Article de méthode

Placement périorbitaire d’une sonde laser Doppler pour la surveillance du débit sanguin cérébral avant l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne chez des modèles de rongeurs

1.7K vues

⸱

DOI :

10.3791/66839

⸱

22 novembre 2024

 ,  ,  , 
1College of Nursing, University of Arizona, 2Department of Surgery, College of Medicine, University of Arizona

Dans cet article

Avis d’erratum

Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice

Résumé

Une intervention chirurgicale mini-invasive est présentée ici, qui consiste à placer la sonde laser Doppler sur le crâne au-dessus de la région distale de l’artère cérébrale moyenne (ACM), une position périorbitaire adaptée aux rats et aux souris, afin d’évaluer le flux sanguin lors de l’occlusion transitoire de l’ACM.

Résumé

L’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCAO) est la méthode de référence pour la modélisation préclinique de l’AVC ischémique chez les rongeurs. Cependant, le succès de l’occlusion n’est pas garanti, même par les mains chirurgicales les plus habiles. Les erreurs se produisent principalement lorsque le filament n’est pas placé à la bonne profondeur et comprennent des cas d’absence d’infarctus ou de perforation du vaisseau, ce qui peut entraîner la mort. La flowmétrie laser Doppler (LDF) est une technique fiable qui fournit une rétroaction en temps réel sur le débit sanguin cérébral régional (CBF) pendant la procédure MCAO. Ici, nous démontrons une technique rapide de placement périorbitaire d’une sonde laser Doppler pour la mesure du CBF chez la souris et le rat. Notre raison d’être était de simplifier la mise en œuvre de la LDF, en encourageant une utilisation généralisée pour une meilleure fiabilité chirurgicale. La technique élimine le besoin d’amincissement du crâne et d’équipement spécialisé, avec un placement dans la région périorbitaire plutôt que dorsale, favorisant l’efficacité et la facilité d’adoption. Le protocole décrit ici englobe les préparations préchirurgicales, la mise en place de la sonde Doppler périorbitaire et les soins postopératoires. Les résultats représentatifs comprennent des représentations visuelles des éléments procéduraux ainsi que des tracés LDF représentatifs illustrant des chirurgies MCAO réussies, avec des cas de placement infructueux du filament entraînant des complications. Le protocole illustre la LDF dans la confirmation du placement correct du filament et offre une procédure simplifiée par rapport aux méthodes alternatives.

Introduction

La méthode d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCAO) a été largement utilisée chez les rongeurs depuis son introduction dans la communauté scientifique pour être appliquée aux rats en 19861 avec l’adaptation Longa décrite en 19902, et les adaptations pour les souris peu après3. Bien qu’elle ne soit pas décrite dans la publication de Longa, l’utilisation du signal de flowmétrie laser Doppler (LDF) pour confirmer le placement du filament a rapidement été décrite dans la littérature4. L’emploi de la LDF pendant la procédure MCAO est largement présenté dans la littérature, mais est désigné comme une étape facultative dans les procédures opératoires standard (SOP) actuelles des réseaux d’évaluation préclinique de l’AVC (SPAN)5.

L’utilisation du LDF confirme le placement correct du filament pendant la procédure MCAO et, par conséquent, contribue à la rigueur de la conception de l’étude et aux résultats ultérieurs, en particulier dans les expériences conçues pour explorer l’efficacité des médicaments. L’utilisation du LDF réduit les erreurs chirurgicales résultant d’un placement incorrect du filament, ce qui entraîne une situation dichotomique : soit aucune blessure lorsque le filament n’est pas placé assez loin, soit la mort d’animaux due à la perforation des vaisseaux se produisant lorsque le filament est inséré trop loin. D’autre part, l’utilisation de LDF n’est pas associée à la variabilité de la taille de l’infarctus couramment observée après la procédure MCAO6. L’utilisation de la LDF dans la procédure MCAO peut être perçue comme difficile et onéreuse, en particulier chez les rats, car le crâne est plus épais que chez la souris et peut nécessiter un amincissement du crâne avant la mise en place de la LDF 7,8. De plus, le placement de la sonde dorsale est souvent décrit avec certains protocoles nécessitant un équipement ou une préparation spécialisés 7,8,9. Avec l’un ou l’autre de ces obstacles, la mise en œuvre du LDF pour confirmer le placement du filament peut ne pas avoir lieu.

