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Article de méthode

Génération d’un modèle de décidualisation artificielle de souris avec ovariectomie pour la recherche sur la décidualisation de l’endomètre

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DOI :

10.3791/64278

27 juillet 2022

* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Ici, nous décrivons la méthode de génération d’un modèle de décidualisation artificielle à l’aide de la souris ovariectomisée, une expérience classique de décidualisation de l’endomètre dans le domaine de la recherche sur la décidualisation de l’endomètre.

Résumé

La décidualisation de l’endomètre est un processus de différenciation unique de l’endomètre, étroitement lié à la menstruation et à la grossesse. L’altération de la décidualisation entraîne divers troubles de l’endomètre, tels que l’infertilité, les fausses couches récurrentes et les naissances prématurées. Le développement et l’utilisation du modèle de décidualisation de l’endomètre dans les études sur la reproduction sont depuis longtemps un point culminant pour les chercheurs en reproduction. La souris a été largement utilisée dans l’étude de la reproduction et de la décidualisation. Il existe trois modèles murins bien établis en ce qui concerne la décidualisation, à savoir la décidualisation naturelle de grossesse (NPD), la décidualisation artificielle (AD) et la décidualisation in vitro (IVD). Parmi eux, la MA est considérée comme un modèle fiable pour la décidualisation de la souris, facile à mettre en œuvre et proche du NPD. Cet article se concentre sur une méthode modifiée du processus de génération et d’application du modèle de décidualisation artificielle de la souris avec ovariectomie pour éviter les effets ovariens, ce qui peut obtenir des résultats hautement reproductibles avec de petites variances au sein du groupe. Cette méthode fournit un modèle animal bon et fiable pour l’étude de la décidualisation de l’endomètre.

Introduction

Avec le développement de la technologie de procréation assistée, le taux de grossesse clinique actuel de fécondation in vitro et de transfert d’embryons (FIV-ET) a atteint ou même dépassé celui de la grossesse naturelle. Malgré cela, de nombreuses patientes en pratique clinique de procréation assistée subissent encore de multiples transferts d’embryons, mais ne parviennent pas à obtenir la grossesse souhaitée. Cependant, son mécanisme moléculaire spécifique n’est pas encore clair, de sorte que l’intervention clinique est inefficace, ce qui est l’un des défis importants auxquels est confrontée la médecine de la reproduction 1,2

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Protocole

Toutes les expériences sur les animaux décrites ont été approuvées par le Comité sur l’utilisation et le soin des animaux (n ° 20171202) de l’hôpital affilié Drum Tower de la faculté de médecine de l’Université de Nanjing. Toutes les opérations suivent les directives appropriées de l’agence de soin et d’utilisation des animaux et les lignes directrices nationales.

REMARQUE : Les souris ont été élevées dans un environnement exempt d’agents pathogènes spécifiques (FPS), avec une température de 22 °C ± 1 °C, une humidité relative de 50 % ± 1 %, un cycle lumière/obscurité de 12 h/12 h et un accès gratuit à la nourriture et à l’eau.

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Résultats

Les index du modèle de décidualisation de la souris comprennent la morphologie générale de l’utérus, le rapport de masse de l’utérus décidualisé et non décidualisé, la morphologie histologique de l’endomètre et le niveau d’expression des molécules marqueurs de décidualisation. La morphologie générale de l’utérus décidualisé artificiel de souris induite par l’huile est plus proche de celle de l’utérus pendant la grossesse. Le corps utérin devient épais et la cavité utérine devient plus petite que le côté non induit. Le vo.......

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Discussion

La décidualisation chez la souris est un processus spontané dépendant de la présence d’embryons, ce qui est différent de l’homme. Cependant, il a été constaté que la stimulation artificielle telle que l’injection utérine de billes de verre et la lacération utérine peuvent induire la décidualisation de l’endomètre au lieu des embryons. En outre, les chercheurs ont constaté que de nombreux facteurs pouvaient induire une décidualisation ou participer à la décidualisation, tels que l’injection d’hormones stéroïdes, de prosta.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Les auteurs souhaitent remercier la Fondation nationale des sciences de la nature de Chine (82001629, XQS), le Programme pour les jeunes de la Fondation des sciences naturelles de la province du Jiangsu (BK20200116, XQS) et le financement de la recherche postdoctorale de la province du Jiangsu (2021K277B, XQS).

....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Complément hormonalEstrogenSigmaE2758
ProgestéroneSigmaP0130Supplément hormonal
Huile de sésame  ;SigmaS3547Supplément hormonal
Pentobarbital sodique  ;Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd.Anesthésie
Meloxicam injectionQilu Animal Health Products Co., LtdAnalgésie
phophatase alcaline (méthode de couplage kaplow/azo)SolarbioG1480Coloration alcaline à la phophatase
EosinServicebioG1005-2Coloration HE
HématoxylineServicebioG1005-1Coloration HE
ChamQ Universal SYBR qPCR Master MixVazymeQ711-02qPCR
70 % éthanolLirconZH1120090Désinfecter
IodophorRunzekangRZK-DFDésinfecter
Erythromycine Pommade oculaireGuangzhou BaiyunshanSouris globe oculaire protéger
4-0 sutureEthiconW329Suture d’incision
10 % formolYuluL25010118Tissue fix
Température de coupe optimale ComposéSakura4583Ssection
Réactif de trizolAmbion15596018qPCR
Kit de coloration à la

Références

  1. Carson, S. A., Kallen, A. N. Diagnosis and management of infertility: A review. JAMA. 326 (1), 65-76 (2021).
  2. Yatsenko, S. A., Rajkovic, A. Genetics of human female infertility dagger. Biology of Reproduction. 101 (3), 549-566 (2019).
  3. Sang, Y., Li, Y., Xu, L., Li, D., Du, M.

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Réimpressions et autorisations

Mots-clés

Mod le murinchirurgie d ovariectomieinjection dans la corne ut rinesuppl mentation hormonalecoloration l h matoxyline et l osineactivit de la phosphatase alcalinetroubles endom triauxinjection d ad novirus