Amélioration du développement et de la croissance de rats atteints de paralysie cérébrale infantile à l’aide de manipulations sélectives de la colonne vertébrale

Résumé

Cette étude illustre l’effet de la manipulation sélective de la colonne vertébrale sur la croissance et le développement de rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale, en mettant l’accent sur la procédure spécifique et le protocole standardisé. La mesure du poids corporel, le test Rotarod, le score de fautes de pied, d’autres tests comportementaux et la détection de l’hormone de croissance ont été effectués pour évaluer le protocole.

Résumé

La paralysie cérébrale (PC) est une maladie pédiatrique réfractaire avec une prévalence élevée, un taux d’invalidité élevé et un traitement difficile. Une variété de traitements sont actuellement utilisés pour la paralysie cérébrale. Le traitement implique un traitement médicamenteux et non médicamenteux. La thérapie externe de la médecine traditionnelle chinoise est une méthode de traitement très distinctive dans la thérapie non médicamenteuse. En tant que l’une des thérapies externes de la médecine traditionnelle chinoise, le massage est utilisé dans le traitement de la paralysie cérébrale et a une bonne efficacité, de petits effets secondaires et une forte opérabilité. Dans le cadre de la thérapie externe de la MTC, la manipulation sélective de la colonne vertébrale peut favoriser efficacement la croissance et le développement des rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale. L’opération a été principalement divisée en quatre étapes : tout d’abord, la méthode de frottement a été appliquée sur la colonne vertébrale et les deux côtés de la colonne vertébrale pendant 1 min. La méthode de pressage et de pétrissage a été appliquée sur la colonne vertébrale pendant 5 minutes et sur les muscles des deux côtés de la colonne vertébrale pendant 5 minutes. Deuxièmement, on a effectué une pression et un pétrissage des points d’acupuncture locaux sensibles de la colonne vertébrale pendant 2 minutes. Troisièmement, le membre affecté a été traité par la méthode de torsion pendant 1 min. Quatrièmement, la méthode de frottement a été appliquée sur une ligne médiane du front à l’arrière du cerveau pendant 1 min. Cette étude visait à utiliser la manipulation sélective de la colonne vertébrale pour traiter les rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale. Le poids, le test de Rotarod, le score de faute de pied et l’hormone de croissance de rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale ont été détectés pour comprendre l’effet de la manipulation sélective de la colonne vertébrale sur la croissance et le développement de rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale. Les résultats ont montré qu’il peut favoriser la prise de poids, améliorer la capacité d’équilibre et la fonction motrice, favoriser la croissance et le développement des rats atteints de paralysie cérébrale, favoriser la sécrétion d’hormone de croissance et augmenter la température des parties sensibles du dos.

Introduction

La paralysie cérébrale (PC), causée par des lésions cérébrales non progressives chez le fœtus ou la petite enfance, est un groupe de troubles caractérisés par un développement moteur et postural anormal¹, des troubles du développement, y compris une prise de poids lente ^2,3,4 et un dysfonctionnement moteur. L’incidence de la paralysie cérébrale en Chine est de 2,48 % et la prévalence est de 2,46 ‰ (1-6 ans)⁵, respectivement. Des études étrangères ont rapporté une prévalence de 2,4 % à 3,6 %⁶. La paralysie cérébrale est une cause majeure de blessures physiques et d’invalidité chez les enfants, parmi lesquelles les troubles de l’équilibre et du mouvement ont un impact significatif sur les activités de la vie quotidienne¹. La paralysie cérébrale peut être causée par une naissance prématurée, une infection, la génétique, l’ischémie et l’hypoxie néonatales, la jaunisse néonatale et d’autres facteurs pathogènes complexes et divers⁷. L’objectif du traitement de la paralysie cérébrale est d’améliorer la fonction physique et la qualité de vie ⁸. Actuellement, les méthodes de traitement de la paralysie cérébrale comprennent la stimulation cérébrale profonde⁹, l’entraînement à la marche assisté par robot¹⁰, l’acupuncture du poignet et de la cheville¹¹ et l’acupuncture des méridiens combinée au massage¹².

La médecine traditionnelle chinoise (MTC) est de plus en plus utilisée comme traitement efficace de la CP^13,14. Le massage, dans le cadre de celui-ci, joue également un certain rôle. Par exemple, la manipulation sélective de la colonne vertébrale peut réguler l’état d’hydroxyméthylation de l’ADN pour réguler le développement neuronal et améliorer l’apprentissage et la fonction de mémoire¹⁵. Dans le traitement du rat infantile atteint de paralysie cérébrale, la manipulation sélective de la colonne vertébrale peut améliorer l’homéostasie inflammatoire du cortex et de l’hippocampe en régulant le niveau de méthylation des cytokines inflammatoires TNF-α et de la région promotrice du gène IL-10¹⁶ et jouer un rôle thérapeutique positif dans la capacité d’équilibre du rat nourrisson atteint de paralysie cérébrale¹⁶. La manipulation sélective de la colonne vertébrale peut améliorer la fonction cognitive des rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale¹⁷. La manipulation sélective de la colonne vertébrale a été utilisée dans le traitement des nourrissons rats atteints de paralysie cérébrale, et il a été observé qu’elle avait également des effets thérapeutiques sur leur croissance et leur développement¹⁸.

Le but de cette étude est d’illustrer l’effet de la manipulation sélective de la colonne vertébrale sur la croissance et le développement de rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale en mesurant le poids corporel, le test Rotarod¹⁹, le score de faute plantaire ^20,21 et d’autres tests comportementaux et la détection de l’hormone de croissance, et de fournir des idées de recherche au personnel concerné.

Protocole

Cette étude a été approuvée par le Comité d’éthique des animaux d’expérimentation de l’Université de médecine traditionnelle chinoise du Yunnan. Toutes les opérations expérimentales sur des animaux ont suivi le principe des 3R de réduction, d’optimisation et de remplacement des animaux de laboratoire (n° R-06202018). Des rats Sprague Dawley (SD) en bonne santé (14 mâles et 7 femelles) de grade exempt d’agents pathogènes spécifiques (FPS) avec un poids corporel moyen de 250 à 300 g ont été utilisés dans cette expérience. Les rats ont été élevés dans la salle des animaux SPF de l’Université de médecine traditionnelle chinoise du Yunnan, numéro de certificat : SYXK(Yunnan)K2022-0004. Tous les rats ont été logés sous un cycle lumière/obscurité de 12 heures avec un environnement contrôlé par la lumière naturelle à une température ambiante de 22-26 °C et une humidité relative de 40 à 50 %. Après 1 semaine d’alimentation adaptative, le rapport mâle/femelle s’est maintenu à 1:2. Après 1 semaine, les rates enceintes ont été logées dans une seule cage, nourries normalement, mangeant et buvant librement. Après l’accouchement naturel, les rats nourrissons en bonne santé nés des rats gravides ont été sélectionnés. Les rats nourrissons ont été divisés en groupes Simulacre, Contrôle et Traitement pour observer l’effet de la manipulation sélective de la colonne vertébrale sur la croissance et le développement des rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale. Dans chaque groupe, 6 petits mâles ont été sélectionnés pour l’expérience. Le groupe de traitement a été traité par manipulation sélective de la colonne vertébrale à partir du 5ème^{jour après} la naissance, et le traitement a été administré pendant 6 jours suivis d’un repos pendant 1 jour.

