, randomisée et contrôlée, il a été démontré que l’intubation endotrachéale assistée par fibre optique prend plus de temps, mais a un taux de réussite de premier passage plus élevé que l’intubation conventionnelle sans provoquer de baisses cliniquement pertinentes de la saturation en oxygène. Ce modèle présente un schéma posologique normalisé pour l’intubation endotrachéale guidée par endoscopie, fournissant une voie respiratoire sécurisée, en particulier pour les chercheurs qui sont inexpérimentés dans la technique d’intubation endotrachéale par laryngoscopie directe. Cette procédure devrait réduire au minimum la souffrance animale et les pertes inutiles d’animaux.
L’intubation endotrachéale est souvent une exigence de base pour la recherche translationnelle dans des modèles porcins pour diverses interventions qui nécessitent des voies respiratoires sécurisées ou des pressions de ventilation élevées (comme la ventilation pendant la réanimation cardiorespiratoire1 ou le syndrome de détresse respiratoire aiguë2) ou qui exigent que le flux sanguin cérébral ne soit pas compromis par la compression interne par des dispositifs des voies respiratoires supraglottiques3 , qui sont parfois multipliés comme solutions de remplacement dans le contexte d’une difficulté anticipée des voies respiratoires chez les porcs 4,5.
Alors que la physiologie pulmonaire des porcs présente des caractéristiques similaires à celles des humains6, la sécurisation des voies respiratoires est parfois beaucoup plus difficile7 en raison de différences spécifiques dans l’anatomie orotrachéale porcine. Le museau d’un porc a une ouverture étroite avec une très grande langue, le larynx est extrêmement mobile et l’épiglotte est relativement grande, avec une extrémité libre qui s’étend jusqu’au palais mou. Caudally, le larynx forme un angle obtus avec la trachée. Les cartilages aryténoïdes sont gros8. La partie la plus étroite des voies respiratoires se trouve au niveau sous-glottique9, comparable à l’anatomie des voies respiratoires des enfants10. Comme le larynx chez le porc est très mobile, il y a un risque que l’extrémité du tube endotrachéal passe par les cordes vocales mais que le larynx ne soit déplacé caudale que de plusieurs centimètres maximum, ce qui peut être confondu avec une intubation correcte 8,11. De plus, l’intubation œsophagienne est un risque courant lorsqu’il s’agit de la gestion des voies respiratoires porcines12.
Les taux d’intubations endotrachéales difficiles ou impossibles avec un impact négatif correspondant sur l’expérience ou une mortalité précoce n’ont pas été systématiquement enregistrés, mais plusieurs rapports de cas ont été publiés13,14. Chez l’homme, il est possible d’utiliser un endoscope d’intubation flexible dans le contexte d’une intubation conventionnelle étonnamment difficile15. Diverses fausses intubations précèdent souvent cette mesure. Ces tentatives d’intubation répétées sont associées à des événements indésirables chez l’homme16,17, en particulier des complications des voies respiratoires 18. De tels événements sont délétères chez les animaux d’essai puisque, dans le cas le plus simple, ils représentent une variable de confusion dans l’expérience; Dans le pire des cas, ils peuvent entraîner la perte inutile de l’animal.
La présente étude a développé un modèle basé sur les lignes directrices pour la gestion difficile des voies respiratoires chez les humains 15,19,20,21,22,23,24. Auparavant, une technique similaire a été décrite pour l’apprentissage de l’intubation par fibre optique dans des études humaines25,26. Le protocole présenté dans ce rapport vise à fournir un modèle d’intubation normalisé et facile à adapter qui permet également aux non-spécialistes des voies respiratoires d’effectuer une intubation endotrachéale réussie et sûre chez les porcs.
Les expériences de ce protocole ont été approuvées par le Comité national et institutionnel pour la protection des animaux (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz, Coblence, Allemagne; approbation n° G20-1-135). Les expériences ont été menées conformément aux directives ARRIVE. Dans l’ensemble, 10 porcs mâles anesthésiés (Sus scrofa domestica) pesant en moyenne 30 kg ± 2 kg et âgés de 12 à 16 semaines ont été utilisés pour la présente étude.
1. Préparation des animaux
2. Anesthésie et ventilation mécanique
3. Intubation endotrachéale
L’intubation endotrachéale a été réalisée sur 10 porcs mâles (âgés de 12 à 16 semaines, poids 30 kg ± 3 kg) dans le cadre d’une étude prospective, randomisée et contrôlée. Les porcs ont été randomisés en deux groupes : l’un était intubé par laryngoscopie conventionnelle (groupe IC) et l’autre groupe était intubé assisté par un endoscope à intubation flexible tel que décrit dans le protocole (groupe FIE). L’affectation de groupe a été faite en tirant des enveloppes scellées. L’enquêteur a été assigné au hasard sur une base quotidienne.
L’étude a été réalisée par des stagiaires en anesthésiologie ayant plus de 3 ans d’expérience en anesthésie, une connaissance approfondie de la gestion des voies respiratoires chez l’homme et moins de 7 mois d’expérience en intubation endotrachéale chez le porc, avec une infirmière anesthésique aidant à l’intubation et évaluant les données (n = 2, âge: 33 ans ± 1 an, expérience d’intubation endotrachéale chez l’homme: >1 000, intubation éveillée par fibre optique chez l’homme: >100).