Dans ce protocole, nous décrivons le placement de la sonde laser Doppler au niveau du crâne et sur la région distale de l’artère cérébrale moyenne - un placement périorbitaire - pour l’évaluation du flux sanguin pendant la procédure MCAO chez les souris et les rats. Notre raison d’être était de mettre au point une procédure qui présente de multiples avantages par rapport à certaines méthodes rapportées dans la littérature 7,8,9,10 en ce sens qu’elle est peu invasive, rapide et ne nécessite pas d’amincissement du crâne ou d’équipement spécialisé au-delà de la sonde laser Doppler.

Protocole

Des souris et des rats adultes ont été utilisés pour illustrer ce protocole (25 g, C57BL/6J, Jackson Laboratories ; 250 g, Sprague Dawley, Envigo). La manipulation des animaux et les procédures expérimentales ont été effectuées avec l’approbation et conformément au comité institutionnel de protection et d’utilisation des animaux de l’Université de l’Arizona, aux lois nationales et aux principes de soins aux animaux de laboratoire11. Les rats et les souris ont été logés selon un horaire de 12 heures de lumière et d’obscurité (de 7 h à 19 h) avec de la nourriture et de l’eau disponibles à volonté.

1. Préparation préopératoire

REMARQUE : En règle générale, la chirurgie MCAO chez un rongeur est pratiquée comme une chirurgie de survie, nécessitant l’utilisation d’une technique chirurgicale aseptique ou à pointes seulement, comme décrit dans un protocole IACUC spécifique à l’établissement. Dans ce cas, le chirurgien utilise une technique de pointes uniquement avec des instruments et des fournitures stérilisés.

  1. Désinfectez la surface de travail chirurgicale avec un désinfectant commercial et préparez des packs chirurgicaux stériles d’instruments, de champs de draps, de gaze, d’écouvillons, de sutures et de lames de scalpel par autoclavage. Maintenir des conditions stériles pendant la chirurgie de survie selon les techniques approuvées par l’IACUC, telles que la couverture des boutons de microscope et le drapage à l’aide d’une pellicule plastique de qualité alimentaire.
  2. Utilisez un stérilisateur à billes sèches pour restériliser les instruments chirurgicaux entre les procédures si plusieurs chirurgies de rongeurs sont effectuées au cours d’une même séance.
  3. Placez le rat ou la souris dans une chambre d’induction et induisez l’anesthésie avec 3 % à 5 % d’isoflurane (1 L/min en utilisant un mélange combiné de 80 % d’air et 20 % d’oxygène).
  4. Déplacer l’animal de la chambre à la paillasse et au cône nasal pour l’anesthésie (souris : 0,5 L/min 80 %/20 % mélange oxygène/air ; rat : 1,5 L/min 80 %/20 % mélange oxygène/air). Appliquez une pommade ophtalmique sur les deux yeux et rasez soigneusement l’espace entre l’oreille et l’orbite du côté de la chirurgie MCAO (généralement la droite), afin de ne pas couper la peau à l’aide d’une tondeuse. Chez le rat, lorsqu’il est rasé, la fossette de la moustache sera visible à peu près à mi-chemin entre l’orbite et l’oreille. Continuer à raser les régions au besoin pour la procédure MCAO9 (qui n’entre pas dans le cadre du présent document).
  5. Remettez l’animal dans la chambre au besoin ou déplacez-le vers un cône de nez sur la table d’opération préparée et chauffé à 37 °C. Insérez un thermomètre rectal. L’animal doit être maintenu à une température d’environ 36 °C ± 1 °C tout au long de la procédure et conformément au protocole approuvé de l’IACUC.
  6. Appliquez de la bétadine sur un coton-tige et désinfectez la peau, en spirale vers l’extérieur à partir du centre de la région chirurgicale. Essuyez avec un tampon de préparation à l’alcool. Répétez les deux étapes pour un total de trois cycles. Confirmez la bonne anesthésie et évaluez toutes les 15 minutes pendant la procédure à l’aide du reflux par pincement des orteils.

