Article de méthode

Caractéristiques des changements de douleur chez les rats atteints de lésions nerveuses dans les 24 heures suivant une intervention unique de Tuina

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DOI :

10.3791/65593

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26 janvier 2024

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1School of Acupuncture-Moxibustion and Tuina, Beijing University of Chinese Medicine, 2Beijing Hospital

Dans cet article

Résumé

Nous présentons un protocole utilisant le simulateur de manipulation du tuina pour effectuer la thérapie au tuina « Three-Manipulation and Three-Acupoint » pour les rats ayant subi des lésions mineures de constriction chronique et évaluons les points de temps analgésiques efficaces du tuina dans les 24 heures en testant les changements de douleur par l’analyse comportementale et les changements dans l’expression du facteur inflammatoire à l’aide d’un test immuno-enzymatique.

Résumé

La recherche clinique et fondamentale a prouvé que le tuina, en tant que méthode de traitement externe de la médecine traditionnelle chinoise, a un effet analgésique sur la douleur neuropathique périphérique (NPN). Cependant, le moment optimal pour l’effet analgésique du tuina peut varier en fonction des différentes sensations de blessure, affectant l’exploration du mécanisme d’initiation de l’analgésie du tuina.

La recherche a utilisé des rats modèles de lésions de constriction chronique mineures (CCI mineurs) pour simuler la pNP et a utilisé le simulateur intelligent de manipulation de tuina pour simuler les trois méthodes (pression ponctuelle, épilation et pétrissage) et trois points d’acupuncture (Yinmen BL37, Chengshan BL57 et Yanglingquan GB34) pour effectuer la thérapie au tuina. L’étude a évalué les changements de la douleur dans les 24 heures et le point temporel optimal pour l’efficacité de l’analgésie tuina chez les rats avec des modèles CCI mineurs en testant le seuil de sensibilité au froid (CST), le seuil de retrait mécanique (MWT) et la latence de retrait thermique (TWL). De plus, l’étude a évalué les changements d’expression de l’IL-10 et du TNF-α grâce à la détection d’Elisa. Les résultats montrent que le tuina a des effets analgésiques immédiats et durables. Pour les trois seuils de sensibilité aux lésions différents que sont le CST, le MWT, le TWL et les deux cytokines de l’IL-10 et du TNF-α, l’efficacité analgésique du tuina dans les 24 heures suivant l’intervention est significativement différente à différents moments.

Introduction

La douleur neuropathique périphérique (NPN) fait référence à la douleur causée par une lésion ou une maladie du système nerveux somatosensoriel périphérique, se manifestant par une série de symptômes et de signes, l’hyperalgésie étant l’un des principaux symptômes 1,2. L’hyperalgésie est une expérience accrue de la douleur causée par un stimulus nocif, notamment la piqûre d’épingle, le froid et la chaleur3. De vastes études épidémiologiques ont été menées, qui montrent que la pNP est la plus courante, avec un taux de prévalence de 6,9 % à 10 % dans la douleur neuropathique4. La NPp peut être causée par de multiples maladies, notamment une lésion du nerf, une névralgie post-zostérienne, une polyneuropathie diabétique douloureuse, une sclérose en plaques, un accident vasculaire cérébral, un cancer, etc.5. De nos jours, la principale méthode de traitement de la NPN est la médication, mais l’effet n’est pas idéal ; Et les effets secondaires sont importants, ce qui est la principale raison de la charge économique élevée sur les individus et la société6.

