Le présent protocole décrit une méthode de mise en place d’un dispositif rentable basé sur une plate-forme à bascule utilisé pour induire une privation de sommeil chez la souris. Cet appareil s’est avéré efficace pour provoquer des perturbations dans les habitudes de sommeil mises en évidence par l’électroencéphalogramme (EEG), ainsi que pour induire des changements métaboliques et moléculaires associés à la privation de sommeil.
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Article de méthode
Mise en place d’un dispositif pour la privation de sommeil chez la souris
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Dans cet article
Résumé
Résumé
La perturbation du rythme circadien fait référence à la désynchronisation entre l’environnement ou le comportement externe et l’horloge moléculaire endogène, ce qui nuit considérablement à la santé. La privation de sommeil est l’une des causes les plus fréquentes de perturbation du rythme circadien. Diverses modalités (par exemple, plates-formes sur l’eau, manipulation douce, chambres à barres coulissantes, tambours rotatifs, agitateurs orbitaux, etc.) ont été rapportées pour induire une privation de sommeil chez la souris afin d’étudier ses effets sur la santé. La présente étude présente une méthode alternative pour la privation de sommeil chez la souris. Un dispositif automatisé basé sur une plate-forme à bascule a été conçu pour être rentable et perturber efficacement le sommeil des souris hébergées en groupe à des intervalles de temps réglables. Cet appareil induit des changements caractéristiques de la privation de sommeil avec une réponse minimale au stress. Par conséquent, cette méthode peut s’avérer utile pour les chercheurs intéressés à étudier les effets et les mécanismes sous-jacents de la privation de sommeil sur la pathogenèse de plusieurs maladies. De plus, il offre une solution rentable, en particulier lorsque plusieurs dispositifs de privation de sommeil doivent fonctionner en parallèle.
Introduction
La perturbation du rythme circadien fait référence à la désynchronisation entre l’environnement ou le comportement externe et l’horloge biologique endogène. L’une des causes les plus courantes de perturbation du rythme circadien est la privation de sommeil1. La privation de sommeil affecte non seulement négativement la santé humaine, mais augmente également considérablement le risque de nombreuses maladies, notamment le cancer2 et les maladies cardiovasculaires3. Cependant, les mécanismes sous-jacents aux effets néfastes de la privation de sommeil restent largement inconnus, et l’établissement de ....
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Protocole
Tous les protocoles expérimentaux sur les animaux de cette étude ont été approuvés par le Comité d’éthique du bien-être des animaux de laboratoire de l’hôpital Renji, école de médecine de l’Université Jiao Tong de Shanghai. Des souris mâles C57BL/6J, âgées de 8 à 10 semaines, ont été utilisées dans l’étude. Les animaux ont été obtenus auprès d’une source commerciale (voir le tableau des matériaux). Les principales pièces nécessaires à la mise en place de l’appareil sont répertoriées à la figure 1A.
1. Préparation du dispositif de privation de sommeil
- Fixez une extrémi....
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Résultats
Le dispositif établi pour la privation de sommeil chez la souris est illustré à la figure 1D. Au jour 7 après le début de la privation de sommeil, la surveillance de l’électroencéphalogramme (EEG) et de l’électromyographie (EMG)16 a indiqué que l’appareil réduisait considérablement la durée du sommeil et augmentait la durée de l’éveil chez la souris (Figure 2A-D). Pendant ce temps, le protocole actuel a c.......
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Discussion
Les modèles murins de privation de sommeil sont essentiels pour étudier les effets de la perturbation du sommeil sur diverses maladies, notamment les maladies cardiovasculaires21, les troubles psychiatriques22 et les troubles neurologiques23. Parmi les stratégies de privation de sommeil existantes chez la souris, les approches physiques qui impliquent des interruptions répétitives et à court terme du sommeil sont les plus couramment utilisées
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Déclarations de divulgation
Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Remerciements
Ces travaux ont été soutenus par des subventions de la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (82230014, 81930007, 82270342), du Shanghai Outstanding Academic Leaders Program (18XD1402400), de la Commission des sciences et de la technologie de la municipalité de Shanghai (22QA1405400, 201409005200, 20YF1426100), du Shanghai Pujiang Talent Program (2020PJD030), du SHWSRS (2023-62), du Shanghai Clinical Research Center for Aging and Medicine (19MC1910500) et du programme d’innovation postdoctorale du Bengbu Medical College (Byycxz21075).
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Tube de microcentrifugation de 1,5 mL | Axygen | MCT-150-C-S | |
| Tube de centrifugeuse de 50 mL | 602002 | ||
| Kit ELISA d’adénosine | Technologie Ruifan | RF8885 | |
| Cage animale | ZeYa tech | MJ2 | |
| Lecteur de glycémie | YuYue | 580 | |
| C57BL/6J Souris | JieSiJie Animal de laboratoire | N/A | Âge : 8-10 semaines |
| Bielle | ShengXiang Tech | N/A | Longueur : 20 cm |
| Ventilateur de refroidissement | LiMing | EFB0805VH | Tension d’alimentation : 5 V ; Consommation électrique : 1,2 W ; Débit d’air : 26,92 cfm ; Dimensions : 40 mm * 40 mm * 56 mm |
| Corticostérone Kit ELISA | Elabscience | E-OSEL-M0001 | |
| Système d’enregistrement et d’analyse EEG/EMG | Pinnacle Technology | 8200-K1-iSE3 | |
| Isoflurane | RWD | 20071302 | |
| anti-moustiques | FST | 13011-12 | Instrument chirurgical |
| Moteur et support moteur | MingYang | MY36GP-555 | Tension d’alimentation : 24 V dc ; Diamètre de l’arbre : 8 mm ; Couple de sortie maximal : 100 Kgf.cm ; Vitesse de sortie maximale : 10 tr/min |
| NanoDrop 2000c | Thermo Scientific | NanoDrop 2000c | |
| Adaptateur de brique d’alimentation | MingYang | QiYe-0243 | Tension d’entrée : 110-220V ac ; Tension de sortie : 24 V c.c. ; Courant de sortie : 2 A ; Longueur du câble : 2 m |
| Kit commercial qPCR | Vazyme | Q711-02 | |
| Équipement de mesure qPCR | Roche | 480 | |
| Plate-forme rectangulaire fixée par un cylindre en acier compatible avec les vis | Personnalisé | N/A | Largeur : 20 cm ; longueur : 25 cm ; longueur du cylindre : 30 cm, épaisseur : 2 mm |
| Kit commercial ARN inverse vers ADNc | Vazyme | R323-01 | |
| Vis et écrou | Guwanji | N/A | Diamètre intérieur : 6 mm, 12 mm |
| Cylindre en acier compatible avec les vis Personnalisé | N/A | Longueur : 300 mm | |
| Canaux en acier fendus | Personnalisé | N/A | Longueur : 400 mm ou 500 mm, épaisseur : 2 mm |
| Contacteur temporisé | LiXiang | DH48S-S | Tension d’alimentation : 110-220 V ac ; Unités mesurées : heures, minutes, secondes ; Configuration du contact : DPDT |
| TRIzol | Vazyme | R401-01 |
Références
- Yang, D. F., et al. Acute sleep deprivation exacerbates systemic inflammation and psychiatry disorders through gut microbiota dysbiosis and disruption of circadian rhythms. Microbiological Research. 268, 127292(2023).
- Alanazi, M. T., Alanazi, N. T., Alfadeel, M. A., Bugis, B. A.
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Réimpressions et autorisations
