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Imagerie chimique à haute résolution spatiale des infections associées aux implants avec imagerie chimique par luminescence excitée par rayons X à travers les tissus

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DOI :

10.3791/64252

30 septembre 2022

Dans cet article

Résumé

Nous présentons ici un protocole de détection optique haute résolution d’informations chimiques autour de dispositifs médicaux implantés avec imagerie chimique par luminescence excitée par rayons X (XELCI). Cette nouvelle technique d’imagerie est développée dans notre laboratoire qui permet d’étudier la biochimie des infections associées aux implants.

Résumé

Les infections microbiennes associées aux dispositifs médicaux implantables sont une préoccupation majeure dans l’échec de la fixation des fractures. Un diagnostic précoce d’une telle infection permettra une éradication réussie avec des antibiotiques sans frais supplémentaires pour une deuxième chirurgie. Nous décrivons ici XELCI comme une technique avec une résolution élevée des rayons X, une spécificité d’implant et une sensibilité chimique aux concentrations chimiques d’images non invasives près de la surface des dispositifs médicaux implantés. Les dispositifs sont recouverts de surfaces de rapport chimique. Cette surface chimiquement sensible se compose de deux couches enduites d’un dispositif médical implantable; une couche sensible au pH (bleu de bromothymol ou hydrogel incorporé au vert de bromocrésol) qui est recouverte d’une couche scintillatrice émettant de lalumière rouge (Gd2O2S: Eu) pour la surveillance. Un faisceau de rayons X focalisés irradie une tache sur l’implant, et la lumière rouge générée par le scintillateur (avec des pics de 620 nm et 700 nm) est transmise à travers la couche de détection qui modifie le rapport spectral en fonction du pH. Une image est générée en scannant le faisceau de rayons X à travers l’implant et en mesurant le rapport spectral de la lumière traversant le tissu point par point. Nous avons utilisé cette technique d’imagerie pour surveiller les infections associées aux implants précédemment sur la surface osseuse du fémur avec un capteur de plaque implantable modifié. Nous étudions maintenant les changements de pH qui se produisent à la suite d’infections tibiales intramédullaires par bâtonnet. Deux types différents de tiges intramédullaires sont utilisés dans les études pré-pilotes sur les lapins, et nous avons appris que la technique XELCI pourrait être utilisée pour surveiller tout changement chimique qui se produit non seulement à la surface de l’os, mais aussi à l’intérieur de l’os. Ainsi, cela permet une imagerie non invasive, à haute résolution spatiale et à faible pH local de fond pour étudier la biochimie des infections associées aux implants.

Introduction

Aux États-Unis, environ 2 millions de dispositifs de fixation des fractures sont insérés chaque année, et 5% à 10% d’entre eux conduisent à des infections associées aux implants1. Ces infections sont plus difficiles à traiter avec des antibiotiques à des stades ultérieurs en raison de l’hétérogénéité et de la nature résistante aux antibiotiques des biofilms 2,3. Si elles sont diagnostiquées tôt, les infections peuvent être traitées avec des antibiotiques et un débridement chirurgical pour éviter des coûts médicaux supplémentaires pour une deuxième chirurgie visant à remplacer le matérie....

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Protocole

Cette procédure suit les protocoles d’utilisation des animaux approuvés par le Comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux (IACUC) de l’Université de Clemson. Les expériences sont menées conformément au Comité de biosécurité (IBC) et au Comité de radioprotection (RSC) de l’Université de Clemson, ainsi qu’aux directives et réglementations pertinentes.

REMARQUE : un organigramme de l’exécution d’une analyse XELCI est illustré ci-dessous à la figure 5 , suivi d’une description détaillée étape par étape de la procédure d’imagerie.

1. Initialiser le système et acquéri....

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Résultats

Comme étude préliminaire, nous avons imagé le capteur de tige intramédullaire dans un tibia alésé d’un cadavre de lapin14. Le capteur comporte trois régions distinctes : la région de référence, la région pH 8 (pH basique) et la région pH 4 (pH acide). La région de référence est la particule scintillatrice(Gd2O2S:Eu) incorporée dans un film époxy rugueux. Les régions de pH acides et basiques distinctives représentent les situations infectées et non infectées à l’intérieur du c.......

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Discussion

Pour être en mesure de détecter et d’étudier rapidement les infections orthopédiques associées aux implants afin d’éviter les complications de l’ostéomyélite et des interventions chirurgicales secondaires, nous avons introduit XELCI comme une nouvelle technique d’imagerie fonctionnelle. Il est comparable aux techniques actuellement disponibles pour la surveillance du pH à travers les tissus.

Lors du positionnement de l’échantillon pour l’imagerie, nous utilisons une traverse laser connectée à .......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs ne revendiquent aucun conflit d’intérêts.

Remerciements

Les auteurs tiennent à remercier l’Université de Clemson, COMSET et Clemson SC BioCRAFT. La configuration XELCI a été initialement développée avec des fonds de NSF CAREER CHE 12255535 et plus tard par NIH NIAMS R01 AR070305-01.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Coude à 90 degrésProduit dans le laboratoire de technologie Hilltop, 51 Parker, Irvine, CA
Bromo Cresol GreenSigma-Aldrich45ZW10
Bromo Thymol BlueSigma76-59-5
ElectraCOOL Advanced thermoelectric coolplate Pollock industries, White River, VT, États-UnisTCP 50
ÉthanolBeantown Chemical, 9 Sagamore Park Road
Hudson, NH 03051
64-17-5
Oxysulfure de gadolinium Particules dopées à l’europium (Gd2O2S :Eu)-~8.0 µ ; mPhosphor Technologies Inc., Stevenage, AngleterreUKL63/N-R1
LabVIEWNational Instruments, Austin, TX
Modèle de platine verticale linéaire motorisée (pour l’axe Z)Motion Control, Smithtown, NY, États-UnisAT10-60
National instruments c-DAQ 9171National Instruments, Austin, TXNI cDAQ&trade ;-9171
Lampe acrylique monobloc GuideProduit au Hilltop Technology Laboratory, 51 Parker, Irvine, CA
Tampon pH 4VWR BDH ChemicalsBDH5024
Tampon pH 8VWR BDH ChemicalsBDH5060
Phosphate Buffer SolutionMP Biomedicals, Irvine, CA. États-Unis2810305
Tubes photomultiplicateurs Modèle P25PC-16SensTech, Surrey, Royaume-UniModèle P25PC-16
Staphylococcus aureus subsp. aureus RosenbachAmerican Type Culture Collection (ATCC), Manassas, VAATCC 25923
Tryptic Soy AgarTeknova, Hollister, CA, USA nbsp ; T0520
Bouillon de soja tryptiqueEMD Millipore, Burlington, MA, États-Unis1005255000
Source de rayons X-iMOXSInstitute for Scientific Instruments GmbH, Berlin, Allemagne
X,Y platine motorisée-30 cm x 15 cm x 6 cm de voyageThorlabs Inc., Newton, NJ, États-UnisLTS300 et LTS150

Références

  1. Arciola, C. R., Alvi, F. I., An, Y. H., Campoccia, D., Montanaro, L. Implant infection and infection resistant materials: A mini review. International Journal of Artificial Organs. 28 (11), 1119-1125 (2005).
  2. Renick, P., Tang, L. Device-related infections. Racing for the Surface. Li, B., Moriarty,....

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Mots-clés

Imagerie par luminescence aux rayons Ximagerie du pHmission de scintillateurtige intram dullaireculture bact rienneStaphylococcus aureusdensit optique

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