Modèle animal de poisson zèbre pour l’étude des réactions allergiques en réponse aux biomolécules de salive des tiques

Résumé

Ici, le poisson zèbre (Danio rerio) est utilisé comme modèle pour étudier les réactions allergiques et les réponses immunitaires liées au syndrome alpha-Gal (AGS) en évaluant les réactions allergiques à la salive des tiques et à la consommation de viande de mammifère.

Résumé

Les tiques sont des arthropodes vecteurs qui causent des maladies par transmission d’agents pathogènes et dont les piqûres pourraient être liées à des réactions allergiques ayant un impact sur la santé humaine dans le monde entier. Chez certaines personnes, des taux élevés d’anticorps anti-immunoglobuline E dirigés contre le glycane Galα1-3Galβ1-(3)4GlcNAc-R (α-Gal) ont été induits par des piqûres de tiques. Les réactions anaphylactiques médiées par les glycoprotéines et les glycolipides contenant le glycane α-Gal, présent dans la salive des tiques, sont liées au syndrome alpha-Gal (AGS) ou à l’allergie à la viande chez les mammifères. Le poisson zèbre (Danio rerio) est devenu un modèle vertébré largement utilisé pour l’étude de différentes pathologies. Dans cette étude, le poisson zèbre a été utilisé comme modèle pour l’étude des réactions allergiques en réponse à la consommation de viande de α-Gal et de mammifères car, comme les humains, ils ne synthétisent pas ce glycane. À cette fin, les modèles comportementaux et les réactions allergiques hémorragiques de type anaphylactique en réponse à la salive de tiques Ixodes ricinus et à la consommation de viande de mammifère ont été évalués. Cette approche expérimentale permet d’obtenir des données valides qui soutiennent le modèle animal du poisson zèbre pour l’étude des allergies transmises par les tiques, y compris l’AGS.

Introduction

Les tiques sont des vecteurs d’agents pathogènes qui causent des maladies et sont également la cause de réactions allergiques, affectant la santé des humains et des animaux dans le monde^{entier 1,2}. Lors de l’alimentation des tiques, les biomolécules contenues dans la salive des tiques, en particulier les protéines et les lipides, facilitent l’alimentation de ces ectoparasites, évitant ainsi les défenses de l’hôte³. Certaines biomolécules salivaires avec des modifications du glycane Galα1-3Galβ1-(3)4GlcNAc-R (α-Gal) entraînent la production d’anticorps IgE anti-α-Gal élevés après la piqû....

Protocole

Toutes les méthodes décrites ici ont été approuvées par le Comité d’éthique de l’expérimentation animale de l’Université de Castille-La Manche dans le cadre de l’étude « Évaluation de la réponse immunitaire au vaccin inactivé contre M. bovis et provocation avec M. marinum dans le numéro de modèle du poisson zèbre PR-2017-05-12 ».

Les tiques ont été obtenues à partir de la colonie de laboratoire, où des échantillons représentatifs de tiques de la colonie ont été testés par PCR pour les agents pathogènes communs des tiques afin de confirmer l’absence d’agents pathogènes, et conservés à l’Institut de parasitologie, Centre de ....

Résultats

Le protocole présenté ici est basé sur plusieurs aspects d’expériences précédemment publiées^27,30 et de résultats réalisés dans notre laboratoire où le modèle de poisson zèbre est établi et validé pour l’étude de l’AGS et de la réponse immunitaire au α-Gal car les humains et les poissons-zèbres ne synthétisent pas cette molécule¹³. Ce modèle permet la caractérisation et l’évaluation d’une variété de réactions allergiques résultant de la ré.......

Discussion

Le poisson zèbre est un modèle rentable et facile à manipuler qui a également été un outil très pratique pour l’étude des mécanismes moléculaires de la réponse immunitaire, des maladies pathogènes, des tests de nouveaux médicaments, de la vaccination et de la protection contre les infections^33,34,35. L’étude sur le comportement du poisson zèbre est utile car des études antérieures ont montré que certaines espèces de poissons res.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Tube de 1,5 mL	VWR	525-0990
All Prep DNA/RNA	Qiagen	80284
Installations
Kit de dosage des protéines BCA  ;	Thermo Fisher Scientific	23225
Kit de disection	VWR	631-1279
Nourriture pour chiens - Rouge Classic	Acana
Plaques ELISA-96 puits	Thermo Fisher Scientific	10547781
Gala1-3Gal-BSA 3 (&alpha ;-Gal)  ;	Dextra	NGP0203
iScript Reverse Transcription Supermix	Supermix 1708840
Seringues d’un microlitre	Hamilton	7638-01
Lecteur de plaques	tout
Phosphate saline tamponnée	Sigma	P4417-50TAB
chlorhydrate de pilocarpine  ;	Sigma	P6503
Pointe de pipette P10  ;	VWR	613-0364
Pointe de pipette P1000	VWR	613-0359
Poisson tropical alimentaire de qualité supérieure	DAPC
Sponge Animal Holder  ;			Fabriqué à partir de mousse de rebut,
Stéréomicroscope	n’importe quel
thermocycleur, PCR en temps réel	, n’importe quel
méthanesulfonate de tricaïne (MS-222)	Sigma	E10521

aquatiques,