2. Placement de la sonde Doppler périorbitaire

  1. À l’aide de petits ciseaux, faites une coupe verticale (souris : ~0,5 cm ; rat : ~0,7 cm) entre le coin de l’œil et le pli de l’oreille, comme illustré sur la figure 2A (souris) et la figure 3A (rat) pour exposer le super facia et le muscle sous-jacent.
    REMARQUE : Traiter la douleur préopératoirement selon l’approbation du protocole IACUC.
  2. À l’aide d’une pince tranchante et de ciseaux incurvés, coupez soigneusement la couche musculaire jusqu’à ce que le crâne soit atteint. Le crâne sera plat et difficile à toucher avec la pointe de la pince. C’est la fenêtre dans laquelle la sonde laser Doppler se trouvera, comme le montre la figure 2B.
  3. Utilisez une pince pour cautériser le sang émergent, élargir la fenêtre et assurer le chemin vers le crâne.
  4. Une fois la fenêtre ouverte, épongez avec des cotons-tiges pour éliminer l’excès de sang si nécessaire.
    Placez la souris ou le rat en position couchée.
  5. Utilisez une pince pour rétracter la peau ou les tissus et placez la sonde Doppler dans la fenêtre périorbitaire de manière à ce qu’elle s’appuie perpendiculairement au crâne, sans peau ni muscle présent pour entraver le signal laser. Cette région se trouve au-dessus de la MCA distale, comme illustré sur les figures 1A et B. Fixez l’emplacement de la sonde avec du ruban adhésif de laboratoire. Dans ce protocole, l’utilisation d’une sonde droite est décrite.
    REMARQUE : Nous reconnaissons que les protocoles chirurgicaux varient d’un laboratoire à l’autre. Dans la littérature (lorsqu’elle est rapportée), certains broient le crâne fin, et d’autres non9. C’est peut-être parce que le crâne est plus mince dans la région périorbitaire, mais ce n’est qu’une spéculation. D’après notre expérience, un placement direct sans broyage peut être réalisé chez les souris et les rats et est démontré dans ce protocole.
  6. Surveillez les lectures de débit sanguin relatives sur le moniteur à l’aide d’un logiciel approprié (Figure 2D, Figure 3C,D). Les lectures LDF peuvent varier. Cependant, la plage optimale pour la détection des baisses de débit sanguin est de >200 unités de perfusion (PU).
  7. Passez à la chirurgie MCAO9 (non dans le cadre de cet article). Lors de la chirurgie MCAO, testez le placement de la sonde en liant brièvement l’artère carotide commune, ce qui devrait provoquer une chute soudaine du flux sanguin (~50%).

3. Retrait de la sonde Doppler et soins postopératoires

  1. À la fin de l’opération MCAO ou chaque fois que les lectures du débit sanguin sont terminées, retirez la sonde laser Doppler de la fenêtre chirurgicale. La sonde Doppler reste généralement en place pendant toute la durée de la chirurgie MCAO chez la souris, car les temps d’ischémie sont souvent inférieurs à 90 minutes. D’autre part, dans la procédure MCAO chez le rat, la sonde Doppler peut être retirée après la mise en place du filament et pendant l’ischémie (généralement > 90 min), puis placée à nouveau dans la fenêtre périorbitaire pour confirmer la reperfusion en répétant les étapes 2.6 et 2.7.
    REMARQUE : Un tracé continu typique de la LDF de la souris MCAO peut être observé à la figure 4A. Les tracés LDF typiques d’une procédure MCAO chez le rat sont illustrés à la figure 4B.
  2. Injectez un anesthésique local approuvé par l’IACUC par voie sous-cutanée le long du site d’incision potentiel.
  3. Fermez la peau avec 1 à 2 sutures à l’aide d’un nœud chirurgical standard avec fil de suture résorbable ou de colle chirurgicale, selon le protocole approuvé de l’IACUC. Traiter la douleur post-chirurgicale selon l’approbation du protocole IACUC (par exemple, bupivacaïne HCL 0,5% et lidocaïne 2%, une fois intra-incision pour les souris et les rats). Les animaux ne doivent pas être laissés sans surveillance jusqu’à ce qu’ils soient capables de maintenir une déposition sternale, et aucun animal n’est renvoyé en compagnie d’autres animaux jusqu’à ce qu’ils soient complètement rétablis.