Le tuina est une méthode de traitement externe verte, économique, sûre et efficace de la médecine traditionnelle chinoise7. De nombreuses études cliniques ont prouvé l’effet analgésique du tuina sur la NPN, et des études fondamentales ont vérifié les effets analgésiques immédiats et cumulatifs du tuina 8,9. Le principal mécanisme analgésique cumulatif du tuina est de réduire les niveaux de facteurs inflammatoires et d’inhiber l’activation des cellules gliales10,11. Les recherches précédentes ont confirmé l’effet analgésique cumulatif du tuina et ont trouvé des gènes exprimés différentiellement (DEG) dans les ganglions de la racine dorsale (DRG) et la corne dorsale spinale (SDH) de rats atteints de lésions du nerf sciatique après 20 fois de traitement au tuina, principalement liés à la liaison aux protéines, à la réponse à la pression et à la projection neuronale12. Dans des études récentes, il a été confirmé que le tuina a un effet analgésique immédiat et qu’une intervention unique du tuina pourrait atténuer l’hyperalgésie des rats CCI mineurs et surtout soulager l’hyperalgésie thermique plus efficacement13. Cependant, le moment optimal pour l’effet analgésique du tuina peut varier en fonction de la sensation de blessure (froid, chaleur, mécanique), affectant l’exploration du mécanisme d’initiation de l’analgésie du tuina.

Les médiateurs inflammatoires peuvent sensibiliser et activer les récepteurs de la douleur, entraînant une diminution des seuils de décharge et des décharges ectopiques, contribuant ainsi à la sensibilisation périphérique14,15. Après une lésion nerveuse périphérique, le TNF-α est un initiateur de la réponse inflammatoire, ce qui peut favoriser la synthèse de facteurs inflammatoires tels que l’IL-10 et l’IL-1β, provoquant des lésions inflammatoires tissulaires directes, stimulant les terminaisons nerveuses locales et provoquant des douleurs 16,17,18. Le tuina peut obtenir des effets analgésiques en réduisant l’expression de facteurs inflammatoires tels que le TNF-α, l’IL-10, l’IL-6 et l’IL-1β 19,20,21. L’étude a sélectionné des rats modèles mineurs CCI pour simuler la NPN clinique et a sélectionné différents points temporels pour les tests comportementaux de la douleur par stimulation froide, thermique et mécanique après une intervention tuina 1 fois par seuil de sensibilité au froid (CST), seuil de retrait mécanique (MWT), latence de retrait thermique (TWL), et a choisi IL-10 et TNF-α dans le sérum par test immuno-enzymatique (ELISA), Afin de sélectionner le moment où l’effet analgésique du tuina est significatif, fournissant une base pour l’étude du mécanisme d’initiation de l’analgésie du tuina à un stade ultérieur.

Protocole

Le Comité sur la protection et l’utilisation des animaux de l’Université de médecine chinoise de Pékin (BUCM-4-2022082605-3043) a approuvé toutes les procédures utilisées dans cette étude.

1. Animaux et conception de l’étude

  1. Obtenez 49 rats Sprague-Dawley (SD) mâles de 8 semaines, pesant 200 ± 10 g.
  2. À l’aide d’une méthode de table de nombres aléatoires, divisez les rats en un groupe d’opérations fictives (n = 7), un groupe modèle (n = 7) et immédiatement après le groupe tuina (n = 7), 6 h après le groupe tuina (n = 7), 12 h après le groupe tuina (n = 7), 18 h après le groupe tuina (n = 7) et 24 h après le groupe tuina (n = 7).

2. Etablissement d’un modèle de CCI mineur chez le rat (Figure 1)

REMARQUE : La méthode de modélisation de l’ICC mineure était celle décrite dans les études précédentes 22,23,24.

