Effets de l’oxygénation par membrane extracorporelle sur le système de coagulation

Résumé

Nous présentons un protocole pour l’établissement d’un modèle d’oxygénation par membrane extracorporelle (ECMO) éveillée à long terme chez le mouton. Une attention particulière est accordée à la gestion et à l’évaluation du système de coagulation au cours du modèle ECMO.

Résumé

Cette étude visait à étudier les effets de l’oxygénation par membrane extracorporelle éveillée (ECMO) à long terme sur le système de coagulation dans un modèle de mouton. Au total, dix moutons en bonne santé ont été inclus dans l’étude, avec 5 moutons dans chaque groupe. Dans le groupe ECMO VEINO-ARTÉRIEL (V-A ECMO), la canulation a été réalisée dans l’artère carotide droite et la veine jugulaire externe droite. Dans le groupe ECMO VEINO-VEINEUX (V-V ECMO), un cathéter à double lumière a été utilisé pour l’insertion dans la veine jugulaire externe droite. Après avoir commencé l’ECMO, les moutons ont été récupérés de l’anesthésie et sont restés éveillés pendant 7 jours. L’objectif de temps de coagulation activée (ACT) a été fixé à 220-250 s. Dans les deux groupes, l’ACT réel a fluctué autour de 250 s, la dose d’héparine augmentant progressivement, atteignant près de 60 UI/kg/min à la fin des expériences. De plus, les valeurs du temps de thromboplastine partielle activée (APTT) et du temps de thrombine (TT) étaient significativement plus élevées dans le groupe V-A ECMO par rapport au groupe V-V ECMO, malgré l’administration des mêmes doses d’héparine. Bien que les résultats des tests de laboratoire aient fluctué dans une fourchette normale et raisonnable, des foyers d’infarctus dans les reins ont été observés dans les deux groupes à la fin de l’étude.

Introduction

L’oxygénation par membrane extracorporelle (ECMO) est une intervention qui sauve des vies, fournissant un soutien cardiopulmonaire aux patients gravement malades. Elle est classée en deux formes principales : l’ECMO veino-artérielle (ECMO V-A) et l’ECMO veino-veineuse (ECMO V-V^)1,2. L’ECMO V-A est utilisée pour les patients souffrant d’insuffisance circulatoire, tandis que l’ECMO V-V est préférée pour ceux souffrant d’insuffisance respiratoire mais sans dysfonctionnement cardiovasculaire ^sévère3,4.

La thrombose et les saignements sont des complications fréquentes chez les patients ECMO⁵. Le circuit ECMO expose le sang à des surfaces artificielles, initiant des réponses de coagulation complexes⁶. Ces processus peuvent entraîner des lésions endothéliales et des troubles de la microcirculation, entraînant un dysfonctionnement ultérieur des organes vitaux ^7,8. Par conséquent, une prise en charge efficace de l’anticoagulation systémique est considérée comme cruciale pour les patients ECMO. Malgré cela, il reste un manque de preuves pour guider les stratégies d’anticoagulation dans divers contextes cliniques liés à l’ECMO.

La mise en place d’un modèle animal ECMO stable peut fournir des informations sur l’impact de l’ECMO sur le corps, contribuant ainsi de manière significative à l’optimisation des stratégies de gestion de l’ECMO, à la réduction des complications liées à l’ECMO et à l’amélioration des résultats des patients dans la pratique clinique. Les grands animaux, tels que les moutons et les porcs, sont les principaux choix pour établir des modèles ECMO en raison de leurs paramètres physiologiques ressemblant beaucoup à ceux des humains ^9,10. Cependant, les modèles ECMO animaux précédents avaient un temps de maintenance inférieur à 24 h, ce qui rendait difficile l’évaluation complète de l’impact de l’ECMO sur le système de coagulation¹¹. Par conséquent, il est nécessaire d’établir des modèles à long terme d’ECMO de grands animaux pour explorer en profondeur les mécanismes physiopathologiques de l’ECMO. L’utilisation de grands modèles animaux à long terme pour étudier les effets de l’ECMO sur le système de coagulation peut fournir des preuves plus solides pour la pratique clinique.

Cette étude vise à établir un modèle V-A et V-V ECMO éveillé à long terme (7 jours) chez des moutons sains. L’objectif central de l’ensemble de l’établissement et de l’évaluation du modèle est la gestion de l’anticoagulation.

