Dissection de souris du système nerveux central et périphérique entier

Krystina Rhéaume; Zhiguo Chen; Yong Wang; Camille Plante; Dhanushka Hewa Bostanthirige; Maude Lévesque; Sameh Geha; Lu Q. Le; Jean-Philippe Brosseau

doi:10.3791/64974

Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.

Article de méthode

Dissection de souris du système nerveux central et périphérique entier

11K vues

⸱

DOI :

10.3791/64974

⸱

24 février 2023

Krystina Rhéaume^*¹ , Zhiguo Chen^*² , Yong Wang^*² , Camille Plante¹ , Dhanushka Hewa Bostanthirige¹ , Maude Lévesque¹ , Sameh Geha³^,⁴ , Lu Q. Le²^,⁵^,⁶^,⁷ , Jean-Philippe Brosseau¹^,⁴

¹Department of Biochemistry and Functional Genomics, Université de Sherbrooke, ²Department of Dermatology, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ³Department of Pathology, Université de Sherbrooke, ⁴Centre de Recherche du Centre Hospitalier de Universitaire de Sherbrooke, Université de Sherbrooke, ⁵Simmons Comprehensive Cancer Center, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ⁶UTSW Comprehensive Neurofibromatosis Clinic, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas, ⁷Hamon Center for Regenerative Science and Medicine, University of Texas Southwestern Medical Center at Dallas

^* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Ici, nous présentons un protocole pour compléter la dissection des systèmes nerveux central et périphérique de souris. Les tissus disséqués sont analysés plus en détail dans des applications en aval, telles que la prise de photos grossières ou l’histologie.

Résumé

Les modèles animaux représentent le cheval de bataille du domaine des neurosciences. Malgré cela, il n’existe toujours pas aujourd’hui de protocole étape par étape pour disséquer un système nerveux complet de rongeur, ni de schéma complet le représentant qui soit disponible gratuitement. Seules des méthodes pour prélever le cerveau, la moelle épinière, un ganglion spécifique de la racine dorsale et le nerf sciatique (séparément) sont disponibles. Ici, nous fournissons des images détaillées et un schéma du système nerveux murin central et périphérique. Plus important encore, nous décrivons une procédure robuste pour effectuer sa dissection. L’étape de pré-dissection de 30 minutes permet d’isoler le système nerveux intact à l’intérieur de la vertèbre avec des muscles exempts de viscères et de peau. Une dissection de 2 à 4 heures est suivie sous un microscope de micro-dissection pour exposer la moelle épinière et les nerfs thoraciques, et enfin décoller tout le système nerveux central et périphérique de la carcasse. Ce protocole représente une avancée significative dans l’étude de l’anatomie et de la physiopathologie du système nerveux à l’échelle mondiale. Par exemple, les ganglions de la racine dorsale disséqués d’un modèle de souris de neurofibromatose de type I peuvent être traités davantage pour l’histologie afin de démêler les changements dans la progression tumorale.

Introduction

L’objectif global de cette méthode est d’isoler le système nerveux central et périphérique d’une souris en un seul morceau. Il n’existe actuellement aucun protocole permettant de disséquer l’ensemble du système nerveux d’un rongeur pour l’étudier au niveau mondial. Les neuroscientifiques utilisent généralement le nerf sciatique comme substitut de tout nerf périphérique¹, et les^ganglions L3 à L5 2 comme substitut de tout ganglion. En utilisant ces méthodes, il est impossible de conclure si les résultats sont spécifiques au nerf/ganglion particulier. Comme on sait qu’au moins certaines pat....