1. Établir un modèle de paralysie cérébrale

1. Stérilisez le microscope, les ciseaux ophtalmiques, les pinces, les sutures, la plaque chirurgicale, les ciseaux, les cotons-tiges et les gants nécessaires à la chirurgie, et placez-les dans la salle d’opération.
2. Séparez temporairement un chiot de sa mère le troisième jour de sa vie, placez-le dans un seul cadre et transportez-le dans la salle d’opération stérile.
3. Mesurez le poids corporel. Inclure dans l’étude les rats nourrissons dont le poids corporel variait de 7 à 9 g et exclure ceux qui ne se conformaient pas au poids corporel. Divisez au hasard les rats nourrissons en groupes Sham, Control et Treatment.
4. Induire l’anesthésie avec de l’isoflurane à une concentration de 2 % et maintenir l’anesthésie à 1 % à l’aide d’un appareil d’anesthésie par inhalation de gaz pour petits animaux.
   REMARQUE : Cette expérience vise principalement à observer les effets de la manipulation sélective de la colonne vertébrale sur la croissance et le développement de rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale. L’anesthésie a été réalisée conformément aux exigences générales pendant le processus de modélisation, et une analgésie supplémentaire affectera les résultats de l’observation.
   1. Connectez l’anesthésique au gaz des petits animaux à l’alimentation électrique et ouvrez la vanne connectée au boîtier d’induction.
   2. Placez le rat nourrisson dans la boîte d’induction, tournez le bouton de réglage de la concentration et ajustez la concentration d’isoflurane à 2 % pour induire l’anesthésie.
   3. Lorsque le rat infantile est inconscient, retirez-le de la boîte à induction. Placez-le sur la plaque de commande et fermez le canal 1 de l’appareil d’anesthésie.
   4. Placez le bébé rat en décubitus dorsal. Fixez le masque d’inhalation d’anesthésie pour maintenir l’anesthésie.
   5. Ouvrez le canal connecté au masque d’inhalation d’anesthésie. Maintenez l’anesthésie en tournant le bouton de réglage de la concentration et en ajustant la concentration d’isoflurane à 1 %.
      REMARQUE : Après l’anesthésie, évaluez la profondeur de l’anesthésique en soulevant et en pinçant de force les orteils et la queue des rats nourrissons. Une absence de réponse lorsque les orteils et la queue ont été soulevés et pincés confirme que la profondeur de l’anesthésie a atteinte.
5. Désinfectez la peau du cou du rat nourrisson trois fois avec de l’alcool à 75 % et faites une incision longitudinale de 1 cm sur la peau du cou pour exposer le tissu sous-cutané.
   REMARQUE : L’incision longitudinale de la peau du cou ne provoque pas de défaut cutané.
6. Coupez la peau du cou gauche sous un microscope de dissection et utilisez une pince à épiler ophtalmique pour séparer brutalement le muscle sterno-hyoïdien et le muscle sterno-mastoïdien gauche.
   1. Trouvez l’artère carotide commune gauche et le nerf vague, et séparez l’artère carotide commune gauche et le nerf vague.
   2. Dans le groupe Modèle, coupez l’artère carotide commune gauche avec un stylo de coagulation électrique. Nettoyez et suturez l’incision du cou.
   3. Dans le groupe Sham, séparez l’artère carotide commune gauche du nerf vague.
7. Après l’opération, placez le bébé rat dans le bain-marie thermostatique en position couchée pour la réanimation pendant 1 h.
   REMARQUE : Après récupération naturelle, la couleur de la peau des membres et de tout le corps était rougeâtre. Le bébé rat pouvait bouger ses membres de manière autonome et ramper indépendamment.
8. Placez les rats réanimés des groupes Contrôle et Traitement dans un incubateur fermé à 37 °C en position couchée. Introduisez un mélange de 5 % d’oxygène et de 95 % d’azote gazeux pour induire l’hypoxie, et retirez les rats après 2 h.
9. Retirez le rat qui a terminé le processus d’hypoxie de la boîte d’hypoxie et placez-le en position couchée dans une boîte avec une teneur normale en oxygène atmosphérique. Placez-les dans un bain-marie thermostatique à 37 °C pendant 1 h. Après un rétablissement complet, transférez le bébé rat dans la cage de la mère.
   REMARQUE : Après avoir récupéré naturellement, la couleur de la peau des membres et de tout le corps était rouge. Le bébé rat pouvait bouger ses membres de manière autonome et pouvait ramper indépendamment.
10. Placez le rat bébé du groupe Sham dans une boîte avec une teneur en oxygène atmosphérique normale, et placez la boîte dans un bain-marie thermostatique à 37 °C pendant 1 h. Une fois complètement rétabli, remettez le rat infantile dans la cage de sa mère pour qu’il se nourrisse.
    REMARQUE : Après avoir récupéré naturellement, la couleur de la peau des membres et de tout le corps était rouge. Le bébé rat pouvait bouger ses membres de manière autonome et pouvait ramper indépendamment. L’ensemble du processus d’opération a été réalisé dans la salle d’opération spéciale de la salle des animaux SPF de l’Université de médecine traditionnelle chinoise du Yunnan. Pendant la réanimation et l’hypoxie, l’opérateur observe le rat nourrisson en tout temps pour prévenir la mort causée par une mauvaise posture. Les rats femelles en lactation ont été nourris avec des aliments reproducteurs sans agents pathogènes spécifiques (SPF), et lorsque les petits ont pu se nourrir eux-mêmes, les petits ont été sevrés (jour 21 postnatal) et nourris avec des aliments d’entretien SPF.

2. Expérience du réflexe de redressement

1. Le 4^ème jour après la naissance (le 2ème^{jour après} le modélisage), effectuez l’expérience du réflexe de redressement pour vérifier si le modèle a réussi (Figure 1 et Tableau 1).
   1. Soulevez la queue du rat, posez son dos sur une planche horizontale et utilisez le pouce et l’index pour sécuriser son ventre et son cou. Vérifiez si le rat peut revenir à sa position normale. L’incapacité du rat à revenir à la position normale à partir de la position anormale en raison de la perte du réflexe de redressement est enregistrée comme un modèle réussi^16,22.
   2. Notez le temps que chaque groupe de chiots prend pour passer de la position couchée à la position couchée. Commencez à enregistrer le moment où le pouce et l’index sont relâchés simultanément en position couchée, laissez le rat bébé se tourner en position couchée et arrêtez d’enregistrer lorsque les pattes avant et arrière sont placées sur le sol. Si le rat n’a pas pu revenir à la position normale pendant plus de 20 s, notez le temps de redressement à 20 s.

3. Préparation avant l’opération

1. Après le modélisage, séparez le rat infantile atteint de paralysie cérébrale de sa mère et amenez-le dans une salle d’opération avec une température ambiante constante de 22-26 °C pendant 2 min pour s’adapter à l’environnement environnant.
2. Portez des gants jetables pour garder la paume douce et douce et la température entre 36 et 37 °C.
3. Placez délicatement le rat dans la paume de la main gauche. Pliez le pouce gauche pour couvrir les yeux du rat pendant 2 min afin de former un champ de vision sombre afin que le rat puisse s’adapter à l’environnement de la paume de l’opérateur. Utilisez l’index et le majeur droits pour la manipulation.
   REMARQUE : Couvrir les yeux du bébé rat peut créer un environnement sombre. Cela empêchera le bébé rat de s’agiter en raison de l’environnement dangereux et incertain qui affecte les résultats expérimentaux.