  1. Permettre l’alimentation adaptative du rat SD pendant 7 jours. Laissez le rat jeûner pendant 2-3 h avant de modeler.
  2. Placez le rat dans une boîte remplie de 3 à 5 % d’isoflurane pour l’anesthésie à l’aide d’un appareil d’anesthésie. Après l’anesthésie, appliquez une pommade ophtalmique sur les deux yeux pour éviter le dessèchement.
  3. Fixez le rat en position couchée sur une table, rasez la fourrure de la zone de l’articulation de la hanche droite et désinfectez la zone avec de l’iode (Figure 1B).
  4. Confirmez le plan chirurgical de l’anesthésie par un pincement des orteils. Faites une incision cutanée d’environ 0,5 à 1 cm dans le sens de marche du nerf sciatique, séparez brusquement la couche musculaire et exposez complètement le bord inférieur du muscle piriforme (Figure 1C).
  5. Attachez sans serrer une suture intestinale chromée résorbable (type 4-0) autour du nerf sans interrompre la circulation sanguine des vaisseaux extraneuraux. Exposer le nerf sciatique de rats du groupe placebo pendant 3 minutes sans ligature (Figure 1A, D, E).
  6. Utilisez une seringue sans aiguille pour appliquer 1 goutte de solution de chlorure de sodium à 0,9 % sur le nerf sciatique pour aider à le réinitialiser. Suture couche par couche, donnez une quantité appropriée d’anti-inflammatoire tel que la poudre d’amoxicilline, suturez la couche musculaire avec 1 point de suture et suturez la peau avec 2 points de suture (Figure 1F).
    REMARQUE : De l’étape 2.3 à l’étape 2.6, faites en sorte que 2 % à 3 % d’isoflurane s’écoule dans la bouche et le nez des rats pour maintenir l’anesthésie.
  7. Gardez le rat au chaud et attendez qu’il se réveille. Remettez les rats dans la salle d’élevage.

3. Intervention sur simulateur de manipulation intelligente de tuina (Figure 2)

REMARQUE : Le traitement a commencé le 7ème jour après l’établissement du modèle.

  1. Réglez les paramètres de l’instrument sur une force de stimulation de 4 N, une fréquence de stimulation de 60 fois/min et une température de 36 °C sur l’interface de fonctionnement de l’ordinateur. Placez le rat dans le fixateur de rat et exposez l’emplacement des points d’acupuncture des membres postérieurs (Figure 2A, machine auto-développée, brevet n°. ZL 2023 20511277.5)25.
  2. Activez l’instrument pour effectuer les méthodes de pressage ponctuel, de pincement et de pétrissage (Tableau 1). Cliquez sur les points Pressing, Plucking et Kneading affichés sur l’écran de l’ordinateur dans l’ordre sur les points Yinmen (BL37), Chengshan (BL57) et Yanglingquan (GB34) (Tableau 2) du côté modèle du rat du groupe tuina (Figure 2B, C)26.
    1. Pour le groupe tuina, effectuez une intervention une fois par jour pendant 1 jour, avec une force de 4 N, une fréquence de 60 fois/min, et un total de 9 min par point et par méthode.
    2. Limitez les groupes simulé et modèle pendant 9 min, avec le même nombre de fois que le groupe tuina.

4. Mesure comportementale

REMARQUE : Après l’intervention, le seuil de sensibilité au froid (CST), le seuil de retrait mécanique (MWT) et la latence de retrait thermique (TWL) ont été testés dans les 5 sous-groupes de tuina, le groupe de modèles et le groupe d’opération fictive, respectivement. Le temps d’essai pour le groupe modèle et le groupe simulé est le même que celui du groupe tuina (c.-à-d. 24 h).

  1. Seuil de sensibilité au froid (CST)
    1. Placez le rat sur un détecteur de douleur intelligent à plaque froide et chaude avec une température de surface de 4 ± 1 °C (cliquez sur START > SET), et couvrez-le d’une cage en plastique transparent.
    2. Observez les activités d’exploration des rats pendant 5 minutes jusqu’à ce qu’ils se soient acclimatés à la cage en plastique transparent.
    3. Observez et notez le nombre de levées de pieds du côté opératoire du membre postérieur dans les 5 minutes suivantes.
      REMARQUE : Le nombre de levées de pieds causées par des changements dans l’activité ou la posture du rat n’est pas inclus.
  2. Seuil de retrait mécanique (MWT)
    1. Placez le rat sur la surface inférieure sous forme de grille (0,5 cm × 0,5 cm) dans une boîte de test pendant 15 à 30 minutes avant de tester.
    2. Déplacez la sonde de la douleur (type EVF 5) au centre de la région plantaire postérieure droite du rat, augmentez linéairement la pression à la main et enregistrez le seuil affiché sur l’écran de l’instrument lorsque le rat lève et lèche ses pattes. Mesurez en continu 5 fois, avec un intervalle de mesure de 10 minutes chacune.
  3. Latence de retrait thermique (TWL)
    1. Placez le rat dans une boîte de test avec une surface inférieure en verre et laissez-le s’adapter pendant 15 minutes avant de commencer le test.
      REMARQUE : La période de latence du réflexe du pied de contraction thermique a été détectée à l’aide d’un instrument de stimulation thermique de la douleur (type PL200).
    2. Paramètres définis : la durée maximale du test est de 30 s et l’intensité est de 50 %. Cliquez sur les boutons START et direction.
    3. Déplacez la sonde infrarouge au centre de la région plantaire postérieure droite du rat et lancez la détection.
    4. Enregistrez la latence du réflexe de rétraction du pied lorsque le rat se lève et se lèche les pattes. Mesurez la latence en continu 5 fois, avec un intervalle de 10 min entre chaque mesure.