Résultats

Le placement de la sonde laser Doppler au niveau de la région MCA est représenté visuellement à la figure 1, offrant un pictogramme de la vascularisation et servant de guide visuel des perspectives sagittale et dorsale. La figure 2 résume les étapes critiques du placement et des résultats de la sonde laser Doppler chez la souris. La figure 2A présente une image d’une souris anesthésiée et préparée avec un marquage pointillé au site de l’incision verticale nécessaire pour le placement ultérieur de la sonde laser Doppler. La fenêtre périorbitaire du crâne est illustrée à la figure 2B.

La figure 3 résume l’emplacement de la sonde laser Doppler chez le rat. La figure 3A montre une image d’un rat anesthésié et préparé avec un marquage pointillé au site de l’incision verticale nécessaire à la mise en place ultérieure de la sonde laser Doppler. La fenêtre périorbitaire ne peut pas être vue car elle est plus profonde que la souris. Dans ce cas, le crâne peut être palpé, comme mentionné à l’étape 2.3. La sonde laser Doppler placée dans la région périorbitaire chez le rat en décubitus dorsal est illustrée à la figure 3B.

La figure 4A illustre un traçage LDF typique au cours de la procédure MCAO chez la souris. Il illustre une induction réussie de l’ischémie, comme en témoigne une baisse nette et immédiate du débit sanguin cérébral relatif (FBC) lorsque l’artère carotide est ligaturée et à nouveau lorsque le filament est avancé vers l’ostium de l’ACM. L’initiation de la reperfusion est mise en évidence à la fin du tracé, mise en évidence par une augmentation nette et immédiate du CBF relatif lorsque l’artère carotide est déliée et à nouveau lorsque le filament est retiré du MCA. La figure 4B montre une lecture typique de l’ischémie LDF lors de la chirurgie MCAO chez le rat, qui montre une induction réussie de l’ischémie suivie du retrait et du repositionnement de la sonde pour la mesure LDF pendant la reperfusion. Dans la chirurgie du rat, les temps d’ischémie peuvent être supérieurs à 60 minutes, et les animaux peuvent récupérer pendant la période d’ischémie et doivent être ré-anesthésiés pour la reperfusion. Dans ce cas, la sonde est repositionnée dans la fenêtre périorbitaire et les tracés LDF se poursuivent. L’ischémie est mise en évidence dans le traçage par une baisse nette et immédiate du CBF relatif lorsque l’artère carotide est liée et que le filament est avancé vers l’ostium MCA. La reperfusion est mise en évidence dans le deuxième tracé LDF par une augmentation distincte et immédiate du CBF relatif, après quoi l’artère carotide est déliée et, à nouveau, lorsque le filament est retiré de l’ostium du MCA. Le Doppler périorbitaire est positionné sur la branche distale de l’ACM et, par conséquent, dans le cadre de la distribution sanguine de l’ACM, avec une diminution observée du CBF, comme en témoigne la réduction du débit sanguin pendant la procédure MCAO, illustrée à la figure 4.

La figure 5 montre les tracés LDF qui illustrent l’échec des chirurgies MCAO. La figure 5A résume un tracé LDF d’une chirurgie chez le rat avec une occlusion carotidienne réussie qui s’est ensuite relâchée et un placement infructueux du filament, marqué par une lente baisse du CBF relatif. Ce motif LDF est généralement associé à une MCA perforée qui peut être confirmée par nécropsie. Un autre tracé d’une chirurgie MCAO chez la souris (figure 5B) met en lumière une occlusion de l’artère carotide non concluante qui a probablement contribué à l’incapacité de détecter le placement du filament au niveau de l’ostia MCA. Une perforation de l’ACM a été suspectée parce que lorsque le filament était légèrement retiré, le CBF relatif présentait une récupération lente. Ces exemples mettent en évidence le rôle essentiel des tracés LDF dans l’identification des chirurgies MCAO réussies et infructueuses et soulignent l’importance d’interventions chirurgicales méticuleuses et de mesures pour des résultats expérimentaux fiables.