Protocole

Ce protocole expérimental a reçu l’approbation du Comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux de l’hôpital de Fuwai (n° 0101-2-20-HX(X)). Toutes les procédures ont respecté les directives décrites dans le Guide d’utilisation et de soins des animaux de laboratoire des National Institutes of Health. L’expérience s’est déroulée au Laboratoire clé de recherche préclinique et d’évaluation des matériaux d’implants cardiovasculaires de Pékin, Centre d’expérimentation animale de l’hôpital Fuwai (n° d’enregistrement. CNAS LA0009). Des moutons en bonne santé qui répondaient aux normes de quarantaine requises au Centre d’expérimentation animale de l’hôpital de Fuwai ont été utilisés dans l’étude. De plus, cette recherche a suivi les lignes directrices de la recherche animale : rapport des expériences in vivo . Les moutons mâles Small Tail Han d’un poids de 50 à 65 kg et d’un âge de 12 à 24 mois (voir la table des matières) ont été logés dans un environnement spécifique exempt d’agents pathogènes avec un accès libre à la nourriture et à l’eau pendant au moins une semaine avant l’opération. Les moutons ont été répartis au hasard en deux groupes, composés chacun de 5 individus : le groupe ECMO VEINO-ARTÉRIEL (V-A ECMO) et le groupe ECMO VEINEUX (V-V ECMO). La sélection de moutons sains a été justifiée par la nécessité d’évaluer précisément les effets du soutien de l’ECMO sur l’organisme. L’équipement et les réactifs utilisés dans l’étude sont énumérés dans la table des matériaux.

1. Préparation des animaux

1. Avant l’intervention chirurgicale, jeûnez les moutons adultes en bonne santé pendant 48 h et privez-les d’eau pendant 12 h.
2. Stérilisez les instruments chirurgicaux et les paramètres ECMO avant la chirurgie. Veiller à ce que tous les membres de l’équipe chirurgicale fournissent de l’équipement de protection individuelle, y compris des bonnets chirurgicaux, des masques jetables, des vêtements chirurgicaux propres, des couvre-chaussures, des vêtements d’opération stériles et des gants stériles.
3. Administrer une injection de propofol (5 mg/kg) par la veine auriculaire. Comme décrit précédemment, fixez le brassard de tensiomètre sur la cuisse et placez des sondes d’électrocardiogramme sur les quatre membres. Connectez le brassard de tensiomètre et les fils ECG au moniteur médical pour l’ECG et la mesure non invasive de la pression artérielle¹².
4. Insérez une sonde endotrachéale à lumière unique dans la trachée et connectez la sonde au ventilateur en mode de contrôle du volume. Réglez les paramètres comme suit : volume courant : 8-10 mL/kg, fréquence respiratoire : 12-20/min, fraction initiale d’oxygène d’inspiration (FiO2) : 60 %.
5. Administrer une combinaison d’anesthésie intraveineuse (propofol, 8-10 mg/kg/h) et d’anesthésie inhalée (isoflurane 2 %-3 %) pour le maintien de l’anesthésie. Fournir du flurbiprofène intermittent (1-2 mg/kg) par voie intraveineuse pour l’analgésie peropératoire.
6. Placez les moutons sur la table d’opération et fixez leurs membres avec une ceinture en tissu souple. Procédez à l’isolement de l’artère carotide gauche et de la veine jugulaire et insérez un cathéter veineux central à lumière unique (18 Fr) et un cathéter veineux central à triple lumière (7 Fr), respectivement. Connectez le cathéter 18 G de l’artère carotide gauche au moniteur médical pour la surveillance hémodynamique. Connectez le cathéter veineux central à triple lumière 7 Fr sur la veine jugulaire gauche à la pompe à perfusion et au moniteur médical pour l’administration simultanée de fluides intraveineux, l’injection de médicament et la surveillance de la pression veineuse centrale. Effectuez toutes les connexions à l’aide des robinets d’arrêt à trois voies. Prélever des échantillons de sang veineux ou artériel à l’aide d’un robinet d’arrêt à trois voies.
   REMARQUE : Après l’insertion du cathéter, ligaturez le cathéter et le vaisseau avec des sutures chirurgicales 2-0.
7. Exposez l’artère jugulaire et la veine droites. Obtenir une anticoagulation systémique avec un bolus d’héparine (120 UI/kg) par la veine jugulaire droite.
   REMARQUE : Le temps de coagulation activé (ACT) cible pour la canulation est supérieur à 250 s.

