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Article de méthode

Planimétrie numérique pour l’évaluation de la cinétique de fermeture des plaies dans un modèle murin

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DOI :

10.3791/67475

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10 janvier 2025

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Dans cet article

Résumé

Les plaies représentent un défi de santé mondial. Cette étude a mis au point un photomaton standardisé utilisant la planimétrie numérique pour minimiser la variabilité des mesures des plaies. Le suivi des plaies chez la souris pendant 14 jours a révélé une augmentation initiale de la surface et du périmètre de la plaie, suivie d’une fermeture progressive. Cette méthodologie peut aider à évaluer la cinétique de fermeture des plaies dans des modèles précliniques.

Résumé

Les plaies chroniques, en raison de leur prévalence élevée, constituent un grave problème de santé mondial. Des stratégies thérapeutiques efficaces peuvent accélérer considérablement la guérison, réduisant ainsi le risque de complications et allégeant le fardeau économique des systèmes de santé. Bien que de nombreuses études expérimentales aient porté sur la cicatrisation des plaies, la plupart reposent sur des observations qualitatives ou des mesures directes quantitatives. L’objectif de cette étude était de standardiser une méthode de mesure indirecte des plaies à l’aide de la planimétrie numérique, intégrant la mise à l’échelle et la segmentation numériques. Cette approche remédie au manque de méthodologies détaillées, étape par étape, pour une évaluation précise des plaies. Une cabine de photodocumentation a été conçue et construite, et des outils de planimétrie numérique assistés par ordinateur ont été utilisés pour minimiser la variabilité des mesures de la zone de la plaie, du périmètre et de la distance entre le centre de la plaie et ses bords. Une plaie traumatique circulaire (5 mm de diamètre) a été créée sur la ligne médiane dorsale au niveau de l’omoplate de souris CD1 mâles (n = 4, âgées de 10 semaines, 30-35 g). L’évolution de la plaie a été photodocumentée pendant 14 jours à l’aide du photomaton conçu sur mesure, qui contrôlait les conditions d’éclairage, la distance focale et le positionnement du sujet. Les mesures de détartrage et de plaie ont été effectuées à l’aide de la segmentation dans le logiciel ImageJ, et l’analyse statistique a été effectuée à l’aide d’un logiciel d’analyse statistique. La cinétique de fermeture de la plaie a montré une légère augmentation de la taille et du périmètre de la plaie entre le jour 0 et le jour 2, suivie d’une diminution progressive jusqu’à la fermeture complète au jour 14. La cabine de photodocumentation et la planimétrie numérique assistée par ordinateur ont permis des mesures quantitatives avec une variabilité minimale. En conclusion, ces outils fournissent une méthode fiable et reproductible pour évaluer la cinétique de fermeture des plaies dans des modèles précliniques.

Introduction

La cicatrisation traumatique des plaies prend environ 21 jours et comporte une séquence bien définie de quatre phases distinctes : (1) hémostase, (2) inflammation, (3) prolifération et (4) remodelage1. Si une phase de cicatrisation des plaies est prolongée, elle peut entraîner le développement de plaies chroniques1. En raison de leur prévalence élevée, de leurs complications potentielles2 et de leur fardeau économique important, ils sont considérés comme un problème de santé mondial.

Les études précliniques visent à accélérer la cicatri....

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Protocole

Toutes les procédures expérimentales impliquant des souris de laboratoire ont été menées conformément aux normes et règlements éthiques établis dans la norme officielle mexicaine (NOM-062-ZOO-1999) pour la manipulation et les soins des animaux de laboratoire. Le protocole a été examiné et approuvé par le Comité interne pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire (CICUAL) de l’Institut national de recherche nucléaire (ININ) sous la référence CICUAL-01-23. Des souris CD1 mâles (n = 4), âgées de 10 semaines, avec un poids corporel variant de 28 à 32 g, ont été utilisées dans cette étude. Tous les animaux ont été sélectionnés pour assurer l’uniformité de la s....