4. Répartition des rats entre le groupe témoin et le groupe de traitement

1. Le deuxième jour après la modélisation (P5), vérifiez le modèle par le test du réflexe de redressement et divisez au hasard les rats nourrissons dans les groupes de contrôle et de traitement. Effectuer une manipulation sélective de la colonne vertébrale sur les rats nourrissons du groupe de traitement.
2. Placez le bébé rat en position couchée. Assurez-vous que la colonne vertébrale est toujours maintenue à un niveau droit (Figure 2A).
3. Massez la colonne vertébrale et les deux côtés de la colonne vertébrale pendant 1 min en utilisant la méthode de frottement, et utilisez la méthode de pression et de pétrissage sur la colonne vertébrale et les muscles des deux côtés de la colonne vertébrale pendant 5 min.
   1. Massez la colonne vertébrale et la peau des deux côtés en utilisant la méthode de frottement pour détendre le rat infantile et soulager complètement ses tensions. Assurez-vous que la fréquence des frottements est de 100 à 120 fois/min pendant 1 minute après que le rat infantile est calme et sans agitation.
      1. Utilisez l’index, le majeur et l’annulaire droits comme surface de contact et effectuez un mouvement de frottement circulaire sur la surface de la peau de la colonne cervicale, de la colonne thoracique et de la colonne lombaire de la tête à la queue sans perturber le tissu sous-cutané.
      2. Avec l’index, le majeur et l’annulaire droits comme surfaces de contact, effectuez des mouvements circulaires sur la surface de la peau du muscle trapèze, du muscle fessier superficiel, du muscle rhomboïdien cervical, du muscle rhomboïdien pectoral, du muscle grand dorsal et du muscle oblique externe dans l’ordre de la tête à la queue conformément à la norme anatomique animale²³, sans perturber le tissu sous-cutané.
   2. Traitez d’abord la colonne vertébrale en appuyant et en pétrissant pendant 5 min, puis en pressant et en pétrissant les muscles des deux côtés de la colonne vertébrale pendant 5 min.
      1. Appliquez la méthode de pétrissage sur la colonne vertébrale à une fréquence de 120 fois/min pendant 5 min. Utilisez l’index ou le majeur droit comme surface de contact. De la tête à la queue, effectuez un pétrissage circulaire sur la surface de la peau des vertèbres cervicales, thoraciques et lombaires, combiné à une pression vers le bas (1,77 ± 0,54 N). Assurez-vous que la force atteint les vertèbres cervicales, les vertèbres thoraciques, les vertèbres lombaires et les ligaments supra-épineux.
      2. Appliquez la méthode de pression et de pétrissage sur les muscles des deux côtés de la colonne vertébrale à une fréquence de 120 fois/min pendant 5 min. Utilisez l’index ou le majeur droit comme surface de contact. Selon la norme anatomique animale²³, appuyez sur la surface cutanée du trapèze, du fessier superficiel, du cou rhomboïde, du pectoral rhomboïde, du grand dorsal et des muscles abdominaux obliques externes dans un mouvement de pétrissage rond de la tête à la queue, avec une force de 1,77 ± 0,54 N, de sorte que la force atteigne le trapèze, le fessier superficiel, le cou rhomboïdal, le pectoral rhomboïde, grand dorsal et muscles abdominaux obliques externes (Figure 2B)²³.
4. Appuyez et pétrissez les points d’acupuncture sensibles de la colonne vertébrale (tels que Ganshu, Xinshu, Pishu, Shenshu et Feishu²⁴) à une fréquence de 100 à 120 fois/min pendant 2 min. En utilisant l’index ou le majeur droit comme surface de contact, effectuez un pétrissage circulaire et une pression vers le bas (1,77 ± 0,54 N) sur la peau de surface des points d’acupuncture locaux (tels que Ganshu, Xinshu, Pishu, Shenshu et Feishu) chez les rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale.
   REMARQUE : Les points d’acupuncture ont été sélectionnés selon la « carte des points d’acupuncture animale » formulée par la branche de recherche en acupuncture expérimentale de la Société chinoise d’acupuncture (Figure 3)²⁵.
5. Stimuler localement le membre affecté par la méthode de torsion à une fréquence de 25 fois/min pendant 1 min.
   1. Avec le pouce et l’index droits, pincez le membre affecté du rat infantile atteint de paralysie cérébrale, en exerçant une force symétrique sur les deux doigts. Assurez-vous que la force est douce et que l’action est légère et douce. Frottez l’extenseur du carpe radial, l’extenseur des doigts commun, l’extenseur du carpe cubital, la phalange, l’articulation interphalangienne, le muscle gastrocnémien, le muscle semi-tendineux, l’os métatarsien et l’articulation intermétatarsienne du rat nourrisson d’avant en arrière.
6. Appliquez la méthode de frottement sur la ligne médiane du front vers l’arrière du cerveau à une fréquence de 100 à 120 fois/min pendant 1 min. Utilisez l’index droit comme surface de contact et utilisez la méthode de frottement sur une ligne imaginaire du front au milieu du cerveau postérieur du rat nourrisson (à savoir, une ligne de Baihui, Fengfu et Dazhui) (Figure 3).
   REMARQUE : Le massage est principalement appliqué sur la peau. Il s’agit d’un mouvement circulaire à la surface de la peau de la tête du rat infantile atteint de paralysie cérébrale. Il n’a pas besoin de piloter le mouvement musculaire sous-cutané d’un rat infantile atteint de paralysie cérébrale.
7. À la fin de l’intervention, laissez le rat bébé tranquille pendant 30 min avant de le remettre dans la cage de la mère rat.
   REMARQUE : Avec l’âge, les poils des rats nourrissons deviennent épais, il est donc nécessaire d’enlever les poils du dos de tous les groupes de rats nourrissons pendant l’opération de massage pour éviter d’affecter l’effet expérimental.

5. Détection de la température des points d’acupuncture locaux

1. Utilisez une caméra thermique infrarouge pour détecter la température de la zone d’acupuncture locale avant et après l’opération.
   1. Avant le massage sélectif de la colonne vertébrale, connectez l’interface Type-C du téléphone portable à l’interface USB de l’appareil d’imagerie infrarouge avec un câble de données et allumez le bouton d’alimentation.
   2. Cliquez sur Analyser pour accéder au terminal de téléphone portable du logiciel, sélectionnez Photo pour accéder au mode photo, puis cliquez sur le mode Image dans l’image dans le coin inférieur droit.
   3. Focalisez la caméra sur les zones d’acupuncture des points d’acupuncture de Dazhui, Xinshu et Shenshu (Figure 3) sur le dos du rat nourrisson pour prendre des photos de température. Cliquez sur Photo pour terminer la capture de l’image et l’enregistrer au format JPG.
   4. Connectez l’ordinateur à l’aide d’un câble de données et téléchargez l’image enregistrée sur un ordinateur équipé du logiciel Fotric pour analyse.
      1. Ouvrez le logiciel Fotric sur le PC, ouvrez le fichier local et trouvez l’emplacement de l’image.
      2. Sélectionnez l’espace de travail Thermogramme, sélectionnez l’image à analyser et entrez dans l’interface d’analyse.
      3. Sur l’écran d’analyse , sélectionnez l’image dans la zone Image thermique à droite et ouvrez le verrouillage.
      4. Sélectionnez la fonction Zoom, ajustez la taille de l’image thermique et de la case de gauche Image d’arrière-plan pour qu’elles coïncident, puis désactivez le verrouillage à droite.
      5. Recherchez le rectangle Définir la mesure dans la barre d’outils en haut et marquez le point d’acupuncture à détecter sur la figure.
      6. Cliquez sur Rapport à droite pour enregistrer la valeur de température.