2. Canulation

1. Etablissement du circuit V-A ECMO : Insérez un cathéter artériel (18 Fr) à travers l’artère carotide droite jusqu’à une profondeur de 10-15 cm et un cathéter veineux (24 Fr) à travers la veine jugulaire externe droite jusqu’à l’oreillette droite.
2. Mise en place du circuit V-V ECMO : Exposez la veine jugulaire externe droite et insérez un cathéter à double lumière (23 Fr) à travers la veine jugulaire externe droite.
   REMARQUE : Au cours de cette procédure, maintenez la pression artérielle et la fréquence cardiaque des moutons à ±20 % des valeurs de base. Maintenez la pression partielle de dioxyde de carbone artériel (PaCO2) entre 35 et 40 mmHg. Assurez-vous que la pression partielle de dioxyde de carbone en fin d’eau (EtCO2) reste entre 35 et 45 mmHg. Ajustez la profondeur de l’anesthésie en cas de variations de la pression artérielle et de la fréquence cardiaque chez les moutons. Si cela s’avère inefficace ou en cas d’urgence, envisagez d’utiliser des médicaments vasoactifs. Maintenez le PaCO2 et l’EtCO2 dans les valeurs normales en ajustant les paramètres du ventilateur, en mettant l’accent sur le volume courant et la fréquence respiratoire.
3. Dans l’ECMO V-V, passez l’extrémité du cathéter dans l’oreillette droite (AR) et positionnez-la dans la veine cave inférieure (IVC). Dirigez l’orifice de sortie du cathéter à double lumière vers la valve tricuspide (confirmez la position avec l’aide d’ultrasons).
   REMARQUE : Après l’insertion du cathéter, ligaturez le cathéter et le vaisseau avec des sutures chirurgicales 2-0. Fermez l’incision cutanée à l’aide de sutures chirurgicales 4-0.

3. Début de l’ECMO

1. Connectez tous les appareils ECMO en suivant les instructions du fabricant (voir le tableau des matériaux). Assurez-vous qu’il n’y a pas de fuites.
   REMARQUE : Suivez les principes d’asepsie lors de la connexion.
2. La solution d’amorçage se compose d’une solution saline normale (1000 ml) avec 2000 UI d’héparine. Après avoir infusé manuellement la solution d’amorçage dans le circuit ECMO et vous être assuré qu’il n’y a pas de bulles d’air dans le circuit, démarrez la pompe centrifuge pour l’amorçage (1000-1500 tr/min).
3. Une fois l’amorçage terminé, éteignez la pompe centrifuge. Connectez le cathéter d’entrée à l’entrée de la pompe centrifuge et connectez le cathéter de sortie à la sortie de l’oxygénateur. Effectuez toutes les connexions à l’aide des robinets d’arrêt à trois voies. Évacuez l’air au niveau de la connexion par le robinet d’arrêt à trois voies. Fixez la source d’oxygène au système ECMO, en assurant un débit d’oxygène correct. Démarrez ensuite la pompe centrifuge pour le fonctionnement ECMO. Réglez le débit initial de la pompe à 2,0 L/min avec une vitesse de pompe de 3000 tr/min.
4. Bouclez en demi-boucle la ligne du tube de circuit ECMO autour du cou du mouton pour éviter le déplacement ou le pliage.