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Résultats

Après mise à l’échelle des images dans le logiciel ImageJ, le périmètre moyen (tableau 1) et la surface (tableau 2) des plaies, ainsi que leurs écarts-types respectifs, ont été obtenus par segmentation numérique. Ces valeurs ont été enregistrées du jour zéro au quatorzième jour (J0-J14).

JourPérimètre (mm)
022.75 ± 0.89.......

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Discussion

Dans les modèles précliniques, l’analyse quantitative de l’évolution des plaies traumatiques dans les modèles précliniques se heurte à des défis en raison de facteurs tels que la taille de la plaie, la réponse inflammatoire localisée34, la localisation et/ou la manipulation. Des méthodes de planimétrie manuelles directes36 et numériques indirectes 11,16,37,38 existent pour ces mesures.

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu’il n’y a pas de conflits d’intérêts liés à cette recherche.

Remerciements

Les auteurs tiennent à remercier le Consejo Nacional de Humanidades, Ciencias y Tecnologías (CONAHCyT, CVU : 933600) par le biais de la subvention pour le financement, ainsi que le Laboratorio Nacional de Investigación y Desarrollo de Radiofármacos del Instituto Nacional de Investigaciones Nucleares (LANIDER-ININ) pour leur soutien. De plus, la figure 2 a été préparée à l’aide du logiciel BioRender (2020), disponible à l’BioRender.com/p67z056.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Poinçon de biopsie 5 mmMILTEX, USA33-35Pour marquer les bords de la plaie
Aluminium avec noyau en polyéthylèneAlucobond, USABright Silver 119Pour la construction de la cabine d’acquisition d’images macroscopiques
Objectif de caméra  ;Sony, JaponSEL2470ZPour focaliser les images à photographier
ÉlectrocautérisationBonart, États-UnisART-E1Pour éliminer les points de saignement dans la plaie s’ils sont présents.
Bandes d’attache auto-agrippantes  ;VELCRO
IBM SPSS Statistics Version 22IBM Corporation, États-Unishttps://www.ibm.com/analytics/spss-statisticsUtilisé pour l’analyse statistique des mesures de plaie, y compris les données de surface et de périmètre.
ImageJ Version 1.53tNational Institutes of Health, États-Unishttps://imagej.nih.gov/ij/Utilisé pour le traitement d’images macroscopiques, y compris la mise à l’échelle, la segmentation et la mesure des paramètres de la plaie.
KetorolacSIEGFRIED RHEIN, Mexique493977Pour la gestion de la douleur postopératoire
Ciseaux à iris Miltex, 4-1/8" incurvéMILTEX,États-Unis V95-306Pour couper le lambeau de plaie généré avec le poinçon de biopsie
RGB LED Light TubeANDOER, Chine&lrm ; B09F8RLMSYPour éclairer la cabine d’acquisition d’images macroscopiques
Caméra semi-professionnelleSony, Japon. DSC-HX300Pour prendre les photos
Pince denteléeMILTEX, USAV96-118Pour maintenir le rabat pendant la coupe
SevofluraneBaxter, USAAMX2L9117PRPour l’anesthésie inhalée
Pentobarbital de sodiumAranda, Mexique734.448.001.212Pour l’anesthésie intrapéritonéale
SolidWorks Version 2015Dassault Systè ; mes, France  ; https://www.solidworks.com/Utilisé pour concevoir et créer des modèles 3D pour la construction d’accessoires pour la cabine de photodocumentation.
Lames chirurgicales  ;HERGOM, MexiqueH10Pour raser les poils dans la zone où la plaie sera créée
Pansement adhésif transparent3M, USAF51CA07Pour couvrir la plaie traumatique

Références

  1. Martinengo, L., et al. Prevalence of chronic wounds in the general population: systematic review and meta-analysis of observational studies. Ann Epidemiol. 29, 8-15 (2019).
  2. Chen, X., Shi, X., Xiao, H., Xiao, D., Xu, X. Resear....

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Réimpressions et autorisations

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