6. Détection de la fonction d’équilibre moteur des rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale

1. Utilisez le test Behavioral Rotarod¹⁹ pour détecter la fonction motrice des rats dans les groupes Sham, Control et Treatment le 61^e jour après la naissance.
   1. Paramètres : Démarrez l’interrupteur d’alimentation, sélectionnez Faire l’expérience pour entrer dans l’étape suivante, sélectionnez Positif, Rats, Timing 5 min pour entrer l’étape suivante, et sélectionnez Temps Acc : 10 s, Vitesse : 10 tr/min.
   2. Ensuite, placez les rats sur la piste de course et commencez le test en cliquant sur Courir une fois qu’ils se sont tenus fermes. Réglez l’état de fonctionnement de chaque exécution sur ON. Entraînez chaque rat une fois pendant 5 minutes, puis commencez à effectuer le test trois fois.
   3. Après l’entraînement, placez les bébés rats sur la piste de course du rotarod. Une fois qu’il est stable, cliquez sur Exécuter et réglez l’état d’exécution sur ON. À la fin de 5 min, sélectionnez Date pour enregistrer le temps et la vitesse de chaque rat tombant de la piste de course pour la première fois, c’est-à-dire les données de temps de course.
2. Utilisez le test de défaillance du pied^20,21 pour évaluer la fonction motrice équilibrée du membre antérieur droit des groupes Sham, Control et Treatment le 61^e jour après la naissance.
   1. Placez les bébés rats à l’extrémité initiale de l’échelle horizontale et enregistrez une vidéo d’eux en train de la traverser jusqu’à l’autre extrémité (100 cm de long et la distance entre chaque échelle est de 2 cm). Après une séance d’entraînement, effectuez le test formel trois fois pour chaque rat à 5 minutes d’intervalle.
   2. Observer le membre antérieur droit lorsque l’animal franchit l’échelle en utilisant la lecture à basse vitesse pour faire un score, comme le montre la norme de pointage (tableau 2).

7. Transfert Western

1. Effectuer une analyse par transfert Western des échantillons de tissus comme décrit précédemment²⁶.
   REMARQUE : La quantité de lysat a été déterminée en fonction de la taille du bloc de tissu. Les anticorps utilisés étaient les suivants : anticorps anti-hormone de croissance primaire (0,5 μg [0,5 ng/voie]) ; anticorps anti-récepteur de l’hormone de croissance (1/1000) ; anticorps anti-bêta-actine de référence interne (1/2000) pour les anticorps primaires ; Anti-RabbitIgG H&L (HRP) (1/10000) de chèvre pour l’anticorps secondaire.

8. Détecter la force de la main

1. Portez l’appareil utilisé pour détecter la force de manipulation sur la main utilisée pour le massage. Ajustez le doigt utilisé pour masser le bébé rat avec la puce de capteur de l’appareil et allumez le bouton d’alimentation .
2. Connectez l’interface du disque dur qui stocke le logiciel de test manuel à l’ordinateur et entrez l’adresse IP dédiée du testeur manuel dans la zone de saisie URL.
3. Installez le client SpringVR sur l’ordinateur, cliquez pour entrer dans l’interface de collection et sélectionnez le motif de doigt dans le coin inférieur droit pour tester la force de manipulation.
4. Sélectionnez l’option Pression et cliquez sur Démarrer pour commencer à enregistrer la force manuelle de l’opérateur pendant le fonctionnement. Le logiciel enregistrera automatiquement l’intensité de la manipulation et générera une table de données sur le disque local où se trouveront les données du nom de fichier PressureSensor .

9. Statistiques des données

REMARQUE : Le logiciel SPSS26.0 a été utilisé pour l’analyse statistique, Graphpad Prism9.0.0 pour la production de graphiques à barres et Image J pour l’analyse des valeurs de gris des bandes de protéines.

1. Analyser et présenter toutes les données sous forme de moyenne ± d’écart-type (moyenne ± écart-type).
   REMARQUE : La norme d’essai était α = 0,05, et P ≤ 0,05 a été considérée comme statistiquement significative. Le test de Fisher a été utilisé parce que les données ont été analysées par analyse de la variance et de la normalité et qu’elles étaient conformes aux caractéristiques de distribution normale et à l’homogénéité de la variance.

Résultats

La manipulation sélective de la colonne vertébrale peut favoriser la prise de poids chez les rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale.
Au cours du traitement, le poids corporel a été mesuré aux jours 3, 14, 28, 42 et 61 postnatals (Figure 4, Tableau 3). Le troisième jour après la naissance, le poids corporel du groupe Sham était de 5,53 ± 0,035 g, et le poids corporel du groupe témoin était de 3,15 ± 0,43 g. Le poids corporel du groupe de traitement était de 4,42 ± 0,13 g, et il n’était pas significativement différent de celui des groupes placebo et témoin avant la modélisation.

Le 14e jour postnatal, le poids corporel du groupe Sham était de 35,97 ± 1,019 g, le poids corporel du groupe témoin était de 28,00 ± 0,7403 g et le poids corporel du groupe de traitement était de 33,78 ± 3,705 g. Il n’y avait pas de différence significative dans le poids corporel entre les groupes de traitement et de placebo. Le poids du groupe de traitement par rapport au groupe témoin était statistiquement significatif (P < 0,01).

Le 28e^{jour après} la naissance, le poids corporel du groupe Sham était de 104,9 ± 3,534 g, le poids corporel du groupe témoin était de 80,35 ± 6,767 g et le poids corporel du groupe de traitement était de 96,73 ± 7,638 g. Le groupe de traitement a été comparé au groupe témoin, et il était statistiquement significatif (P < 0,01).

Au 42e jour postnatal, le poids corporel du groupe Sham était de 194,1 ± 4,333 g, le poids corporel du groupe témoin était de 138,0 ± 6,029 g et le poids corporel du groupe de traitement était de 173,9 ± 5,433 g. Il y avait une différence statistiquement significative de poids corporel entre les groupes de traitement et de contrôle (P < 0,0001).

Au 61e jour postnatal, le poids corporel du groupe Sham était de 321,5 ± 5,675 g, le poids corporel du groupe témoin était de 230,3 ± 5,198 g et le poids corporel du groupe de traitement était de 268,9 ± 15,22 g. P < 0,0001 a été considéré comme statistiquement significatif. Il y avait une différence statistiquement significative de poids corporel entre les groupes de traitement et de contrôle à P < 0,0001.