5. L’ELISA

  1. Anesthésier le rat avec une dose de 35 mL/100 g d’hydrate de chlore à 4 % pour une anesthésie par injection intrapéritonéale après un test comportemental. Coupez la peau et les muscles longitudinalement le long du milieu de l’abdomen du rat pour exposer ses organes internes.
  2. Utilisez un lest et un porte-aiguille pour une séparation pure, identifiez l’aorte abdominale, prélevez du sang frais et conservez un échantillon pour les tests. Utilisez un tube de séparation pour séparer le sérum. Prélevez l’échantillon de sérum pour une détection immédiate, ou emballez-le séparément et conservez-le dans un réfrigérateur à -80 ° C.
    REMARQUE : Avant de séparer, laissez l’échantillon de sang s’agglutiner pendant 30 min.
  3. Préparez le sérum de rats pour le processus de test et conservez-le à température ambiante (RT) pendant au moins 30 min.
  4. Configurez des puits vierges et des puits d’échantillon standard pour l’échantillon à analyser. Ajouter un total de 50 μL d’échantillons étalons dans la plaque liée à des enzymes. Ajoutez d’abord 40 μL de diluant, puis ajoutez 10 μL d’échantillon dans le puits d’échantillonnage à analyser.
    REMARQUE : Lors de l’ajout d’échantillons, il est nécessaire de les ajouter au fond du puits marqué par l’enzyme, en veillant à ce qu’ils ne touchent pas la paroi du puits autant que possible, et de bien agiter et mélanger. Le puits vierge ne contient pas d’échantillons ou de réactifs marqués aux enzymes, et les autres étapes sont les mêmes. La dilution finale de l’échantillon est de 5 fois.
  5. Après avoir scellé la plaque avec un film d’étanchéité, placez-la dans un incubateur à 37 °C pendant 30 min.
  6. Diluez 30 fois la solution de lavage concentrée avec de l’eau distillée et mettez-la de côté.
  7. Retirez le film d’étanchéité, versez le liquide du puits et secouez-le pour le sécher. Remplissez chaque puits de liquide vaisselle, laissez-le reposer pendant 30 s, puis versez-le. Répétez cette étape 5 fois, et enfin, secouez-le pour le sécher.
  8. Ajouter l’avidine de raifort marquée à la peroxydase (100 μL par puits).
  9. Ajoutez 50 μL de révélateur de couleur A dans chaque puits, puis ajoutez 50 μL de révélateur de couleur B. Agitez et mélangez doucement, puis placez-le dans un environnement à 37 °C pendant 10 min dans l’obscurité.
  10. Ajouter 50 μL de la solution d’arrêt par puits pour mettre fin à la réaction.
    REMARQUE : À ce stade, la couleur bleue deviendra jaune.
  11. Mettez à zéro les puits vides et mesurez la densité optique (valeur OD) de chaque puits en séquence à une longueur d’onde de 450 nm.

