Utilisation d’une électrode bipolaire pour créer un modèle murin d’épilepsie du lobe temporal par allumage électrique de l’amygdale

Summary

L’amygdale joue un rôle clé dans l’épilepsie du lobe temporal, qui provient et se propage à partir de cette structure. Cet article fournit une description détaillée de la fabrication d’électrodes cérébrales profondes avec des fonctions d’enregistrement et de stimulation. Il introduit un modèle d’épilepsie du lobe temporal médian provenant de l’amygdale.

Abstract

L’amygdale est l’une des origines les plus courantes des crises, et le modèle murin de l’amygdale est essentiel pour l’illustration de l’épilepsie. Cependant, peu d’études ont décrit le protocole expérimental en détail. Cet article illustre l’ensemble du processus de fabrication de modèles d’épilepsie par allumage électrique de l’amygdale, avec l’introduction d’une méthode de fabrication d’électrodes bipolaires. Cette électrode peut à la fois stimuler et enregistrer, réduisant ainsi les lésions cérébrales causées par l’implantation d’électrodes séparées pour la stimulation et l’enregistrement. Pour l’enregistrement à long terme par électroencéphalogramme (EEG), des bagues collectrices ont été utilisées pour éliminer l’interruption de l’enregistrement causée par les enchevêtrements de câbles et les chutes.

Après stimulation périodique (60 Hz, 1 s toutes les 15 min) de l’amygdale basolatérale (AP : 1,67 mm, L : 2,7 mm, V : 4,9 mm) pendant 19,83 ± 5,742 fois, un allumage complet a été observé chez six souris (défini comme l’induction de trois épisodes continus de grade V classés selon l’échelle de Racine). Un EEG intracrânien a été enregistré tout au long du processus d’allumage, et un écoulement épileptique dans l’amygdale d’une durée de 20 à 70 s a été observé après l’allumage. Par conséquent, il s’agit d’un protocole robuste pour modéliser l’épilepsie provenant de l’amygdale, et la méthode convient pour révéler le rôle de l’amygdale dans l’épilepsie du lobe temporal. Cette recherche contribue à de futures études sur les mécanismes de l’épilepsie mésiale du lobe temporal et de nouveaux médicaments antiépileptogènes.

Introduction

L’épilepsie du lobe temporal (TLE) est le type d’épilepsie le plus répandu et présente un risque élevé de conversion en épilepsie pharmacorésistante. La chirurgie, telle que l’amygdalohippocampectomie sélective, est un traitement efficace pour le TLE, et l’épileptogenèse et l’ictogenèse de la maladie sont toujours à l’étude ^1,2. Il a été démontré que la pathogenèse du TLE se produit non seulement dans l’hippocampe, mais aussi largement dans l’amygdale ^3,4. Par exemple, la sclérose en amygdale et l’élargissement de l’amygdale ont été fréquemment signalé....

Protocol

Cette expérience a été approuvée par le Comité d’éthique des animaux expérimentaux de l’hôpital Xuanwu, Capital Medical University. Toutes les souris ont été gardées dans le laboratoire animalier de l’hôpital Xuanwu, Capital Medical University. Ce protocole est divisé en quatre parties. Les deux premières parties présentent la méthode de construction de l’électrode et du circuit électrique à l’aide d’une bague collectrice pour connecter les électrodes et l’équipement d’enregistrement/stimulation EEG. La troisième partie décrit la méthode opératoire d’implantation des électrodes, et la quatrième partie présente les paramètres d’enregistrement et de stimulation EEG util....

Results

L’électrode et le circuit permettent d’enregistrer l’EEG et de fonctionner comme une stimulation (Figure 1) ; Cette configuration évite la complexité d’implanter des électrodes d’enregistrement et de stimulation séparément et minimise les dommages au tissu cérébral. L’application de bagues collectrices permet la connexion d’électrodes avec tous les types d’appareils.

Nous avons pratiqué une chirurgie d’implantation d’électrodes sur six souris C57BL/6 mâles adultes.......

Discussion

L’épilepsie est un groupe de maladies aux manifestations multiples et aux causes diverses¹⁸; Il convient de noter qu’aucun modèle unique ne peut être utilisé pour tous les types d’épilepsie et que les chercheurs doivent choisir un modèle approprié pour leur étude spécifique. La présente étude présente l’une des méthodes de fabrication d’électrodes les plus accessibles. Différentes parties de cette méthode peuvent être ajustées pour s’adapter à différentes conditions expérimentales.

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Alexa Fluor 488-conjugué Donkey anti-Rabbit	IgG invitrogen	A-21206
c-Fos anticorps		ab222699
Foret crânien	SANS	SA302
ciment dentaire	NISSIN
EEG équipement d’enregistrement et de stimulation	Neuracle Technology (Changzhou) Co., Ltd	NSHHFS-210803
fil d’étain sans plomb	BAKON
Embase à broches/embase femelle	Espacement XIANMISI		de 1,27 mm
Fil d’argent	A-M systems	786000
Bague collectrice	Senring Electronics Co., Ltd	SNM008-04
Fil de tungstène	A-M systems	796000
fil multi-support ultrafin	Shenzhen Chengxing fil et câble	UL10064-FEP
équipement de soudage	BAKON	BK881