La manipulation sélective de la colonne vertébrale peut améliorer la fonction d’équilibre moteur efficace de la paralysie cérébrale.
Le 61^ème jour après la naissance, après la fin du traitement, nous avons effectué le test de fatigue rotarod. Le premier temps de chute de chaque groupe était de 296,1 ± 1,65 s dans le groupe Smock, de 102,7 ± 7,73 s dans le groupe témoin et de 220,1 ± 8,04 s dans le groupe de traitement. Il y avait une différence significative entre le groupe placebo et le groupe témoin (P < 0,0001). La différence entre le groupe de traitement et le groupe témoin était statistiquement significative (P < 0,0001), et la différence entre le groupe de traitement et le groupe de placebo était statistiquement significative (P < 0,0001) (figure 5, tableau 4)

Le 61e^{jour après} la naissance, après la fin du traitement, les scores de faute de pied des groupes Sham et Contrôle étaient respectivement de 5,53 ± 0,03 et de 3,15 ± 0,43. Le score du groupe Traitement, 4,42 ± 0,13, était significativement inférieur à celui du groupe Sham (P < 0,0001). Le score du groupe de traitement était significativement plus élevé que celui du groupe témoin (P < 0,0001). Comparativement au groupe de traitement et au groupe placebo, la différence était statistiquement significative (P < 0,0001) (figure 6, tableau 5).

La manipulation sélective de la colonne vertébrale peut réguler le niveau de sécrétion d’hormone de croissance dans la paralysie cérébrale.
Des échantillons de tissus ont été prélevés le 32e jour postnatal, et l’hypothalamus de rats atteints de paralysie cérébrale a été sélectionné pour le Western blot, et les anticorps primaires et secondaires correspondants ont été sélectionnés : les anticorps utilisés étaient les anticorps anti-hormone de croissance, les anticorps anti-récepteur de l’hormone de croissance, l’anticorps anti-bêta-actine de référence interne pour les anticorps primaires et l’anticorps anti-RabbitIgG H&L (HRP) (1/10000) de chèvre pour les anticorps secondaires. La manipulation sélective de la colonne vertébrale peut favoriser la croissance et le développement des rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale en régulant l’expression de l’hormone de croissance (GH) et du récepteur de l’hormone de croissance (GHR) (Figure 7, Tableau 6)²⁶.

Favoriser la croissance et le développement des rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale peut améliorer le contenu de la sérotonine et de la noradrénaline dans l’hippocampe, améliorant ainsi la capacité d’apprentissage et la mémoire²⁷.

La manipulation sélective de la colonne vertébrale peut améliorer efficacement la température locale des points d’acupuncture (Figure 8, Tableau 7).
L’imagerie thermique infrarouge a été utilisée pour détecter la température de la zone d’acupuncture locale avant et après le traitement dans le groupe de traitement. Il a été constaté que la température était maintenue à 32,92 ± 0,55 °C avant le traitement, à 36,32 ± 0,15 °C immédiatement après le traitement et à 35,32 ± 0,28 °C 2 min après le traitement. La température était de 34,61 ± 0,17 °C 5 min après la fin du traitement et de 34,28 ± 0,60 °C 10 min après la fin du traitement. Les différences étaient statistiquement significatives par rapport à la température immédiate avant la fin du traitement et à la zone d’acupoint local 2 min, 5 min et 10 min après le traitement (P < 0,05). Après une manipulation sélective de la colonne vertébrale, la température de la zone d’acupuncture locale dans le groupe de traitement a été augmentée et maintenue dans une certaine mesure.

Figure 1 : Réflexe de redressement. (A) Représentation schématique de l’expérience du réflexe de redressement. Le test du réflexe de redressement a été effectué le^{4ème jour après} la naissance (le deuxième jour après le modélisme) pour vérifier le succès du modélisme. (B) Graphique à barres de l’essai de réflexe de redressement dans chaque groupe (n = 6, moyenne ± ET). Remarque : ns indique P > 0,05 et aucune différence statistique. indique un P < 0,0001, indiquant une différence très significative. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 2 : Manipulation sélective de la colonne vertébrale. (A) Manipulation des petits avant la manipulation. Les bébés rats ont été placés dans la paume de l’opérateur et gardés silencieux, ce qui était l’environnement du camp. (B) Représentation de la manipulation sélective de la colonne vertébrale. Appuyez et pétrissez les muscles des deux côtés de la colonne vertébrale. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 3 : Carte des points d’acupuncture sur le dos d’un rat humain par rapport à un rat SD. (A) Humain et (B) rat SD. C7 : septième vertèbre cervicale ; GV14 : Dazhui (GV14), localisation : entre la septième vertèbre cervicale et la première vertèbre thoracique, ligne médiane dorsale ; T3 : troisième vertèbre thoracique ; BL13 : Feishu (BL13), localisation : entre les deux côtes au-dessous de la troisième vertèbre thoracique ; T5 : cinquième vertèbre thoracique ; BL15 : pointe Xinshu, située entre les deux côtés de la côte inférieure de la cinquième vertèbre thoracique ; T7 : septième vertèbre thoracique ; BL17 : pointe Geshu, localisation : côtes inférieures et inférieures de la septième vertèbre thoracique ; BL18 : pointe de Ganshu, localisation : côtes inférieures et inférieures de la septième vertèbre thoracique ; T11 : onzième vertèbre thoracique ; GV6 : pointe de Jizhong, située entre le onzième et le douzième apophyse épineuse de la vertèbre thoracique ; BL20 : pointe Pishu, située entre les deux côtes au-dessous de la douzième vertèbre thoracique ; L2 : deuxième colonne lombaire ; GV4 : Mingmen (GV4), localisation : la ligne médiane dorsale, la dépression sous le deuxième apophyse épineuse lombaire ; BL23 : Point de Shenshu, situé de part et d’autre de la deuxième colonne lombaire. GV20 : Baihui (GV20), localisation : os pariétal médian ; GV16, pointe Fengfu, localisation : dépression dorsale de l’articulation occipito-atlantoaxiale derrière la crête occipitale. L’emplacement des points d’acupuncture dans le corps humain est très cohérent avec l’emplacement des points d’acupuncture chez les animaux à partir de la position anatomique. Le point de réponse anormale était proche du point de projection de la surface corporelle innervée. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 4 : Diagramme à barres de la mesure du poids dans chaque groupe (n = 6, moyenne ± écart-type). Remarque : ns P >0,05, aucune différence statistique ; **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001, la différence était statistiquement significative. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 5 : Graphique à barres du temps de la première chute de l’essai Roat-rod dans chaque groupe (n = 6, moyenne ± écart-type). Remarque : ****P < 0,0001, la différence était statistiquement significative. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 6 : Diagramme à barres des scores de faute de pied dans chaque groupe (n = 6, moyenne ± écart-type). Remarque : ****P < 0,0001, la différence était statistiquement significative. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 7 : Bandes de Western blot de la GH et du récepteur de la GH. Le Western blot a été utilisé pour détecter la sécrétion d’hormone de croissance au niveau de la biologie moléculaire dans chaque groupe, et l’effet de la manipulation sélective de la colonne vertébrale sur l’hormone de croissance a été observé. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 8 : Surveillance de la température avant et après le traitement. (Panneau supérieur) Images thermiques prises par une caméra thermique infrarouge. La température (°C) de la zone d’acupuncture locale a été enregistrée par une caméra thermique infrarouge avant et après le traitement au tuina. (A) Avant le traitement au tuina. (B) Température immédiatement à la fin du traitement. (C) Température du point d’acupuncture local 2 min après le traitement. (D) Température locale du point d’acupuncture 5 min après la fin du traitement. (E) température locale du point d’acupuncture 10 min après le traitement. (Panneau inférieur) Diagramme à barres de la surveillance de la température avant et après le traitement (n = 3, moyenne ± écart-type). *P < 0,05, P < 0,01, * * * * *P < 0,001, * * * P < 0,0001, la différence est statistiquement significative. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Groupe	Nombre de cas (n)	Réflexe(s) de redressement(s)
Feinte	6	0,77 ± 0,10
Contrôle	6	19.00 ± 2.04*
Traitement	6	19.77 ± 0.55#

Tableau 1 : Statistiques temporelles du réflexe de redressement chez les rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale (moyenne ± ET ; n = 6). Les petits de chaque groupe ont été soumis au test du réflexe de redressement le 4e^{jour après} la naissance (le 2e^{jour après} le modélisme) pour vérifier si le modèle était réussi. * Par rapport au groupe Sham, P < 0,0001 ; # par rapport au groupe témoin, P < 0,0001.