Résultats

CST: Par rapport au groupe modèle, le nombre de soulèvements de pieds dans le groupe 6 h après le tuina était significativement réduit, et la différence était statistiquement significative (P < 0,05). Comparativement au groupe fictif, le nombre de soulèvements de pieds dans le groupe modèle a augmenté de façon significative, et la différence était statistiquement significative (P < 0,05) (tableau 3, figure 3).

MWT: Par rapport au groupe modèle, le MWT de chaque sous-groupe de tuina était significativement plus élevé que celui du groupe modèle, sauf 18 h après le tuina, et le MWT de 24 h après le tuina était significativement plus élevé que celui du groupe modèle, avec une différence statistiquement significative (P < 0,05). Comparativement au groupe d’exploitation fictive, la MWT dans le groupe modèle était significativement plus faible, avec une différence statistiquement significative (P < 0,01) (tableau 3, figure 4).

TWL :
Par rapport au groupe modèle, il y avait une augmentation significative immédiatement après le tuina, 6 heures après le tuina et 18 h après le tuina, avec une différence statistiquement significative. Comparativement au groupe d’exploitation fictive, le groupe modèle a diminué de façon significative, avec une différence statistiquement significative (P < 0,01) (tableau 3, figure 5)

TEST ELISA
IL-10 : Par rapport au groupe modèle, il y avait une diminution significative 6 h et 24 h après la tuina, avec une différence statistiquement significative (P < 0,01) (tableau 4, figure 6).

TNF-α : Par rapport au groupe modèle, il y a eu une diminution significative immédiatement après le tuina (**P < 0,01), 6 heures après le tuina (**P < 0,01) et 24 h après le tuina (**P < 0,05), avec une différence statistiquement significative (tableau 4, figure 6)

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Figure 1 : Etablissement d’un modèle de CCI mineur chez le rat. (A) Une suture intestinale chromique (4-0). (B) Préparation de la peau. (C) L’incision. (D) Exposer le nerf sciatique. (E) Suture intestinale chromique résorbable (type 4-0) autour du nerf. (F) Suturation de la couche musculaire et de la peau. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

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Figure 2 : Traitement du simulateur intelligent de manipulation de tuina. (A) Le simulateur intelligent de manipulation de tuina (brevet n°. ZL ZL 2023 20511277.5). (B) Les positions de Yinmen (BL37), Chengshan (BL57) et Yanglingquan (GB34). (C) Stimuler les Yinmen (BL37). Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

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Figure 3 : Résultats du seuil de sensibilité au froid (CST) chez les rats de chaque groupe. *P < 0,05, par rapport au groupe modèle, #P <0,05, par rapport au groupe fictif. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

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Figure 4 : Résultats du seuil de sevrage mécanique (TMM) chez les rats de chaque groupe. *P <0,05, par rapport au groupe modèle, #P < 0,05, par rapport au groupe fictif. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

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Figure 5 : Résultats de la latence de retrait thermique (TWL) des rats dans chaque groupe. *P < 0,05, **P < 0,01, par rapport au groupe modèle ; #P <0,05, ##P < 0,01, par rapport au groupe fictif. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

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Figure 6 : Changements dans les taux sériques d’IL-10 et de TNF-α chez les rats de chaque groupe (moyenne ± écart-type, n = 7), "*P<0,05, **P<0,01, par rapport au groupe modèle. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Trois méthodesMéthodeClassificationsFonctions
Pressage de pointsRéchauffement et débouchageRéchauffer les méridiens et débloquer les collatéraux
PlumaisonDétenteAgir sur le tronc nerveux et traiter l’engourdissement ou la douleur dans les membres
PétrissageDétenteSoulager les spasmes musculaires

Tableau 1 : Trois méthodes de stimulation.

Trois points d’acupuncturePoints d’acupunctureMéridiensTracMuscles
Yinmen (BL37)Méridien de la vessie de Foot-TaiyangTronc du nerf sciatiqueMuscle biceps fémoral
Chengshan(BL57)Nerf tibialMuscle gastrocnémien
Yanglingquan(GB34)Méridien de la vésicule biliaire du pied-ShaoyangNerf péronier communMuscles tibiaux antérieurs

Tableau 2 : Trois points d’acupuncture utilisés dans cette étude.