figure-results-1
Figure 1 : Pictogramme du placement approximatif de la sonde laser Doppler par rapport à la MCA. Schéma du placement de la sonde laser Doppler à partir d’une vue sagittale (A) et dorsale (B). Créé avec Biorender.com ; KT26JWLYF6. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

figure-results-2
Figure 2 : Illustration des étapes chirurgicales pour le placement de la sonde laser Doppler chez la souris. (A) Image de l’emplacement de l’incision verticale nécessaire pour le placement de la sonde laser Doppler avec la souris en position couchée. (B) Image de la fenêtre périorbitaire et du crâne préparée à l’aide d’une pince et/ou de ciseaux chez la souris. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

figure-results-3
Figure 3 : Illustration des étapes chirurgicales pour le placement de la sonde laser Doppler chez le rat. (A) Image de l’emplacement de l’incision verticale nécessaire pour le placement de la sonde laser Doppler avec le rat en position couchée. (B) Placement de la sonde laser Doppler dans la région périorbitaire chez le rat couché. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

figure-results-4
Figure 4 : Exemples de tracés LDF confirmant la réussite de la procédure MCAO chez la souris et le rat. (A) Lecture LDF de la région MCA pendant la procédure MCAO chez la souris. Ce tracé illustre la confirmation de 1. occlusion de l’artère carotide avec attache ; 2. Placement du filament au MCA ; 3. Retrait du filament après 60 min d’ischémie continue ; et 4. reperfusion lorsque l’artère carotide est déliée. Les éléments a. et b. illustrent à quoi ressemble le tracé Doppler lorsque la carotide est dénouée et renouée pendant la lecture. Cette technique peut être utilisée pour confirmer le placement de la sonde. (B) Lectures LDF de la région MCA pendant la procédure MCAO chez le rat. Comme la souris, ce tracé illustre la confirmation de 1. occlusion de l’artère carotide avec attache et 2. Placement du filament au MCA. Dans la procédure MCAO chez le rat, la sonde Doppler est souvent retirée et l’animal passe tout le temps d’ischémie éveillé et en mouvement. Pour la reperfusion, la LDF est rétablie avant la reperfusion : 3. confirme l’élimination du filament et 4. Confirme que la carotide est déliée pour une reperfusion complète. Dans les procédures MCAO chez la souris et chez le rat, le placement réussi de la sonde est utilisé pour visualiser le placement correct du filament et est indiqué lorsque le traçage montre deux diminutions distinctes et soudaines de la LDF (pour l’ischémie) suivies de deux augmentations distinctes et soudaines de la LDF (reperfusion). Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

figure-results-5
Figure 5 : Exemples de tracés de flowmétrie laser Doppler qui indiquent l’échec des procédures MCAO chez la souris et le rat. (A) Un exemple de tracé LDF qui indique un placement non concluant du filament chez le rat. Alors que la carotide était attachée (1.), qu’elle se détachait (2), puis qu’elle était à nouveau attachée (3.), il y a une chute indistincte et lente, plutôt qu’une chute soudaine de la LDF lorsque le filament était à la MCA Ostia. Ce tracé peut indiquer une ACM perforée, et l’animal peut ne pas survivre aux 24 premières heures de reperfusion ; La perforation du filament peut être confirmée par nécropsie. (B) Un exemple de tracé LDF qui indique un placement de filament non concluant chez la souris. Dans ce traçage, la preuve d’une liaison carotidienne n’est pas concluante (1.), suivie d’une baisse indistincte de la LDF avec placement du filament au niveau de l’ostia MCA (2.). De plus, lorsque le filament était légèrement retiré, le flux sanguin cérébral relatif augmentait lentement (3.). Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Discussion