Score	Norme d’évaluation
1	Lorsque le jeune rat est placé sur l’échelle horizontale, le pied glisse lorsqu’il porte du poids, ce qui affecte la marche
2	Lorsque le jeune rat est placé sur l’échelle, le pied glisse lorsqu’il porte du poids, mais n’affecte pas la marche
3	Lorsque le jeune rat est placé sur l’échelle horizontale, le rat déplace rapidement le pied vers la prochaine marche de l’échelle en portant le poids
4	Lorsque le jeune rat est placé sur l’échelle horizontale, le rat place partiellement le pied et se déplace sur l’échelle en portant du poids
5	Lorsque le jeune rat est placé sur l’échelle horizontale, le rat met son pied sur une marche et se déplace rapidement vers une autre marche
6	Lorsque le jeune rat est placé sur l’échelle horizontale, le rat place ses coussinets correctement et supporte entièrement le poids du corps

Tableau 2 : Tableau standard des résultats du test de faute de pied

Heure (jour)	Nombre de cas (n)	Groupe
		Feinte	Contrôle	Traitement
P3	6	8,52 ± 0,27	8,60 ± 0,08	8,45 ± 0,28D
P14	6	35,97 ± 1,01	28,00 ± 0,74*	33.78 ± 3.70Ñ
P28	6	104,9 ± 3,53	80,35 ± 6,76*	96.73 ± 7.63Ñ
P42	6	194,1 ± 4,33	138,0 ± 6,02*	173,9 ± 5,43#D
P61	6	321,5 ± 5,67	230,3 ± 5,19*	268,9 ± 15,22#D

Tableau 3 : Résultats de l’analyse de poids de chaque groupe (moyenne ± écart-type) (g). Remarque : Ñ Par rapport au groupe témoin, P < 0,01 ; ° Par rapport au groupe Sham, P < 0,01 ; à Comparé au groupe témoin, P < 0,001 ; * Par rapport au groupe Sham, P < 0,0001 ; # Par rapport au groupe témoin, P < 0,0001 ; D Par rapport au groupe fictif, P < 0,0001.

Groupe	Nombre de cas (n)	Roat-rod/temps/s
Feinte	6	296,1 ± 1,65
Contrôle	6	102,7 ± 7,73*
Traitement	6	220,1 ± 8,04#D

Tableau 4 : Test Rotarod chez les nourrissons de rats de chaque groupe (moyenne ± écart-type) (s). Remarque : * Par rapport au groupe fictif, P < 0,0001 ; # Par rapport au groupe témoin, P < 0,0001 ; D Par rapport au groupe fictif, P < 0,0001.

Groupe	Nombre de cas (n)	Score de faute de pied
Feinte	6	5,53 ± 0,03
Contrôle	6	3,15 ± 0,43*
Traitement	6	4,42 ± 0,13#D

Tableau 5 : Scores de fautes de pied de chaque groupe (moyenne ± écart-type). Remarque : * Par rapport au groupe fictif, P < 0,0001 ; # Par rapport au groupe témoin, P < 0,0001 ; D Par rapport au groupe fictif, P < 0,0001.

Groupe	GH	GHR
Feinte	2,325 ± 0,830	1,469 ± 0,265
Contrôle	1.563 ± 0.070#	1.563 ± 0.070Ñ
Traitement	2,471 ± 0,956*	2.471 ± 0.956&

Tableau 6 : Données sur la valeur de la bande grise du transfert Western de l’hormone de croissance et du récepteur de l’hormone de croissance (n = 10). GH :* La comparaison par paires entre le groupe de traitement et le groupe témoin (P = 0,020 < 0,05) a montré une différence statistiquement significative ; # La comparaison par paires entre le groupe Sham et le groupe témoin (P = 0,022 < 0,05) a montré une différence significative ; La comparaison par paires entre le groupe de traitement et le groupe placebo n’a montré aucune signification statistique (P = 0,076 > 0,05) ; La comparaison par paires entre le groupe de traitement et le groupe témoin (P = 0,024 < 0,05) a montré une différence significative ; Ñ La comparaison par paires entre le groupe Sham et le groupe Modèle (P = 0,021 < 0,05) a montré une différence statistiquement significative ; La comparaison par paires entre le groupe de traitement et le groupe placebo n’a montré aucune signification statistique (P = 0,085 > 0,05).

Durée du traitement	Nombre de cas (n)	Température
Avant le traitement	3	32.92 ± 0.55
Immédiatement	3	36,32 ± 0,15*
Après 2 min	3	35.32 ± 0.28#
Après 5 min	3	34.61 ± 0.17Ñ
Après 10 min	3	34.28 ± 0.60Dà

Tableau 7 : Résultats de la surveillance de la température avant et après traitement (moyenne ± écart-type) (°C). Remarque : * Par rapport à ceux avant le traitement, P < 0,0001 ; # Par rapport à celui d’avant le traitement, P < 0,001 ; D Par rapport à 0 minute après le traitement, P <0,001 ; Ñ Par rapport à avant le traitement, P < 0,01 ; a Par rapport au prétraitement, le P < de 0,05.

Discussion

Parce que l’ischémie et l’hypoxie sont des facteurs pathogènes importants de la paralysie cérébrale, la méthode internationalement reconnue d’établissement du modèle de paralysie cérébrale est combinée à l’hypoxie pour préparer le modèle de paralysie cérébrale 16,28,29,30. Lorsque la paralysie cérébrale se développe, elle provoque un retard global du développement, y compris le poids et la fonction motrice, qui peut être lié au niveau de sécrétion d’hormone de croissance³¹. La manipulation sélective de la colonne vertébrale a été utilisée pour traiter les rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale. Le poids corporel a été surveillé pendant le traitement et des tests comportementaux tels que le test Rotarod, le score de faute de pied et l’hormone de croissance ont été effectués. La température des points d’acupuncture locaux a été observée avant et après le traitement. Après l’établissement du modèle d’ischémie-hypoxie, le rat infantile atteint de paralysie cérébrale a perdu du poids. Pourtant, avec l’extension du massage, il a été constaté que la prise de poids du groupe de traitement était significativement meilleure que celle du groupe de contrôle. Il présentait également des avantages évidents dans la régulation de la sécrétion d’hormone de croissance. Ces résultats indiquent que la manipulation sélective de la colonne vertébrale peut améliorer efficacement la croissance et le développement des rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale. De plus, parce que l’artère carotide commune gauche a été utilisée pour établir le modèle de l’ischémie et de la coagulation combinées à l’hypoxie, il doit y avoir des dommages au cortex gauche, entraînant une altération de la fonction motrice. Après le traitement, nous avons utilisé le test Rotarod et le score Foot-fault pour détecter la capacité comportementale des rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale 32,33,34. Il a été constaté que la fonction motrice des rats atteints de paralysie cérébrale s’améliorait après une manipulation sélective de la colonne vertébrale³⁵. La manipulation sélective de la colonne vertébrale peut améliorer efficacement la croissance, le développement et la fonction motrice des rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale.

