Enregistrements EEG topographiques de potentiels évoqués visuels chez la souris à l’aide d’électrodes à couche mince multicanaux

Résumé

Le présent protocole décrit une procédure simple pour acquérir et analyser la topographie des potentiels évoqués visuels épicrâniens avec 32 électrodes à couche mince multicanaux chez la souris.

Résumé

Les potentiels évoqués visuels (VEP) permettent de caractériser la fonction visuelle dans des modèles murins précliniques. Diverses méthodes existent pour mesurer les VEP chez la souris, de l’EEG non invasif, des électrodes uniques sous-cutanées et de l’ECoG aux enregistrements intracorticaux multicanaux du cortex visuel entièrement invasifs. Il peut être utile d’acquérir une caractérisation topographique globale au niveau de l’EEG des réponses visuelles avant les mesures locales de microélectrodes intracorticales dans des contextes expérimentaux aigus. Par exemple, un cas d’utilisation consiste à évaluer les changements intermodaux globaux de la topographie VEP dans des modèles de surdité avant d’étudier ses effets à un niveau intracortical local. L’EEG épicraniel multicanal est une méthode robuste pour acquérir une telle mesure globale de l’activité visuelle corticale. L’EEG épicranial multicanaux fournit des résultats comparables grâce à une approche standardisée et cohérente pour, par exemple, identifier les changements intermodaux, pathologiques ou liés à l’âge dans la fonction visuelle corticale. La présente étude présente une méthode permettant d’obtenir la distribution topographique des VEP évoqués par flash avec un réseau d’électrodes EEG à couche mince à 32 canaux chez des souris anesthésiées. Combinée à une analyse dans le domaine temporel et fréquentiel, cette approche permet une caractérisation et un dépistage rapides de la topographie et des propriétés visuelles de base de la fonction visuelle corticale de la souris, qui peuvent être combinées avec divers contextes expérimentaux aigus.

Introduction

Les souris sont un modèle préclinique des processus dégénératifs de la vision et des maladies ophtalmologiques 1,2,3,4. Les potentiels évoqués visuels (VEP) sont couramment utilisés pour mesurer la fonction visuelle corticale et, par exemple, pour évaluer la dégénérescence visuelle dans des modèles pathologiques ^5,6. La latence VEP, le temps de conduction, l’amplitude, les caractéristiques multifocales ou l’acuité spatiale des p....

Protocole

Tous les animaux ont été manipulés et logés conformément aux normes allemandes (TierSchG, BGBl. I S. 1206, 1313) et de l’Union européenne (STE 123 ; Directive 2010/63/UE) pour la recherche sur les animaux. Les expériences sur les animaux ont été approuvées par les autorités allemandes (Office du Land de Basse-Saxe pour la protection des consommateurs et la sécurité alimentaire, LAVES) et ont été surveillées par le responsable du bien-être animal de l’université. Une souris mâle C57BL/6J âgée de 3 mois a été utilisée pour la présente étude.

1. Détails sur l’animal

1. Effectuez les m....

Résultats

L’enregistrement des potentiels évoqués visuels avec l’EEG multicanal permet d’évaluer la topographie des amplitudes, des latences ou des composantes de fréquence VEP chez la souris. La figure 2A montre un exemple de topographie VEP évoquée par flash enregistrée avec un EEG épicraniel à 32 canaux d’une souris mâle C57BL/6J âgée de 3 mois. L’activité visuelle évoquée la plus forte se produit dans la région occipitale au-dessus du cortex visuel.

Discussion

Cet article décrit une méthode d’enregistrement de l’EEG multicanal épicrânien avec des électrodes à couche mince et comment acquérir une représentation topographique cohérente des potentiels évoqués visuels chez la souris. Ici, nous avons montré de manière exemplaire la stimulation par flash binoculaire, mais cette approche peut également être appliquée avec d’autres types de stimuli visuels (c’est-à-dire monoculaires, réseaux spatiaux, champ visuel focal) en utilisant, par exemple, un .......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Bepanthen 5 % Dexpantheol	Bayer		Gel ophtalgique
Logiciel guépard 5.11	Neuralnyx	Version 5.11	Logiciel d’enregistrement des signaux neurophysiologiques
Digital Lynx SX	Neuralynx	Digital Lynx 16SX	Système d’enregistrement
ECG amplificateur différentiel	Otoconsult	WDA2 V1.0
Rasoir électrique	Aesculap	GT420
Porte-électrode	TSE Systems	430005-HE
Lampe d’examen	Heine	HL 5000	Lampe à source de lumière froide
Coussin chauffant + Système de contrôle de la température	CWE	TC-1000 Souris
Histoacryl 0,5 mL	B.Braun		Adhésif tissulaire
Lampe chauffante infrarouge  ;	Sanitas	SIL 06
Kétamine 10 %  ;	WDT		Ketaminhydrochlorid
LED stroboscope  ;	Monarch	Nova Strobe PBL	Stimulation visuelle
Matlab 2021a	The Mathworks	2021a	Contrôle et analyse des stimuli
Moria Vessel Clamp	Fine Science Tools	18320-11
Électrode EEG de souris  ;	NeuroNexus	H32 (réticulaire)	Électrode EEG à 32 canaux. Épaisseur : 20 &mu ; m; longueur : 8,6 mm ; Largeur 6,8 mm. Sites Platine : 500 &mu ; m de diamètre Cadre
de souris  ;			sur mesure Informations disponibles sur demande
Dispositif d’E/S multifonction	National Instruments	PCIe-6353 avec BNC 2090A	Génération, sortie et déclenchement de stimulus analogiques
NaCl 0,9 %	B.Braun		Neuralynx HS36 isotonique, stérile et apyrogène
	Neuralynx	HS-36	Headstage
Connecteur de sonde Neuronexus	Neuralynx	ADPT-HS36-N2T-32A	Connecteur d’électrode
Oscilloscope	Tektronix	TDS 2014B
Progent Nettoyant intensif	Menicon		Solution décapante et désinfectante pour lentilles rigides perméables aux gaz
Enregistrement PC  ;	HP	HP Z800	Recording PC
Rimadyl (Carprofène)	Zoetis		Carprofène
Huile de silicium M 1000	Carl Roth	4045.1
Fil d’argent  ;	Science Products	AG-8W	Diamètre 203 µ ; m; ECG et électrode de référence
Chambre d’insonorisation	Acoustique
Micromanipulateur stéréotaxique	TSE Systems	430005-M/P	Pour le placement des électrodes EEG
PC de stimulation Dell		Dell Precision T5810	PC de stimulation
Microscope chirurgical	Zeiss	Op-Mi
Bande chirurgicale	3M	1527-0	1,25 cm x 9,1 m
Thilo-Tears 3 mg/g	Alcon Pharma GmbH		Gel ophtalgique
Vaselin Lichtenstein	Winthrop		Pommade à la vaseline blanche
Xylazin 2 %  ;   ;	Bernburg		Xylazinehydrochlorure
Xylocaïne en spray (10 mg/bouffée)	Aspen		Lidocaïne