Le groupe FIE a subi une intubation assistée par fibre optique comme décrit dans le protocole ci-dessus. Le groupe IC a été traité de manière identique au groupe FIE jusqu’à l’étape 3.2 du protocole. Après cela, le changement suivant a été apporté. Après avoir inséré le laryngoscope dans la vallecule épiglotte, l’examinateur a écarté l’épiglotte avec un tube endotrachéal, dans lequel un fil de guidage du tube avait été inséré, avec un léger mouvement de piqué du creux piriforme droit vers la gauche le long du palais mou. Par la suite, ce tube endotrachéal a été avancé entre les ligaments vocaux dans la trachée. Le fil de guidage a été retiré par l’assistant, le brassard du tube endotrachéal a été gonflé à l’aide d’une seringue de 10 ml et la ventilation mécanique a été mise en marche.
Si la saturation tombait en dessous de SpO2 93% ou si une malposition de l’œsophage se produisait, la tentative d’intubation était interrompue et la ventilation du masque était effectuée pendant 3 minutes. Après trois tentatives infructueuses, le praticien a dû changer la procédure. Le temps a été compté pour chaque essai à partir du début de la laryngoscopie.
Le critère d’évaluation principal était le succès de l’intubation dès la première tentative. Les critères d’évaluation secondaires étaient le délai jusqu’à l’intubation, mesuré comme le temps écoulé entre le début de la laryngoscopie et la détection du CO2 dans le ventilateur, la nécessité de modifier la procédure et l’évaluation des voies respiratoires à l’aide de l’échelle de pourcentage d’ouverture glottique (POGO).
Les analyses statistiques ont été effectuées à l’aide de logiciels disponibles sur le marché (voir le tableau des matières). La distribution normale a été examinée à l’aide du test de Kolmogorov-Smirnoff28. Si une distribution normale était déterminée, les différences entre les groupes étaient analysées à l’aide de tests t d’échantillons indépendants29 ou du test U de Mann-Whitney30 pour la version non paramétrique. Les données sont présentées sous forme de moyenne (± écart-type). Les corrélations des données à l’échelle ordinale ont été examinées à l’aide du coefficient de corrélation31 de Spearman. Un seuil de signification de p < 0,05 a été supposé. Tous les essais ont été effectués avec une intention exploratoire; Par conséquent, les valeurs de p sont descriptives. Néanmoins, p < 0,05 a été accepté comme indicateur de signification statistique.
Le groupe FIE a montré une tendance vers un taux de réussite plus élevé à la première tentative que le groupe IC (100% contre 60%); dans l’ensemble, moins de tentatives d’intubation ont été nécessaires dans le groupe EIF (1,0 ± 0 vs 1,4 ± 0,548, p = 0,310) (figure 1). En aucun cas, la saturation n’est tombée en dessous de 93%, il n’a donc pas été nécessaire de changer la procédure. Une deuxième tentative d’intubation a été nécessaire parce que le passage du rétrécissement sous-glottique n’était pas possible en douceur (n = 1) et en raison d’une malposition œsophagienne (n = 1).
Dans l’ensemble, les tentatives d’intubation réussies ont pris significativement plus de temps dans le groupe EIF que dans le groupe IC (71,2 s ± 18,336 s contre 36,8 s ± 18,472 s, p = 0,018). En général, la glotte était facile à visualiser avec une bonne visibilité (POGO : 77 % ± 27,1 %), sans différence entre les groupes (FIE 86 % ± 26,077 % vs IC 68 % ± 27,749 %, p = 0,513). Dans le groupe d’intubation conventionnelle (IC), davantage de tentatives d’intubation endotrachéale étaient nécessaires, mais cela n’était pas statistiquement significatif (1,0 ± 0 vs 1,4 ± 0,548, p = 0,310). Dans le groupe d’intubation guidée par endoscopie (EIF), il a fallu beaucoup plus de temps pour détecter le CO2 dans le ventilateur (71,2 s ± 18,336 s contre 36,8 s ± 18,472 s, p = 0,018) (Figure 2).

Figure 1 : Nombre de tentatives d’intubation dans la comparaison de groupe. Pour le groupe qui a été intubé à l’aide d’un endoscope d’intubation flexible, chaque tentative d’intubation a réussi; Dans le groupe qui a été intubé de manière conventionnelle, il a fallu en moyenne 1,4 tentative avant que le tube endotrachéal puisse être placé correctement. Les barres d’erreur indiquent l’écart type. n = 5 (pour chaque groupe). Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 2 : Temps écoulé jusqu’à la détection du CO2 dans la comparaison de groupe. Pour le groupe qui a été intubé à l’aide d’un endoscope à intubation flexible, il a fallu beaucoup plus de temps avant que le CO2 en fin de marée puisse être détecté, représenté par la moyenne et l’écart-type. n = 5 (pour chaque groupe). Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
L’endoscope à intubation flexible et ses accessoires ont été fournis sans condition par le fabricant à des fins de recherche uniquement. Les auteurs ne déclarent plus de conflits d’intérêts financiers ou autres.
L’utilisation de porcs dans la recherche a augmenté ces dernières années. Néanmoins, les porcs sont caractérisés par une anatomie difficile des voies respiratoires. En démontrant comment effectuer une intubation endotrachéale guidée par endoscopie, le présent protocole vise à accroître davantage la sécurité des animaux de laboratoire afin d’éviter la souffrance animale et la mort inutile.
Les auteurs tiennent à remercier Dagmar Dirvonskis pour son excellent soutien technique.
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