Le massage traditionnel chinois est basé sur les points d’acupuncture et le système des méridiens. Le but de cette expérience est principalement d’observer l’influence du massage traditionnel chinois sur la croissance et le développement de rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale. Le traitement de massage est principalement effectué sur le méridien de la vessie des première et deuxième lignes latérales du pied et du méridien Du, mais différent de l’acupuncture, il y a un emplacement clair du point de stimulation. Le massage est une sorte de stimulation faciale dans laquelle les doigts de l’opérateur sont utilisés pour l’opération abdominale, et la surface de contact a une certaine gamme de zones, un diamètre d’environ 1,0 cm circulaire. Les méridiens ont également une certaine portée ; cependant, la surface de contact du doigt humain est plus large que la zone d’acupoint du rat SD. Cela signifie qu’il y a une procédure opérationnelle inévitable à certains endroits sans point d’acupuncture. Par conséquent, nous n’avons pas défini un groupe de massage hors méridien séparément comme contrôle lors de l’attribution des groupes pour cette étude.

Le massage sélectif de la colonne vertébrale sélectionne la colonne vertébrale et les muscles des deux côtés de la colonne vertébrale pour la stimulation pendant l’opération, ce qui peut soulager les spasmes musculaires locaux, favoriser la circulation sanguine locale et améliorer la fonction de la zone d’innervation correspondante pour obtenir l’effet de soulager le méridien et les collatéraux et la régulation et le traitement globaux. Il incarne pleinement l’intégration du concept holistique de la médecine traditionnelle chinoise, de la théorie des méridiens de la médecine traditionnelle chinoise et du principe de l’innervation du nerf rachidien, et il prend en compte l’ensemble tout en effectuant un traitement local de la paralysie cérébrale⁸.

Dans la procédure, la méthode de massage sur la colonne vertébrale et les muscles et ligaments des deux côtés du traitement, c’est-à-dire le méridien Du et le méridien de la vessie des première et deuxième lignes latérales de stimulation de massage, peut jouer un rôle dans la connexion des points d’acupuncture du dos, de la moelle épinière et du cerveau. Par conséquent, lorsque nous effectuons des opérations de manipulation sur les points arrière d’un rat infantile, nous pouvons stimuler les points dorsaux et les méridiens pour qu’ils fassent circuler le qi et le sang, réguler les fonctions des viscères du corps et ainsi affecter les fonctions de la moelle épinière et du cerveau pour favoriser la croissance et le développement du rat infantile. Dans l’ensemble, en stimulant le méridien Du et le méridien de la vessie des première et deuxième lignes latérales du pied-taiyang, le Yang de tout le corps peut être mobilisé et la résistance globale aux maladies du corps peut être améliorée, ce qui reflète le concept global de la médecine traditionnelle chinoise 16,26,35,36,37,38 . Le méridien Du provient de la partie inférieure de l’abdomen du corps humain et atteint le sommet de la tête le long de la colonne vertébrale, régulant le qi Yang du corps humain³⁶. Le méridien de la vessie de Foot-Taiyang longe principalement les deux côtés du vaisseau gouverneur, et les points back-shu de cinq organes zang sont situés sur la première ligne latérale du méridien de la vessie de Foot-Taiyang, impliqués dans le traitement des maladies des organes de zangfu^39,40. Les méridiens et les collatéraux sont divisés en collatéraux flottants, collatéraux minuscules et régions cutanées. Par conséquent, lorsque nous effectuons la procédure sur la peau arrière d’un rat infantile atteint de paralysie cérébrale, nous pouvons opérer dans la direction des méridiens et stimuler efficacement les collatéraux flottants, les collatéraux minuscules et les régions cutanées. Par conséquent, en stimulant les points d’acupuncture et les méridiens pour faire fonctionner le qi et le sang, la fonction des viscères du corps est régulée et entraîne une prise de poids des chiots⁸.

Nous avons trouvé des points de réaction en forme de cordon sur le méridien de la vessie de Foot-Taiyang sur le dos d’enfants atteints de paralysie cérébrale, et la thermographie infrarouge a été utilisée pour détecter la température anormale de certains points d’acupuncture. Combiné avec le principe de l’innervation du nerf rachidien, nous avons constaté que ces points de réaction étaient proches des points de projection à la surface de l’innervation nerveuse, ce qui est également cohérent avec le principe de la résection sélective de la racine du nerf rachidien pour traiter la paralysie cérébrale (Figure 3)⁴¹. Les points d’acupuncture infusent les méridiens, le qi et le sang et relient la surface du corps et les organes zang-fu^42,43. Par conséquent, dans le traitement des rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale, la manipulation sélective de la colonne vertébrale est utilisée pour opérer les points d’acupuncture sur le dos, activant les points d’acupuncture locaux, débloquant les méridiens, le qi et le sang, et les points d’acupuncture sont dans un état sensible à la chaleur⁴⁴. Après l’opération et le traitement, une certaine température peut encore être maintenue.

L’utilisation de la méthode de twirling sur le membre droit peut soulager le spasme du tissu musculaire local, diminuer les méridiens locaux et améliorer le dysfonctionnement local. Enfin, nous choisissons d’effectuer une massothérapie sur la tête car la tête est la tête de tout le Yang, où convergent l’essence qi et le sang des cinq organes zang-fu. Le traitement de cette partie peut réconcilier le Yin et le Yang et obtenir l’effet d’une réhabilitation globale^16,18. En conclusion, la manipulation sélective de la colonne vertébrale peut améliorer efficacement le poids corporel, la fonction motrice et l’hormone de croissance des rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale pour favoriser la croissance et le développement.

Il y a encore quelques points importants à prendre en compte pendant l’opération. Tout d’abord, il convient de noter que le rat nourrisson doit s’adapter à la température de la paume et que l’état d’agitation est stable avant le traitement. Les opérateurs doivent utiliser des gants jetables pour éviter l’abandon des rats femelles en raison d’anomalies après contact direct avec la peau des opérateurs. Avant l’opération, les opérateurs doivent être uniformément formés à leurs manipulations et peuvent opérer après avoir réussi l’évaluation. Ici, nous avons utilisé un testeur de manipulation spécifique pour tester afin d’assurer la standardisation du fonctionnement. Comme nous avons observé des changements de poids au cours de la croissance chez des rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale, la manipulation doit être vérifiée régulièrement. Lors de la pression et du pétrissage, la pression vers le bas doit être verticale et la force doit être légère à lourde, stable et continue afin que la sensation de stimulation puisse atteindre pleinement les tissus profonds du corps. N’utilisez pas la violence rapide. La gamme de pétrissage doit être petite et grande, et la force doit d’abord être légère et lourde. La gamme de pétrissage doit être petite et grande, et la force doit d’abord être légère et lourde. Le fonctionnement de la méthode de pétrissage doit atteindre la couche musculaire et ligamentaire. La force manuelle était de 1,77 ± 0,54 N lorsqu’elle était surveillée par le testeur manuel. En revanche, seule la surface de la peau est traitée lors du frottement. De plus, la peau des bébés rats atteints de paralysie cérébrale est délicate et un mauvais fonctionnement peut entraîner des lésions cutanées.