FeinteModèleTuina
0 h6 h12 h18 h24 h
CST12,8 ± 2,3825 ± 5.15#19,6 ± 10,9913,2 ± 2,49*16,4 ± 8,4117 ± 5,5719 ± 8,34
MWT69.47 ± 10.3540.63 ± 9.65##44.19 ± 10.7246.58 ± 9.4742.83 ± 11.4140,1 ± 5,5948.33 ± 8.7*
TWL12.06 ± 3.458.16 ± 2.09##12.09 ± 3.86**10.07 ± 2.7*9,44 ± 2,5210,42 ± 2,49**9,72 ± 2,29

Tableau 3 : Résultats de l’ECS, de la MWT et de la TWL chez les rats de chaque groupe (moyenne ± écart-type, n = 7). *P<0,05, **P<0,01, par rapport au groupe de modèles ; #P<0,05, ##P<0,01, par rapport au groupe fictif.

FeinteModèleTuina
0 h6 h12 h18 h24 h
L’IL-1055,10 ± 1,37**70,27 ± 6,2267,28 ± 1,2861,41 ± 3,36**67,98 ± 1,8569.03 ± 6.2957.16 ± 1.30**
TNF-α311.52 ± 13.45**339.33 ± 24.50309.47 ± 8.37**309.99 ± 14.95**334,62 ± 21,85319.22 ± 10.38316.24 ± 8.72*

Tableau 4 : Changements dans les taux sériques d’IL-10 et de TNF-α chez les rats de chaque groupe (moyenne ± écart-type, n = 7, pg/mL). *P < 0,05, P < 0,01, par rapport au modèle de groupe (P < 0,05, P < 0,01.)

Discussion

L’étude a utilisé le modèle CCI mineur pour simuler la NPN causée par une lésion clinique du nerf sciatique. Le modèle CCI mineur implique la compression et la contention continues et chroniques du tronc nerveux par ligature, accompagnées d’un gonflement progressif de la ligature, entraînant un œdème dans le nerf sciatique et formant une douleur chronique stable en 3 à 5 jours 27,28. Dans l’étude préliminaire, le groupe de recherche a constaté que le groupe modèle mineur CCI était plus stable que le groupe modèle classique le 7e jour après la modélisation, ce qui le rendait plus adapté à la conception expérimentale à court terme. Par conséquent, nous avons choisi ce moment pour l’intervention du tuina.

Les recherches précédentes ont vérifié que le simulateur intelligent de manipulation du tuina (animal) peut soulager efficacement la douleur chez les rats atteints de lésions du nerf sciatique après 20 séances de traitement au tuina en utilisant les « Trois méthodes et trois points d’acupuncture"29,30,31. De plus, le groupe de recherche a constaté que le tuina une fois peut soulager efficacement les symptômes d’hypersensibilité à la douleur des rats CCI mineurs, en particulier l’hyperalgésie thermique13. L’étude adopte les méthodes de pressage ponctuel, de plumage et de pétrissage comme trois méthodes de traitement. La méthode de point-pressing est une technique de réchauffement et de déblocage qui a pour fonction de réchauffer les méridiens et de débloquer les collatéraux. La méthode de l’épilation est une technique de relaxation qui agit sur le tronc nerveux et permet de traiter l’engourdissement ou la douleur dans les membres. La méthode de pétrissage est une technique de relaxation qui peut soulager les spasmes musculaires, éliminer la fatigue et soulager la douleur dans la zone blessée (tableau 1). L’étude sélectionne Yinmen (BL37), Chengshan (BL57) et Yanglingquan (GB34) comme les trois points d’acupuncture pour le traitement (tableau 2). Selon le principe de sélection des points d’acupuncture le long des méridiens et localement dans l’acupuncture et la moxibustion, trois points d’acupuncture appartiennent au méridien de la vessie du pied-Taiyang et au méridien de la vésicule biliaire du pied-Shaoyang. Selon la localisation anatomique du nerf, Yinmen (BL37) est situé sur le nerf sciatique et ses branches, Chengshan (BL57) est situé sur le nerf tibial et Yanglingquan (GB34) est situé sur le nerf péronier commun. Selon l’emplacement anatomique du muscle, les trois points d’acupuncture sont situés autour du muscle biceps fémoral, du muscle gastrocnémien et des muscles tibiaux antérieurs (tableau 2). Par conséquent, grâce à l’intervention des trois méthodes et des trois points d’acupuncture, les zones pertinentes de l’acupoint-nerf-muscle peuvent être stimulées. Dans cette étude, après la formation d’une douleur chronique stable et une intervention avec le tuina, des changements comportementaux de la douleur ont été détectés, confirmant en outre que le tuina a un effet analgésique immédiat et a différentes significations thérapeutiques pour différents récepteurs de blessures, fournissant un soutien thérapeutique pour la prochaine étape de l’étude du mécanisme d’initiation de l’analgésie du tuina.

