Le protocole décrit une étude des effets systémiques et locaux sur la peau de l’exposition aux ultraviolets B chez la souris.
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Article de méthode
Le protocole décrit une étude des effets systémiques et locaux sur la peau de l’exposition aux ultraviolets B chez la souris.
Le rayonnement ultraviolet B (UVB) (280-320 nm) est reconnu comme cancérigène depuis 1928, ce qui permet de minimiser l’exposition au soleil. Cependant, des études épidémiologiques suggèrent que l’exposition au soleil est corrélée à une augmentation de l’espérance de vie et à une réduction de l’incidence des maladies cardiovasculaires et de certains cancers tels que le cancer du côlon et de l’endomètre. L’exposition aux UVB influence également le métabolisme du foie, protège contre la lipotoxicité hépatocellulaire et affecte la santé métabolique. Ces effets sont en partie dus à la synthèse de la vitamine D, bien que certains soient indépendants de la vitamine D. De plus, la photothérapie par UVB a des propriétés immunomodulatrices et est utilisée pour traiter des affections cutanées telles que le vitiligo et le psoriasis tout en affectant le système immunitaire systémique. Étant donné les effets physiologiques étendus des UVB, il existe des lacunes dans la compréhension du mécanisme derrière la plupart de ces effets. Nous avons montré que l’exposition quotidienne aux UVB de faible niveau améliore le comportement de recherche de nourriture chez les souris mâles, mais pas chez les femelles, en raison de l’augmentation de la sécrétion de ghréline par les adipocytes cutanés. Chez les femelles, l’œstrogène inhibe l’activité p53 des adipocytes, bloquant l’élévation de la ghréline et démontrant une réponse dépendante du sexe aux rayons UVB. De plus, l’activation de p53 induite par les UVB dans les kératinocytes épidermiques active l’axe hypothalamus-hypophyse-gonadique, induisant le comportement sexuel et la pro-fertilité ovarienne. Cet article décrit un protocole pour étudier les effets locaux et systémiques du rayonnement UVB faible à l’aide d’un modèle murin C57BL/6J. Les éléments clés comprennent un calibrage précis des doses d’UVB, les conditions de logement et une épilation minutieuse pour assurer une exposition constante. Les souris sont soumises à un régime d’exposition aux UVB gradué sur plusieurs semaines, avec surveillance de la santé et des changements de comportement. Les méthodes de validation de l’efficacité du rayonnement par des mesures de pigmentation sont également détaillées. En mettant l’accent sur l’étalonnage des doses d’UVB, les soins rigoureux aux animaux et les contrôles méthodologiques, ce protocole facilitera l’étude des effets complets de l’exposition aux UVB, contribuant ainsi à une compréhension nuancée de ses avantages et risques thérapeutiques.
Les fréquences du rayonnement solaire qui atteignent la surface de la Terre comprennent les rayons ultraviolets (UV), UVA (320-400 nm) et UVB (280-320 nm). Les UVB sont un inducteur de mutation. Les UV ont été reconnus comme cancérogènes en 19281, et à partir du milieu des années 1900, la réduction de l’exposition au soleil a été recommandée par mesure de précaution pour éviter le cancer de la peau2. Bien que les UVB soient clairement un déclencheur environnemental du cancer de la peau, les recherches menées au cours de la dernière décennie3 avec des études récentes de notre groupe 4,5,6 ont montré que les UVB ont de vastes effets sur les systèmes physiologiques. Une étude portant sur une cohorte de femmes suivies pendant 20 ans a révélé que l’espérance de vie était plus élevée de 2 ans chez les femmes qui n’évitaient pas le soleil par rapport aux femmes qui en évitaient7. Des études supplémentaires ont démontré que l’exposition au soleil était corrélée à une diminution des maladies cardiovasculaires et de la mortalité globale 8,9,10. Des corrélations inverses ont également été signalées entre la lumière du soleil et le cancer du côlon et le cancer de l’endomètre8. L’exposition aux UVB induit également le métabolisme hépatique11, protège contre la lipotoxicité hépatocellulaire et les maladies métaboliques, et a des effets positifs sur les endorphines et les comportements sexuels 3,6. Ces éléments de preuve indiquent les effets néfastes de l’évitement de l’exposition au soleil sur la santé humaine. Les effets bénéfiques de l’exposition au soleil ont été principalement attribués à l’induction de la production de vitamine D, cependant, au moins certains des avantages pour la santé de la lumière du soleil sont indépendants des niveaux de vitamine D 4,6,12
La peau est le plus grand organe du corps et la première ligne de défense contre les facteurs de stress environnementaux. Les couches épidermiques et dermiques de la peau sont séparées par une couche épidermique basale composée de kératinocytes et de mélanocytes10 indifférenciés et auto-renouvelables. Les kératinocytes à des stades croissants de différenciation terminale se trouvent dans la couche supérieure de l’épiderme. Le derme comprend des fibroblastes et des vaisseaux sanguins, et l’hypoderme est principalement constitué d’adipocytes. La peau est un organe dermato-endocrinien puisque plusieurs récepteurs d’hormones, tels que le récepteur des androgènes et le récepteur de l’hormone de libération de la corticotrophine, sont exprimés dans la peau, ce qui suggère que les hormones influencent les processus de la peau par des voies paracrines et autocrines 13,14,15. La peau est également productrice d’hormones. À quelques exceptions près, cependant, la production d’hormones dans la peau et la libération dans le sang n’ont pas été documentées, et les déclencheurs de l’expression ne sont pas connus (revue dans16).