4. Prise en charge et surveillance postopératoires

1. Transférez les moutons dans une cage métabolique et immobilisez les moutons de manière appropriée une fois l’opération terminée.
   REMARQUE : Fixez la tête et les épaules du mouton en mettant l’accent sur la prévention du déplacement ou de la flexion de la canule. Réduire progressivement la profondeur de l’anesthésie. Assurer la protection individuelle des membres de l’équipe soignante postopératoire en portant des équipements de protection (vêtements stériles, gants, masques et bonnets).
2. Lorsque vous assurez la stabilité de la respiration et des résultats d’analyse des gaz sanguins, retirez la sonde endotrachéale.
3. Dans les 24 heures suivant la chirurgie, administrer du flurbiprofène (1-2 mg/kg) et de la dexmédétomidine (0,2-0,3 μg/kg·h) par voie intraveineuse pour la sédation et le soulagement de la douleur.
   REMARQUE : Après les premières 24 heures, envisagez des sédatifs et des analgésiques s’il y a de l’agitation et une fluctuation de la pression artérielle chez les moutons en raison de la douleur postopératoire.
4. À l’intérieur de la cage de surveillance, assurez-vous que les moutons se déplacent librement dans une certaine zone et qu’ils ont un accès illimité à une quantité appropriée de nourriture et d’eau.
5. Vérifiez en permanence et en temps réel les signes vitaux fondamentaux (fréquence cardiaque et pression artérielle) ainsi que les paramètres hydrauliques ECMO (débit de la pompe, vitesse de la pompe, pression avant la pompe, pression après la pompe et pression après l’oxygénateur).
   REMARQUE : Définissez les paramètres cibles pour la gestion ECMO (débit de la pompe : 2,0-2,5 L/min, vitesse de la pompe : 3000-3500 tr/min, débit d’oxygène : 1,0-1,5 L/min avec une FiO2 de 50 % à 80 %). Ajustez les paramètres ci-dessus en fonction des résultats des gaz du sang.
6. Mesurez les gaz sanguins et l’ACT toutes les 6 heures et surveillez quotidiennement la numération globulaire, la chimie du sang et les tests de coagulation. Ajuster la stratégie d’anticoagulation en fonction des indicateurs de coagulation.
   REMARQUE : L’objectif ACT cible est de 220 à 250 s.
7. Ajustez les perfusions intraveineuses en fonction de l’équilibre hydrique pour maintenir la pression veineuse centrale (PVC) entre 5 et 12 cm H₂O. Administrer quotidiennement du céfuroxime sodique (1,5 g, i.v., deux fois par jour) pour prévenir les infections. Effectuez une désinfection quotidienne des incisions et surveillez de près les signes d’infection ou de saignement.

5. Euthanasie

1. Après une période expérimentale de 7 jours, retirez le circuit ECMO.
2. Administrer une injection intraveineuse de chlorure de potassium (100 mg/kg) pour l’euthanasie sous sédation au propofol (20 mg/kg).
   REMARQUE : Après l’euthanasie, les principaux organes (cœur, reins, poumons, foie, cerveau et intestin) ont été prélevés et vérifiés visuellement pour détecter la présence d’infarctus, d’hémorragies ou de dommages manifestes. Toutes les lésions organiques ont été enregistrées en détail. Ensuite, les organes ont été coupés en petits morceaux et fixés dans du formaldéhyde à 4 %, nausés de paraffine et divisés en sections de 4 μm pour la coloration à l’hématoxyline-éosine (HE)¹³. Effectuer un examen histologique des sections d’EH au microscope optique par au moins deux pathologistes indépendants.

Résultats

Au total, dix moutons ont été évalués pendant toute la durée de l’expérience, avec cinq moutons dans chaque groupe (tableau 1). Après le début de l’ECMO, tous les moutons se sont rétablis de l’anesthésie et sont restés éveillés pendant 7 jours. Dans les deux groupes, le débit ECMO a dépassé 1,8 L/min. Dans le groupe V-V ECMO, le débit a fluctué autour de 1,8 L/min, tandis que dans le groupe V-A ECMO, il a varié de 2,3 L/min à 1,8 L/min (figure 1A). Les signes vitaux de chaque mouton sont restés stables. Le taux d’acide lactique dans le sang était inférieur à 1 mmol/L entre 60 h et 180 h après le réveil dans les deux groupes (figure 1B). Tout au long des 7 jours, le taux d’ACT a été fixé à se maintenir autour de 220-250 s, et l’ACT réel a fluctué autour de 250 s (Figure 1C), la dose d’héparine augmentant progressivement, atteignant près de 60 UI/kg/min à la fin des expériences (Figure 1D).