L’étude a utilisé le CST, le MWT et le TWL comme indicateurs pour explorer l’efficacité du tuina pour différentes sensations de blessure. Les manifestations cliniques de la douleur induite dans la NPN comprennent principalement l’hyperalgésie et l’allodynie, à savoir la douleur induite par la stimulation froide et chaude et la douleur induite par le toucher mécanique4. Actuellement, les indicateurs classiques de la recherche comportementale quantitative pour ces deux sensations de douleur sont la CST, la MWT et la TWL. Dans les tests CST, le test de plaque froide, le testeur intelligent de douleur à plaque froide et chaude ZH-6C utilisé dans cette expérience, est relativement objectif, moins affecté par les facteurs environnementaux environnants, a une température constante et a une haute précision32,33. En recherche fondamentale, les filaments de Von Frey sont couramment utilisés pour estimer la MWT, qui est l’un des indicateurs classiques d’évaluation de la douleur neuropathique. Il vise principalement la douleur d’acupuncture induite par une stimulation mécanique pour évaluer la douleur induite par le toucher mécanique chez les rongeurs34,35. Le test Hargreaves utilise un stimulateur thermique de la douleur pour détecter et évaluer la réponse des rongeurs à la sensibilité à la douleur thermique et est utilisé pour évaluer la récupération de la sensibilité à la douleur ou de la réponse à la douleur thermique après une lésion nerveuse pour observer si les pattes arrière de l’animal ont une réaction de constriction due à la chaleur. L’instrument détecte le mouvement des pattes arrière de l’animal36, et le contrôleur désactivera automatiquement la minuterie d’arrêt infrarouge34, connue sous le nom de TWL. Les expériences montrent que la sensibilité des rats modèles mineurs de l’ICC à la TWL est optimale38. Par conséquent, la méthode de recherche quantitative pour le comportement des rats modèles mineurs de l’ICC consiste cette fois à utiliser une expérience sur plaque froide, un appareil de piqûre mécanique électronique et un appareil de piqûre thermique pour détecter.

