Modèle de greffe de foie entier auxiliaire hétérotopique utilisant une hépaticourétérostomie pour des études de rejet d’allogreffe

Bret Verhoven; Weifeng Zeng; Peter Chlebeck; Kristina Matkowskyj; Heather Jennings; Samuel Poore; David Al-Adra

doi:10.3791/66516

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Article de méthode

Modèle de greffe de foie entier auxiliaire hétérotopique utilisant une hépaticourétérostomie pour des études de rejet d’allogreffe

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DOI :

10.3791/66516

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8 mars 2024

Bret Verhoven¹ , Weifeng Zeng² , Peter Chlebeck¹ , Kristina Matkowskyj³^,⁴^,⁵ , Heather Jennings¹ , Samuel Poore² , David Al-Adra¹

¹Department of Surgery, School of Medicine and Public Health, University of Wisconsin-Madison, ²Department of Surgery, Division of Plastic and Reconstructive Surgery, University of Wisconsin, ³Department of Pathology and Laboratory Medicine, School of Medicine and Public Health, University of Wisconsin-Madison, ⁴UW Carbone Cancer Center, ⁵William S. Middleton Memorial Veterans' Hospital

Dans cet article

Résumé

Le protocole de greffe hépatique auxiliaire hétérotopique de rat décrit ici offre un outil d’investigation pratique pour explorer les mécanismes de rejet de l’allogreffe hépatique. Ce modèle permet d’atténuer les obstacles chirurgicaux et le stress animal de la transplantation hépatique orthotopique chez le rat.

Résumé

Les modèles de transplantation de petits animaux sont indispensables pour les études de tolérance d’organe qui étudient les interventions thérapeutiques réalisables dans les études précliniques. Les protocoles de transplantation hépatique de rat (LTx) utilisent généralement un modèle orthotopique où le foie natif du receveur est retiré et remplacé par un foie de donneur. Cette procédure chirurgicale techniquement exigeante nécessite des compétences microchirurgicales avancées et est encore compliquée par de longs temps d’anhépatie et d’ischémie du bas du corps. Cela a conduit au développement d’une méthode hétérotopique moins compliquée qui peut être réalisée plus rapidement sans temps d’anhépatie ou d’ischémie du bas du corps, réduisant ainsi le stress post-opératoire pour l’animal receveur.

Ce protocole LTx hétérotopique comprend deux étapes principales : l’excision du foie du rat donneur et la transplantation de l’ensemble du foie dans le rat receveur. Lors de l’exérèse du foie du donneur, le chirurgien ligature la veine cave supra-hépatique (CVH) et l’artère hépatique (HA). Du côté du receveur, le chirurgien enlève le rein gauche et positionne le foie du donneur avec la veine porte (PV), la veine cave infra-hépatique (CIVH) et le canal biliaire face aux vaisseaux rénaux. De plus, le chirurgien anastomose la veine rénale du receveur d’une extrémité à l’autre avec l’IHVC du foie et artérialise le PV avec l’artère rénale à l’aide d’un stent. L’hépaticourétérostomie est utilisée pour le drainage biliaire en anastomosant le canal biliaire jusqu’à l’uretère du receveur, ce qui permet l’évacuation de la bile par la vessie.

La durée moyenne de la transplantation était de 130 min, la durée de l’ischémie froide était d’environ 35 minutes et la durée de l’ischémie chaude était inférieure à 25 min. L’histologie de l’hématoxyline et de l’éosine du foie auxiliaire des greffes syngéniques a montré une structure hépatocytaire normale sans altérations parenchymateuses significatives 30 jours après la greffe. En revanche, les échantillons de greffe allogénique de 8 jours après la greffe ont montré une infiltration lymphoïde étendue avec un score de 9 de l’indice d’activité de rejet du schéma de Banff. Par conséquent, cette méthode LTx facilite une alternative au modèle de rejet de faible morbidité au LTx orthotopique.

Introduction

Le LTx chez les petits animaux est un modèle inestimable pour étudier les mécanismes de rejet hépatique. La transplantation hépatique auxiliaire hétérotopique avec artérialisation de la veine porte (HALT-PVA) chez le rat a été introduite en 1968 par Lee et Edgington¹lorsqu’ils ont rapporté avoir utilisé la veine rénale et l’artère d’un receveur pour revasculariser un foie auxiliaire greffé. Par la suite, Hess et ^al.2 ont amélioré le protocole en atténuant la compétition fonctionnelle entre les foies natif et auxiliaire en réduisant la taille du foie natif et du foie donneur ainsi qu’en r....