Le temps de prothrombine (TP) pour les deux groupes variait de 15 s à 32 s (Figure 2A). Le temps de thromboplastine partielle activée (APTT) et le temps de thrombine (TT) dans le groupe V-V ECMO étaient inférieurs à ceux du groupe V-A ECMO (différence statistiquement significative pour l’APTT) à certains moments de l’expérience (figures 2B et C). Le rapport international normalisé dans chaque groupe a fluctué autour de 1,5 (figure 2D). Le fibrinogène, les produits de dégradation de la fibrine, les D-dimères et les plaquettes ont fluctué de manière similaire entre les deux groupes et sont restés dans la plage normale (figure 3).

Les taux sanguins de créatinine et d’azote uréique dans le sang dans les deux groupes sont restés dans les limites normales tout au long de l’expérience, sans différence statistique entre les deux groupes (Figure 4). De plus, il a été observé que le bilan hydrique dans les deux groupes présentait des fluctuations minimes autour de 0, et que les mesures de PVC des deux groupes sont restées dans la plage normale tout au long de l’étude (figure 5). À la fin de l’expérience, les moutons des deux groupes présentaient des foyers d’infarctus dans les reins, même si les résultats de laboratoire fluctuaient dans des fourchettes normales et raisonnables (figure 6 et tableau 1).

Figure 1 : Surveillance des paramètres de base. (A) Flux ECMO. (B) Lac. (C) AGIR. (D) Dose d’héparine. Lac, Acide lactique ; ACT, temps de coagulation activé ; V-V ECMO, oxygénation par membrane extracorporelle veino-veineuse ; V-A ECMO, oxygénation par membrane extracorporelle veino-artérielle. Valeurs : moyenne ± SEM. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 2 : Résultats de la fonction de coagulation. (A) PT. (B) APTT. (C) TT. (D) INR. PT, temps de prothrombine ; APTT, temps de thromboplastine partielle activée ; TT, temps de thrombine ; INR, rapport international normalisé ; V-V ECMO, oxygénation par membrane extracorporelle veino-veineuse ; V-A ECMO, oxygénation par membrane extracorporelle veino-artérielle. Un test t non apparié a été effectué pour comparer les deux groupes à chaque point temporel. Valeurs : moyenne ± SEM ; *P < 0,05 ; P > 0,05 n’a pas été affiché. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 3 : Fibrinogène, produits de dégradation de la fibrine, D-dimères et numération plaquettaire dans les deux groupes. b) PLR. (C) D-Dimères. d) PLT. FIB, fibrinogène ; FDP, produits de dégradation de la fibrine ; PLT, numération plaquettaire ; V-V ECMO, oxygénation par membrane extracorporelle veino-veineuse ; V-A ECMO, oxygénation par membrane extracorporelle veino-artérielle. Un test t non apparié a été effectué pour comparer les deux groupes à chaque point temporel. Valeurs : moyenne ± SEM ; P > 0.05 n’était pas affiché. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 4 : Surveillance de la fonction rénale. (A) Créatinine. (B) CHIGNON. V-V ECMO, oxygénation par membrane extracorporelle veino-veineuse ; V-A ECMO, oxygénation par membrane extracorporelle veino-artérielle ; BUN, azote uréique du sang. Un test t non apparié a été effectué pour comparer les deux groupes à chaque point temporel. Valeurs : moyenne ± SEM ; P > 0,05 n’a pas été affiché. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 5 : Changements dynamiques du bilan hydrique et des valeurs CVP. (A) Changements quotidiens du bilan hydrique du groupe V-V ECMO. (B) Modifications quotidiennes de l’équilibre hydrique du groupe V-A ECMO. (C) Suivi CVP. Un test t non apparié a été effectué pour comparer le CVP des deux groupes à chaque point temporel. Valeurs : moyenne ± SEM ; P > 0,05 n’a pas été affiché. CVP, pression veineuse centrale ; V-V ECMO, oxygénation par membrane extracorporelle veino-veineuse ; V-A ECMO, oxygénation par membrane extracorporelle veino-artérielle ; PSD, jour post-opératoire. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 6 : Anatomie rénale et coloration à l’hématoxyline-éosine dans les deux groupes. Barres d’échelle : 400 μm ; Empiècements : 100 μm. V-V ECMO, oxygénation par membrane extracorporelle veino-veineuse ; V-A ECMO, oxygénation par membrane extracorporelle veino-artérielle. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Nombre de moutons	Sexe	Poids (kg)	Résultats pathologiques rénaux*
VA1	Mâle	58	Aucun
VA2	Mâle	54	Aucun
VA3	Mâle	55	Petit infarctus focal
VA4	Mâle	56	Petit infarctus focal
VA5	Mâle	57	Petit infarctus focal
VV1	Mâle	56	Aucun
VV2	Mâle	60	Aucun
VV3	Mâle	63	Aucun
VV4	Mâle	59	Aucun
VV5	Mâle	60	Petit infarctus focal
*Le diagnostic pathologique rénal a été effectué par deux pathologistes indépendants afin d’obtenir une évaluation objective.