En tant que traitement externe de la médecine traditionnelle chinoise, la manipulation sélective de la colonne vertébrale est un complément efficace aux méthodes de traitement existantes de la paralysie cérébrale, et c’est une méthode de traitement diversifiée de la paralysie cérébrale. Il prend en compte à la fois le traitement global et le traitement local, qui peut donner aux enfants atteints de paralysie cérébrale une réadaptation complète et peut apporter de meilleurs avantages économiques et effets sociaux à la famille et à la société des enfants. Cependant, cette technique présente également quelques inconvénients, car les opérateurs ont des compréhensions et une maîtrise différentes de la technique, le degré d’unité de la technique est faible, la déviation de l’effet thérapeutique peut se produire et l’effet curatif n’est pas exact. L’étape suivante consiste à faire en sorte que la manipulation atteigne un niveau uniforme. Bien que nous ayons confirmé que la manipulation sélective de la colonne vertébrale affecte positivement la croissance et le développement des rats nourrissons atteints de paralysie cérébrale et peut jouer un rôle thérapeutique en régulant l’homéostasie inflammatoire, son mécanisme d’action sur la neuroplasticité et la régénération de la substance blanche doit encore être étudié.

En raison de la certitude de l’effet curatif et de la théorie scientifique de la manipulation sélective de la colonne vertébrale, basée sur la théorie du fonctionnement de la manipulation sélective de la colonne vertébrale, cet ensemble de manipulations peut être étendu pour traiter d’autres maladies pédiatriques, telles que le retard de croissance des enfants, le retard du développement du langage, etc. Fournir des idées de recherche enrichit le système de traitement pour la plupart des travailleurs médicaux et des chercheurs. Par conséquent, cet article est propice à la vulgarisation et à l’application de la technique.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Plaques à 96 puits	Beijing Lanjieke Biotechnology Co., LTD	11510	Détermination de la concentration en protéines
Anticorps anti-bêta-actine	Abacm	Ab8227	Dilution : 1/2000
Anticorps anti-hormone de croissance	Abacm	Ab126882	0,5 & micro ; g (0,5 ng/voie)
Anticorps anti-récepteur de l’hormone de croissance	Abacm	Ab202964	Dilution : 1/1000
Microscope opératoire de base	Shanghai YuYAN Scientific Instrument Co. LTD	SM-101	L’artère carotide commune a été isolée au microscope lors de la modélisation
Développeur BCA	Biyuntian Biological Engineering Co., LTD	P0010	Détermination de la concentration
en protéinesSystème d’imagerie par chimiluminescence	Shanghai Qinxiang Scientific Instrument Co., LTD	100240073	Imagerie par bandes de protéines
Marqueur précoloré à charge directe	Beijing Kangrunchengye Biotechnology Co., LTD (GenStar)	M221	Western Blot
DK-30Machine à glace à neige	automatique Henan Brothers instrument equipment Co., LTD	SHDX0023	Fabrication de glace
ECL kit	de substrat luminescentBeijing Lanjieke Biotechnology Co., LTD	BL520B	Convertir les images latentes d’un film exposé en images visibles
Bain d’eau thermostatique chauffé électriquement	TAISITE INSTRUMENT	DK-98-II	Les jeunes rats ont été réanimés après modélisation
Balances électroniques	Kunshan YoukeWEI ELECTRONIC Technology Co. LTD	CN-LQC10002	Le poids corporel des jeunes rats a été mesuré
Petit stylo de coagulation électrique blanc allemand Hemostat	Haohang	L55& fois ; W125&fois ; H37	Il a été utilisé pour coaguler l’artère carotide commune gauche
Gant	Jiangsu YANGzi LiDE Medical Device Co. LTD	Q/320684 YZYL001-2017	Pour l’opération de massage
Glycine	Beijing Soleibao Technology Co., Ltd.	Cat#G8200	Solution électrophorétique, Configurer le fluide de transfert
Chèvre Anti-RabbitIgG H& L (HRP)  ;	Abacm	Ab6721	Dilution : 1/10000
Machine à eau ultra-pure de laboratoire intelligente	Chongqing huachuag water treatment engineering co.,LTD	N/A	Filtration (15 L)
Isoflurane	Shandong Ante Animal Husbandry Technology Co. LTD	15198	L’anesthésie a été maintenue par induction chez les jeunes rats
LinkIR	FOTIRC	V1.3.2.134	Logiciel d’analyse d’images infrarouges
Broyeur de tissus à basse température et à grande vitesse	Wuhan Servicebio technology CO., LTD	SKZ3F20200191	Broyage de tissus
Méthanol	Guangdong Guanghua Sci-Tech Co., Ltd	20220519	Configurer le fluide de transfert
Mini-PROTEAN Tetra	Bole Life Medical Products (Shanghai) Co., Ltd	552BR 233193	Spectrophotomètre à microplaques
spectre Multiskan par électrophorèse	TECAN	Spark	L’absorbance et la concentration des protéines tissulaires ont été détectées
Gants intelligents à détection de pression	Jinan Super Sense Intelligent Technology Co. LTD	Miiglove	Il est utilisé pour mesurer la force de manipulation de l’opérateur
membrane PVDF	MerckMillipore Corporation  ;	IPVH00010  ;	Transfert Western
Centrifugeuse réfrigérée	Hettich Precision Technology (Zhuhai) Co., LTD	MIKRO 220R	Centrifuge
Research Caméra thermique trois-en-un	FOTIRC	226S (384 x 288)	Mesure de la température
RIPA lysat	Beijing Solaibao Technology Co., LTD (Solarbio)	R0010	Tissu lytique
SHA-CA affichage numérique oscillateur thermostatique à bain d’eau	Changzhou Aohua Instrument Co. LTD	SHA-CA	De jeunes rats ont été utilisés dans l’hypoxie
Appareil de rotation de fatigue à six rats	Shanghai Duoyi Industry Co., LTD	DO01104RT703	la fonction motrice du CP a été détectée
Lait écrémé en poudre	Guangzhou Saiguo Biotechnology Co., LTD (BIOFROXX)	1172GR500	Liquide de confinement
SPF aliment d’élevage	SPF (Beijing)biotechnology co.,Ltd.	A1EC30005A1S4285266	rats femelles allaitants ont été nourris
avec des aliments d’entretien	SPF (Beijing) biotechnology co., Ltd.	A1EC30005A1S4285267	Les chiots ont été nourris après le sevrage
Plaque chirurgicale	Shanghai YuYAN Scientific Instrument Co. LTD	51002	Le modèle de table d’opération a été établi chez de jeunes rats
TS-200 Agitateur orbital	Haimen Qilin Bell Manufacturing Co., Ltd.	TS-8S	Fixation sur gel
Tween 80	MedChemExpress	HY-Y1819	Configurer TBST  ;
ZS-MV Appareil d’anesthésie portable	ZHONGSHI SCIENCE & TECHNOLOGIE	ZS-MV-I	L’anesthésie a été induite et maintenue chez des animaux de laboratoire