Le MCAO est la procédure de référence pour la modélisation de l’occlusion et de la reperfusion de l’artère cérébrale chez les rongeurs et a été la pierre angulaire de la recherche préclinique sur l’AVC, permettant l’induction d’une ischémie focale chez les rongeurs pour imiter la physiopathologie de l’AVC humain. Il s’agit d’une intervention chirurgicale exigeante avec une variabilité inter- et même intra-chirurgicale importante. Bien qu’il n’y ait aucune preuve que l’application du LDF réduise la variabilité, elle peut améliorer la rigueur scientifique et les résultats de l’étude dans certaines conceptions. Ceci est accompli parce que LDF valide le placement du filament et fournit des informations en temps réel sur le CBF pendant la chirurgie, confirmant si l’occlusion du MCA s’est produite. Environ 75 % des études sur les souris décrivent l’utilisation d’une sonde laser Doppler12,13, alors que ce paramètre n’a pas été signalé dans une méta-analyse d’études chez le rat14. Une solution de rechange souvent utilisée à la LDF consiste à mesurer l’insertion du filament (p. ex., 18 à 20 mm de la bifurcation de l’artère carotide commune chez le rat) à l’aide de filaments marqués ou à mesurer le filament restant dépassant du point d’insertion (p. ex., 10 mm)10. Cependant, cette alternative est inférieure à la LDF car la profondeur exacte d’insertion du filament peut varier légèrement en fonction de facteurs tels que la taille et le poids du rat, ainsi que du protocole spécifique utilisé dans l’expérience. Ces différences sont des considérations essentielles pour la reproductibilité de la chirurgie MCAO, compte tenu du risque de perforation du vaisseau ou d’occlusion incomplète, deux résultats chirurgicaux négatifs.

Bien que LDF soit une méthode de validation du placement du filament et qu’elle soit prise en charge par SPAN, il ne s’agit pas d’une étape obligatoire dans la SPAN-SOP5 publiée. Le protocole décrit surmonte des obstacles tels que l’utilisation d’un équipement spécial et le placement difficile de la sonde sur les sections dorsales du crâne lorsque la procédure principale est effectuée sur un animal en position couchée ; Ces facteurs prolongent souvent les temps chirurgicaux. En revanche, ce protocole utilise une sonde laser Doppler et un moniteur uniques et droits, un emplacement de placement périorbitaire et aucun amincissement du crâne. Lorsqu’elles sont combinées, ces étapes aboutissent à une procédure considérablement simplifiée et raccourcie (souvent moins de 5 minutes), une amélioration significative par rapport aux méthodes similaires mais alternatives décrites dans la littérature 7,8,9,10. Ce protocole peut également être adapté par les chirurgiens au besoin. Le dépannage des techniques décrites peut nécessiter et inclure le repositionnement de la sonde, en particulier si une diminution du flux sanguin n’est pas observée à l’étape 2.8.

L’utilisation de la LDF se limite à confirmer le placement du filament et n’a pas été associée à la variabilité de la taille de l’infarctus, qui peut être de >20 % dans les méthodes chez la souris et le rat12,14. La variabilité de l’infarctus est un problème de longue date dans la recherche préclinique sur l’AVC. Alors que cette variabilité accrue peut imiter la diversité des tailles d’infarctus observées dans la condition humaine13, lorsqu’elle n’est pas correctement prise en compte, la variabilité observée peut entraîner des études qui ne sont pas correctement alimentées. Bien qu’il n’y ait pas de facteur unique prédictif de la variabilité de la méthode, la confirmation de l’emplacement est un facteur important pour les études d’efficacité des médicaments. Le protocole décrit ici, bien qu’il soit peut-être déjà utilisé dans les procédures MCAO chez la souris, peut être sous-utilisé chez le rat, étant donné les descriptions plus fréquentes du placement dorsal dans la littérature9. Nous pensons que cette description d’un placement simplifié d’une sonde laser Doppler contribue à affiner les méthodologies de recherche préclinique sur l’AVC, visant une précision expérimentale accrue et une pertinence translationnelle.

Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Cette recherche a été financée par NINDS 1R41NS124450. Biorendu : KT26JWLYF6

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Ciseaux à ressort incurvésCastroviejo1501710
pince #5Outils de science fine11250-20
pince #5/45Outils de science fine1151-35
Forcepts Outil de cautérisationConmedM18019-01
Bande de laboratoireFisherbrand Bande d’étiquetage15-950
Moniteur Doppler laserMoore Instruments  ;MOORVMS-LDF
Logiciel LDFPerisoft pour Windows ou moorSOFTNA
Tondeuse à sourisPhilips NorelcoMG7910
Periflux System 4000, sonde 407L’équipement Perimedn’est plus disponible
en film plastiqueGladpress n seal
Tondeuses à ratsosterA5 ou similaire
Anesthésie des petits rongeursJD Medicalsur commande
petits ciseauxexcelta362 ou similaire
Système de surveillance de la température avec sondePhysitempTCAT-2AC Contrôleur
personnalisée

Références

  1. Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. Experimental studies of ischemic brain edema. I. A new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area. Japanese J Stroke. 20 (1), 84-91 (1986).
  2. Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Stroke. 20 (1), 84(1989).
  3. Hata, R., et al. A reproducible model of middle cerebral artery occlusion in mice: hemodynamic, biochemical, and magnetic resonance imaging. J Cereb Blood Flow Metab. 18 (4), 367-375 (1998).
  4. Dirnagl, U., Kaplan, B., Jacewicz, M., Pulsinelli, W. Continuous measurement of cerebral cortical blood flow by laser-Doppler flowmetry in a rat stroke model. J Cereb Blood Flow Metab. 9 (5), 589-596 (1989).
  5. Lyden, P. D., et al. The stroke preclinical assessment network: Rationale, design, feasibility, and stage 1 results. Stroke. 53 (5), 1802-1812 (2022).
  6. Ingberg, E., Dock, H., Theodorsson, E., Theodorsson, A., Ström, J. O. Effect of laser Doppler flowmetry and occlusion time on outcome variability and mortality in rat middle cerebral artery occlusion: inconclusive results. BMC Neurosci. 19 (1), 24(2018).
  7. Spratt, N. J., et al. Modification of the method of thread manufacture improves stroke induction rate and reduces mortality after thread-occlusion of the middle cerebral artery in young or aged rats. J Neurosci Methods. 155 (2), 285-290 (2006).
  8. Watcharotayangul, J., et al. Post-ischemic vascular adhesion protein-1 inhibition provides neuroprotection in a rat temporary middle cerebral artery occlusion model. J Neurochem. 123 Suppl 2 (Suppl 2), 116-124 (2012).
  9. Beretta, S., et al. Optimized system for cerebral perfusion monitoring in the rat stroke model of intraluminal middle cerebral artery occlusion. J Vis Exp. (72), e50214(2013).
  10. Ritter, L. S., Stempel, K. M., Coull, B. M., McDonagh, P. F. Leukocyte-platelet aggregates in rat peripheral blood after ischemic stroke and reperfusion. Biol Res Nursing. 6 (4), 281(2005).
  11. National Research Council. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals.. , 8th ed., The National Academies Press. Washington, DC, USA. (2011).
  12. Ingberg, E., Dock, H., Theodorsson, E., Theodorsson, A., Ström, J. O. Method parameters' impact on mortality and variability in mouse stroke experiments: a meta-analysis. Sci Rep. 6, (2016).
  13. Morais, A., et al. Embracing heterogeneity in the multicenter stroke preclinical assessment network (SPAN) trial. Stroke. 54 (2), 620-631 (2023).
  14. Ström, J. O., Ingberg, E., Theodorsson, A., Theodorsson, E. Method parameters' impact on mortality and variability in rat stroke experiments: a meta-analysis. BMC Neurosci. 14, 41(2013).

Réimpressions et autorisations

Erratum


Formal Correction: Erratum: Periorbital Placement of a Laser Doppler Probe for Cerebral Blood Flow Monitoring Prior to Middle Cerebral Artery Occlusion in Rodent Models
Posted by JoVE Editors on 3/18/2025. Citeable Link.

This corrects the article 10.3791/66839

Étiquettes

Fluxmétrie Doppler laserPlacement de la sonde périorbitaireModèle d'accident vasculaire cérébral ischémiqueModèle d'AVC chez le rongeurPlacement du filamentQuantification de la microglieLésion de reperfusionProtocole de chirurgie de l'AVC
Placement périorbitaire d’une sonde laser Doppler pour la surveillance du débit sanguin cérébral avant l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne chez des modèles de rongeurs
Contactez-nous
Recommander à la bibliothèque

Confidentialité

Conditions d’utilisation

Politiques

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Tous droits réservés.