Tableau 1 : Résultats pathologiques rénaux pour les deux groupes.

Discussion

Cette étude décrit la procédure d’établissement de modèles de survie robustes à long terme pour l’ECMO V-V et V-A chez les moutons. Tous les animaux survivants présentaient des signes vitaux stables, et aucun événement grave d’hémorragie ou de coagulation ne s’est produit. Le débit ECMO et les performances d’oxygénation sont restés stables, sans lésions pathologiques majeures observées. L’étude fournit des informations détaillées sur la prise en charge de l’anticoagulation.

La gestion de l’anticoagulation joue un rôle crucial dans les soins périopératoires de l’ECMO. Initialement, sur la base d’études antérieures, l’ACT cible a été fixé à 180-220 s^{14, 15, 16, 17}. Cependant, au cours de la phase pré-expérimentale, un dépôt de fibrine et une thrombose dans l’oxygénateur (voir le tableau des matériaux) ont été observés, indiquant que des niveaux d’anticoagulation plus élevés étaient nécessaires pour les moutons. Malgré l’absence de signes de saignement significatifs et une numération plaquettaire relativement stable, l’ACT cible a été ajustée à 220-250 s. Cet ajustement des cibles d’anticoagulation met en évidence les différences hématologiques entre les ovins et les humains. Suite à cet ajustement, le dépôt de fibrine et la formation de thrombus dans l’oxygénateur ont été réduits, ce qui a conduit à des performances stables de l’oxygénateur.

Tout au long de l’expérience, une tendance a été observée dans la numération plaquettaire des moutons, caractérisée par une diminution initiale suivie d’une augmentation. Remarquablement, sans recevoir de transfusions de sang total ou de plaquettes, le nombre de plaquettes s’est rétabli et a dépassé le niveau de base au 7^e jour. La baisse initiale de la numération plaquettaire chez les moutons sains soumis à une perfusion continue d’héparine peut être attribuée à une thrombocytopénie induite par l’héparine¹⁸. L’augmentation ultérieure peut être élucidée par des mécanismes compensatoires au sein des systèmes de coagulation et hématopoïétique des moutons.

De plus, les valeurs APTT et TT étaient nettement plus élevées dans l’ECMO V-A par rapport à l’ECMO V-V lors de l’administration des mêmes doses d’héparine à des moutons en bonne santé. Cette observation suggère que l’ECMO V-A est plus sensible aux paramètres de coagulation après une anticoagulation à l’héparine. Dans une étude de cohorte précédente, il a été noté que les patients recevant le soutien de l’ECMO V-A nécessitaient des doses d’héparine plus faibles que ceux recevant le soutien de l’ECMO V-V pour atteindre des niveaux d’APTT similaires. De plus, les patients atteints d’ECMO V-A présentaient une consommation élevée de facteurs de coagulation¹⁹. Collectivement, ces résultats indiquent la nécessité de tenir compte de la prise en compte distincte de la coagulation entre ces deux modalités d’ECMO.

Bien que presque tous les résultats des tests de laboratoire aient fluctué dans des fourchettes normales et raisonnables, des foyers d’infarctus ont été identifiés dans les reins des deux groupes à la fin de l’expérience. Cela souligne que la perfusion et la coagulation des organes vitaux restent les points centraux de la prise en charge de l’ECMO, soulignant que les tests de laboratoire seuls ne peuvent pas être fiables pour évaluer l’état des organes.