Les points temporels significatifs des effets curatifs sur différentes sensations nociceptives après une intervention précoce du tuina sont différents. Actuellement, une exploration préliminaire a été menée sur l’efficacité clinique et le mécanisme de l’analgésie du tuina. Nos recherches précédentes ont principalement porté sur le mécanisme antalgique après un certain nombre de tuina. Au cours des 2 dernières années, des recherches ont été menées sur le mécanisme analgésique au stade initial du tuina afin d’explorer comment l’analgésie du tuina est initiée. Dans cette étude, « trois méthodes et trois points d’acupuncture » ont été utilisés pour intervenir une fois chez des rats modèles mineurs de l’ICC. Ensuite, 5 points temporels ont été sélectionnés pour la détection CST, MWT et TWL afin d’observer les changements de température et la sensation tactile mécanique de rats mineurs du modèle CCI. Cette étude a utilisé l’ELISA pour détecter les changements dans les taux sériques d’IL-10 et de TNF-α de rats après des tests comportementaux. Les résultats ont montré qu’après une intervention avec le tuina, par rapport au groupe modèle, les deux se sont améliorés immédiatement. Cela a de nouveau confirmé les résultats de recherche précédents selon lesquels le tuina avait un effet analgésique immédiat. Cependant, pour différents types de sensations de douleur, les moments où l’effet analgésique est significatif ne sont pas les mêmes. En termes de CST, il y avait une signification statistique 6 h après tuina ; En termes de MWT, il y avait une signification statistique 24 h après le tuina ; En ce qui concerne le TWL, il y avait une signification statistique significative 6 h après le tuina, et une signification statistique significative immédiatement et 18 h après le tuina ; En termes de taux sérique d’IL-10, il y a eu une diminution significative 6 h après la tuina, et 24 h après la tuina, avec une différence statistiquement significative. En ce qui concerne le taux sérique de TNF-α, il y a eu une diminution significative immédiatement après la tuina, 6 heures après la tuina et 24 h après la tuina, avec une différence statistiquement significative. Il indique que bien que l’effet analgésique du tuina puisse être maintenu, il existe un retard significatif dans le point temporel d’efficacité pour la douleur induite par la stimulation thermique et la douleur induite par le toucher mécanique, et il est immédiatement efficace et a une efficacité plus significative et durable pour la douleur induite par la stimulation thermique. Notre laboratoire explore davantage les changements dans les protéines et les gènes liés aux protéines du potentiel de récepteur transitoire (TRP) et aux gènes liés au froid, au chaud et à la sensibilité mécanique, ainsi qu’à d’autres facteurs inflammatoires tels que le TGF-β et l’IL-6, afin d’explorer davantage le mécanisme d’initiation analgésique du tuina.

En résumé, sur la base des résultats de cette étude, on peut en déduire que les moments où les protéines ou les voies affectées par le tuina peuvent fonctionner peuvent être différents, ce qui entraîne des points temporels différents pour des effets analgésiques significatifs. D’autres recherches approfondies sont nécessaires pour explorer le mécanisme d’initiation de l’analgésie du tuina et fournir une base pour la recherche clinique sur l’efficacité du tuina.

Déclarations de divulgation

Aucun conflit d’intérêts, financier ou autre, n’est déclaré par les auteurs.

Remerciements

Les auteurs ont reçu des fonds pour la recherche, la rédaction et la publication de cet article de la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (n° 82074573 et 82274675) et de la Fondation des sciences naturelles de Pékin (n° 7232278).

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Appareil d’anesthésieRuiwode Life Technology Co., Ltd., Shenzhen, ChineR500Équipement lié à l’anesthésie respiratoire animale
Suture intestinale chromiqueShandong Boda Medical Products Co., Ltd., ChineBD210903Une suture chirurgicale résorbable principalement fabriquée à partir de protéines de collagène traitées à partir des intestins de jeunes chèvres en bonne santé
Instrument électronique Von FreyBioseb, États-UnisBIO-EVF5Un instrument de détection du seuil de retrait mécanique
Détecteur intelligent de douleur à plaque froide et chaudeAnhui Zhenghua Biological Instrument Equipment Co., Ltd, Chine.ZH-6CUn instrument pour détecter le seuil de sensibilité au froid
IsofluraneRuiwode Life Technology Co., Ltd., Shenzhen, ChineR510-22-10Un anesthésique
Lecteur de microplaques multifonction à pleine longueur d’ondeMolecular Devices (Shanghai) Co., Ltd.SpectraMax M2Un instrument de détection de la densité optique (DO)
Dispositif d’analgésie thermiqueChengdu Techman Software Co., Ltd., ChinaPL-200Un instrument de détection de la latence de retrait thermique

Références

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Caractéristiques des changements de douleur chez les rats atteints de lésions nerveuses dans les 24 heures suivant une intervention unique de Tuina
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