Il a été démontré que les UVB ont un potentiel thérapeutique dans les maladies de la peau. La photothérapie, y compris le psoralène-UVA et la thérapie UVB à bande étroite, est la principale modalité de traitement du vitiligogénéralisé 17. La réponse à la photothérapie est survenue chez 74 % des patients à 6 mois et chez 75 % des patients à 12 mois après le début du traitement18. Le mécanisme d’action de la photothérapie dans le vitiligo n’est pas bien compris. Son action thérapeutique implique une combinaison d’effets sur la cinétique du cycle cellulaire, d’altérations de l’expression des cytokines, d’effets sur les mélanocytes et d’immunomodulation. De nombreuses études ont examiné les effets de la photothérapie sur l’immunité cutanée 19,20,21 ; Cependant, les effets systémiques sont mal compris, en particulier dans le contexte du vitiligo. Contrairement au psoriasis, où une étude a montré une diminution des cytokines pro-inflammatoires et une augmentation des lymphocytes T régulateurs après un traitement de photothérapie, dans le vitiligo, le nombre de lymphocytes T régulateurs a diminué avec la photothérapie UV21.
Bien que les UVB aient des effets sur le cerveau14,15, les glandes surrénales22, les ovaires 5,6, les testicules6, le foie11 et les ganglions lymphatiques23, les mécanismes par lesquels les UVB modulent les systèmes systémiques ne sont généralement pas connus. Ce protocole de recherche décrit un modèle murin pour l’étude des effets systémiques et locaux (peau) de l’exposition aux UVB qui facilitera l’étude des effets globaux de l’exposition aux UVB. Le modèle murin UVB présente un grand intérêt pour la physiologie de la peau, la dermatologie et le cancer de la peau, en particulier le mélanome. L’objectif global de cette méthode est de fournir un protocole simple mais robuste et efficace pour développer le modèle murin UVB pour des questions de recherche scientifique liées à la peau. Le protocole décrit comment surmonter les défis de l’érythème cutané associés à l’épilation et à l’exposition aux UVB dans des conditions physiologiques et est efficace pour étudier les effets locaux et systémiques des UVB sur la peau.
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Toutes les procédures expérimentales décrites ont été réalisées conformément aux directives du Comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux de l’Université de Tel Aviv (permis IACUC : 01-20-043).
1. Habituation des souris à l’expérience
2. Héberger les souris
3. Rasage et épilation
4. Configuration de l’exposition aux UVB
5. Exposition aux UVB
6. Analyse de l’exposition aux UVB
REMARQUE : Les souris ont été euthanasiées par asphyxie au CO2 conformément aux directives de l’AVMA.
7. Soins aux animaux
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Cet article de méthode mentionne la procédure détaillée, étape par étape, de génération du modèle murin d’exposition aux UVB. La figure 1 montre clairement la zone rasée de la souris représentative C57BL/6J sur le côté dorsal avant l’exposition aux UVB, démontrant que 50 à 60 % de la zone dorsale était rasée. Le protocole de rasage ne montre aucun signe d’érythème cutané, ce qui est de la plus haute importance pour les études dermatologiques. La figure 2 montre ...
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Les UVB sont reconnus depuis longtemps comme un facteur de risque environnemental pour les cancers de la peau ; cependant, des études récentes ont mis en lumière un spectre plus large d’effets UVB3. Il est nécessaire de mener des études qui permettent de mieux comprendre les effets systémiques des UVB. Les différentes doses utilisées en recherche fondamentale par rapport aux milieux cliniques compliquent notre compréhension des effets des UVB, ce qui souligne l’im...
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Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts.
C.L. reconnaît le soutien financier du Conseil européen de la recherche dans le cadre du programme de recherche et d’innovation Horizon 2020 de l’Union européenne (accord de subvention n° 726225), du I-CORE Gene Regulation in Complex Human Disease Center (n° 41/11) et de la Fondation israélienne pour la science (ISF ; subvention 129/13).
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| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Désinfectant ; | Amity international | Sans objet | |
| Chambre d’exposition | Fabriqué en interne | Sans objet | |
| Crème dépilatoire | Vétérinaire | Sans objet | |
| Rasoir à cheveux | Heiniger | 707-303 120 V États-Unis | |
| L’isoflurane ; | Soins intensifs Piramal | Sans objet | |
| Système isoflurane | Kent Scientific | VetFlo-1210S | |
| PBS | Sigma Aldrich | TMS-012 | |
| Chambre en plexiglas | Fabriqué en interne | Sans objet | |
| Lampe UVB | Produits ultra-violets | Série XX - 15 watts | |
| Radiomètre UVX | Produits ultra-violets | 97-0015-02 |
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