Au cours de la prise en charge de ce modèle, la dose d’héparine a augmenté progressivement, indiquant une anticoagulation dynamique pour la prise en charge à long terme de l’ECMO. Cependant, la stratégie d’anticoagulation ECMO employée pour les moutons normaux peut ne pas être directement applicable aux scénarios cliniques des patients gravement malades. La complexité d’une maladie grave et de sa réponse inflammatoire peuvent perturber davantage l’hémostase du patient, en particulier dans les cas d’hypercoagulabilité acquise et d’hyperinflammation, comme observé chez les patients atteints de COVID-19 ^7,20. La stratégie d’anticoagulation de l’ECMO dans diverses situations cliniques reste une considération clinique cruciale. De futurs essais cliniques détaillés sont nécessaires pour étudier les stratégies d’anticoagulation ECMO chez les patients présentant des statuts de coagulation préopératoires variables et ceux subissant différentes situations cliniques (modèles V-V et V-A).

Plusieurs limites ont persisté dans cette étude. Tout d’abord, un groupe fictif n’a pas été inclus. Deuxièmement, pour minimiser la consommation de sang, le suivi dynamique des marqueurs d’inflammation n’a pas été effectué. De plus, cette étude n’a pas établi de modèle animal de maladie lié à l’ECMO, et la prise en charge postopératoire de l’ECMO décrite dans cet article peut différer de la pratique clinique.

En conclusion, le modèle ECMO de mouton éveillé à long terme avec des valeurs ACT cibles comprises entre 220 et 250 s pour la gestion de l’anticoagulation s’est avéré réalisable et stable. Outre la surveillance étroite de la fonction de coagulation, la fonction de perfusion des organes vitaux reste un point central dans la prise en charge de l’ECMO. D’autres expériences à l’avenir sont nécessaires pour approfondir les stratégies de gestion de l’anticoagulation appropriées dans des modèles ECMO animaux.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Analyseur ACT	Hemochron, USA	Jr Appareil
	Drager, Allemagne  ;	Primus
	Edwards Lifescience, USA	18-Fr	Fournir un accès aller-retour dans une artère pour VA-EMCO
Analyseur de chimie sanguine	IDEXX Laboratories, USA  ;	Analyseur
	Abbott, États-Unis	Pompe centrifuge Abbott i-STAT1
Jiangsu	STMed Technologies, Chine	STM CP-24 I
Entraînement et console de pompe centrifuge	Jiangsu STMed Technologies, Chine	OASSIST STM001
Analyseur de test de coagulation	Beijing Succeeder Technology, Chine	SF-8050
Analyseur complet de numération globulaire	Siemens Healthcare, Allemagne	ADVIA 2120i
Pompe de micro-injection à double canal	Zhejiang Smith Medical Instrument, Chine	WZS-50F6
Cathéter à double lumière	MAQUET Avalon Elite, Allemagne	23-Fr	Fournir des accès de retour et de drainage dans la veine jugulaire externe droite pour VV-ECMO
Flurbiprofen	Beijing Tide Pharmaceutical Co., Ltd., Chine	5ml : 50mg
Logiciel GraphPad	Logiciel GraphPad, États-Unis	GraphPad Prism v9.0	Analyse statistique
Héparine  ;	Shanghai Shangyao No.1 Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd., Chine	2ml : 12500UI
Électrochirurgical haute fréquence	COVIDIEN, USA	Force F
Moniteur médical multiparamètre	Philips, Pays-Bas	MP60
Kit d’oxygénation	Medos, Allemagne	Hilite 7000LT
Kit d’oxygénation	Maquet, Allemagne	BE-PLS 2050
Propofol  ;   ;	Xi' an Libang Pharmaceutical Co. Ltd, Chine	20ml : 0,2g
Cathéter veineux central à lumière unique	TuoRen, Chine	18Fr	Insert dans l’artère carotide gauche  ; pour la surveillance hémodynamique et le prélèvement sanguin.
Petite queue Han mouton	Jinyutongfeng Commercial and Trade Co. Ltd, Chine	Poids : 50-65 kg, âge : 12-24 mois
Cathéter veineux central à triple lumière	TuoRen, Chine	7Fr	Insert dans la veine jugulaire gauche pour l’administration de liquide intraveineux, l’injection de médicament et le prélèvement sanguin.
Appareil à ultrasons	GE, USA	E9
Cathéter veineux	Edwards Lifescience, USA	24-Fr	Fournir l’accès au drainage dans une veine pour VA-ECMO
Ventilator	Drager, Allemagne  ;	Savina